CAR-T 细胞培养制备一次性耗材技术要求 第1部分：细胞冻存袋、细胞储液袋

T/ZZAMA005.1—2022

ICS03.120.10

CCSC00

团体标准

T/ZZAMA005.1—2022

CAR-T细胞培养制备一次性耗材技术要求

第1部分：细胞冻存袋、细胞储液袋

Technicalrequirementofsingle-use

materialsinCAR-Tproduction

Part1:Cellfrozenbag、Cellholdingbag

（征求意见稿）

2022-XX-XX发布2022-XX-XX实施

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中关村中慧先进制造产业联盟发布

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前言

本标准根据GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和

起草规则》的规定起草。

本标准的某些内容可能涉及专利，本标准的发布机构不承担识别专利责任。

本标准由华道（上海）生物医药有限公司提出。

本标准由中关村中慧先进制造产业联盟归口。

本标准共同起草单位：华道（上海）生物医药有限公司、中关村中慧先进制造产

业联盟、广西医科大学生命科学研究院、重庆市璧山职业教育中心、浙江金仪盛世生

物工程有限公司、苏州方位无菌包装有限公司、常州恒方大高分子材料科技有限公司、

重庆大学附属肿瘤医院。

本标准主要起草人：余学军、陈玉涛、刘耀、梁浩、钱莉莉、吴明贵、苑兰起、

李桂芳、甄敏娜、张健。

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引言

近年来，随着免疫治疗技术的快速发展，嵌合抗原受体T细胞免疫疗法（Chimeric

AntigenReceptorT-CellImmunotherapy，CAR-T疗法）因其在白血病、淋巴瘤、多

发性骨髓瘤等病种的治疗中展现出显著的治疗效果而成为国内外研究机构和产业界共

同关注的焦点。随着我国对CAR-T技术的研究不断深入，国内企业的积极布局和产业

链的延伸，我国的CAR-T细胞治疗技术也在紧随国际趋势快速发展。

CAR-T细胞作为一类特殊的免疫细胞，其制备和质量控制具有特殊性。本团体标准

是一次性耗材细胞冻存袋、细胞储液袋的技术要求。

细胞冻存袋主要是为CAR-T药物的保存、运输起到防护作用。

细胞储液袋，是在CAR-T细胞培养过程中，作为药品的“中间站”作用，即完成

在结束上道培养工序后，进行下道培养工序前的细胞储存工作。

中关村中慧先进制造产业联盟

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CAR-T细胞培养制备一次性耗材技术要求

第1部分细胞冻存袋、细胞储液袋

1范围

本文件规定了CAR-T细胞培养制备中一次性耗材细胞冻存袋、细胞储液袋的技术

要求，以及储存、运输过程中的技术要求及质量控制。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，

注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件。其最

新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB14232.1-2020人体血液及血液成分袋式塑料容器第1部分:传统型血袋

GB/T1962.1-2015注射器、注射针及其他医疗器械6%（鲁尔）圆锥接头第1部

分：通用要求

GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法

GB8369.1-2019一次性使用输血器第1部分：重力输血式

《中华人民共和国药典》2020版

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1CAR-T

嵌合抗原受体T细胞。

3.2CAR-T疗法

嵌合抗原受体T细胞免疫疗法（ChimericAntigenReceptorT-Cell

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Immunotherapy，CAR-T疗法）。

3.3无菌接头

各耗材之间的连接装置，由于耗材连接时，也必须确保耗材内部的环境属于无菌

环境，故耗材连接的接头称为“无菌接头”。

3.4罗伯特软管夹

罗伯特软管夹用途主要是用来夹住软管、输液管等，来控制液体的流速。该产品

是由国外一位叫罗伯特的人发明的，故称为“罗伯特软管夹”，亦可称为“罗伯特止

水夹”。

3.5输血插口(又名蝴蝶接头)

输入插口通道，因为该插口外形类似蝴蝶，故又称为“蝴蝶接头”。

4产品材质

4.1细胞冻存袋

袋体推荐材质：EVA

4.2细胞储液袋

袋体推荐材质：EVA

5技术要求：细胞冻存袋、细胞储液袋

5.1细胞冻存袋技术要求

5.1.1外观要求

5.1.1.1在距离产品40~60cm目视产品，袋体应无明显杂质、斑点、气泡，内外表

面应平整，内壁不粘连，热合线应透明、均匀，悬挂孔眼应规整。

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5.1.1.2无菌接头及各部件不得有裂纹、孔洞。

5.1.2尺寸要求

尺寸：管路长度公差为±5mm。

5.1.3物理要求

5.1.3.1透明度

与一充满水的同种塑料袋相比较，透过袋体应能观察出悬浮液呈乳白色。

5.1.3.2热稳定性

袋子连接处应无泄漏并符合抗漏性和悬挂孔眼的承重的要求。

5.1.3.3抗漏性

5.1.3.3.1细胞冻存袋体不应该泄漏。

5.1.3.3.2细胞冻存袋体与导管系统连接及各导管连接处应不产生泄漏。

5.1.3.4悬挂孔眼的承重

标识容量≤200ml袋子的悬挂装置应能承受20N的拉力60min不断裂。

5.1.3.5加压排空

袋子能排空内装液而无泄漏。

5.1.3.6色泽

袋子材料着色的程度不影响对内装液颜色的评价。

5.1.3.7输血插口（又名蝴蝶接头）

5.1.3.7.1细胞冻存袋应有一个或多个输血插口（又名蝴蝶接头），供插入输血器输

注血液或血液成分进行取样。插口应该有一个可刺穿、刺后不能再密封的隔膜。

插口应能与符合GB8369.1-2019带有瓶塞穿刺器的输血器连接，且插入处在使用

条件下，包括加压排空（见5.1.3.5）条件下无泄漏。隔膜被瓶塞穿刺器尖部穿刺

之前，插口应该与瓶塞穿刺器紧密配合。按制造厂使用说明操作时，输血器瓶塞

穿刺器不应该损坏所插入的冻存袋的塑料膜。

5.1.3.7.2每个插口应有一个与外界隔绝的、一旦打开留有痕迹的保护装置，以保持

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T/ZZAMA005.1—2022

内表面无菌。

5.1.3.8罗伯特软管夹

罗伯特软管夹正常处于开启状态，液体能畅通经过管路，关闭时应能截流，连续

开关十次应不损坏。

5.1.4不溶性微粒

产品微粒应符合表1规定。

表1.产品微粒要求

微粒要求

序号物料名称

10µm及以上25µm及以上

1细胞冻存袋≤12(粒/ml)≤2(粒/ml)

5.1.5化学要求

5.1.5.1原始容器或薄片的要求

聚烯烃的灼烧残渣最大允许值0.5mg/g。

5.1.5.2试验液的要求

当对浸液进行试验时，应不超过表2规定的限量。

表2.浸提液化学限量

性能最大允许量

还原物质1.5ml

铵离子0.8mg/L

氯离子4mg/L

金属Ba1mg/L

金属Cr1mg/L

金属Cu1mg/L

金属Pb1mg/L

金属Sn0.1mg/L

金属Cd0.1mg/L

金属：Al0.05mg/L

重金属2mg/L

酸碱度0.4ml氢氧化钠溶液，c(NaOH)=0.01mol/L;

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0.8ml盐酸溶液，c(HCL)=0.01mol/L

蒸发残渣5mg或50mg/L

浊度微乳浊，但不超过参照悬浮液

色泽无色

紫外（UV）吸收在230nm-360nm范围内，0.25

5.1.6无菌

产品经辐照灭菌（或环氧乙烷灭菌）后，应无菌。

5.1.7细菌内毒素

按照规定的方法，细菌内毒素限量应小于20EU/件。

5.1.8热原

本品应无热原。

5.2细胞储液袋技术要求

5.2.1外观要求

5.2.1.1在距离产品40~60cm目视产品，袋体应无明显杂质、斑点、气泡，内外

表面应平整，内壁不粘连，热合线应透明、均匀，悬挂孔眼应规整。

5.2.1.2无菌接头及各部件不得有裂纹、孔洞。

5.2.2尺寸要求

尺寸：用通用量具或专用量具测量，结果应符合规定。

5.2.3物理要求

5.2.3.1透明度

与一充满水的同种塑料袋相比较，透过袋体应能观察出悬浮液呈乳白色。

5.2.3.2抗漏性

5.2.3.2.1组件不应该泄漏。

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5.2.3.2.2组件的管路系统连接处应不产生泄漏。

5.2.3.3悬挂孔眼的承重

5.2.3.3.1标识容量≤200ml袋子的悬挂装置应能承受20N的拉力60min不断裂。

5.2.3.3.2标识容量在3000ml的袋子的的悬挂装置应能承受30N的拉力60min不断

裂。

5.2.3.3.3标识容量在10000ml的袋子的的悬挂装置应能承受98N的拉力60min不断

裂。

5.2.3.4色泽

袋子材料着色的程度不影响对内装液颜色的评价。

5.2.3.5罗伯特软管夹

罗伯特软管夹正常处于开启状态，液体能畅通经过管路，关闭时应能截流，连续

开关十次应不损坏。

5.2.3.6鲁尔接头

鲁尔接头尺寸应符合《GB/T1962.1-2015注射器、注射针及其他医疗器械6%（鲁

尔）圆锥接头第1部分：通用要求》的规定。

5.2.4不溶性微粒

产品微粒应符合表3规定。

表3.产品微粒要求

微粒要求

序号物料名称

10µm及以上25µm及以上

1细胞储液袋≤12(粒/ml)≤2(粒/ml)

5.2.5化学要求

5.2.5.1原始容器或薄片的要求

聚烯烃的灼烧残渣最大允许值0.5mg/g。

5.2.5.2试验液的要求

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当对浸液进行试验时，应不超过表4规定的限量。

表4浸提液化学限量

性能最大允许量

还原物质1.5ml

铵离子0.8mg/L

氯离子4mg/L

金属Ba1mg/L

金属Cr1mg/L

金属Cu1mg/L

金属Pb1mg/L

金属Sn0.1mg/L

金属Cd0.1mg/L

金属：Al0.05mg/L

重金属2mg/L

0.4ml氢氧化钠溶液，c(NaOH)=0.01mol/L;

酸碱度

0.8ml盐酸溶液，c(HCL)=0.01mol/L

蒸发残渣5mg或50mg/L

浊度微乳浊，但不超过参照悬浮液

色泽无色

紫外（UV）吸收在230nm-360nm范围内，0.25

5.2.6无菌

产品经辐照灭菌（或环氧乙烷灭菌）后，应无菌。

5.2.7细菌内毒素

按照规定的方法，细菌内毒素限量应小于20EU/件。

5.2.8热原

产品应无热原。

6检验方法

6.1外观

以正常或矫正视力，目力观测，结果应符合规定。

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6.2尺寸

用通用量具或专用量具测量，结果应符合规定。

6.3物理试验

6.3.1透明度

按照GB14232.1-2020规定试验时，与一充满水的同种袋体相比较，透过袋子应

能观察出悬浮液呈乳白色。

6.3.2热稳定性

将细胞冻存袋充入符合GB/T6682-2008的水至公称容量的一半，用手持热合机热

合掉多余管路接头，放入铝制外包装盒，再放进液氮环境（铝盒完全浸没），储存24h，

随后浸入(37±2)℃的水浴中60min，然后恢复至室温，细胞冻存袋应满足细胞冻存袋

应满足抗漏性和悬挂孔眼承重的性能要求。

6.3.3抗漏性

6.3.3.1细胞冻存袋的抗漏性

向细胞冻存袋充入符合GB/T6682-2008的水至公称容量，将其密封。在37℃、

5000g条件下离心10min，应不产生泄漏。随后将细胞冻存袋放在两平板之间挤压，在

(23±5)℃条件下，使内部压力升高至高于大气压强50Kpa，持续15s，应不产生泄漏。

6.3.3.2细胞冻存袋的管路连接处的抗漏性

在(23±5)℃条件下，细胞冻存袋充水至公称容量并密封后，细胞冻存袋和管路系

统的连接处应能承受施加到导管上的20N的拉力，持续15s无泄漏。施加拉力时应与

连接处边缘成直角，且在细胞冻存袋平面纵轴方向上。

6.3.3.3其他组件的抗漏性

用罗伯特软管夹封闭组件通道，通过无菌接头向整个组件内部充气，使内部压力

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升高至高于大气压强50Kpa，持续10s，应不产生泄漏。

6.3.3.4其他组件的管路连接处抗漏性

在(23±5)℃条件下，各连接处能承受施加到沿导管方向轴向15N拉力，持续15s

不断裂，不脱落。

6.3.4悬挂孔眼的承重

6.3.4.1在(23±5)°C条件下，标识容量≤200ml袋体悬挂孔眼应能承受沿轴向施

加的20N拉力60min不断裂。

6.3.4.2在(23±5)°C条件下，标识容量＞200和≤等于3000ml袋体悬挂孔眼应能

承受沿轴向施加的30N拉力60min不断裂。

6.3.4.3在(23±5)°C条件下，标识容量＞3000和≤等于10000ml袋体悬挂孔眼应

能承受沿轴向施加的98N拉力60min不断裂。

6.3.5加压排空

细胞冻存袋中充入温度为(23±5)°C的水至公称容量，并使输血插口与输血器连

接，将其放在两板之间，逐渐挤压至内部压强高于大气压50kPa时，袋体的水应在2min

内排空且无泄露。

6.3.6色泽

以目测观察，袋体材料着色的程度不影响对内装液颜色的评价。

6.3.7输血插口

细胞冻存袋应有一个或多个输血插口(又名蝴蝶接头)，供插入输血器输注血液或血

液成分。输血插口应有一个可刺穿、刺后不能再密封的隔膜。输血插口应能与符合GB

8369.1-2019带有瓶塞穿刺器的输血器连接，且插入处在使用条件下，包括加压排空条

件下无泄漏。隔膜被瓶塞穿刺器尖部穿刺之前，插口应与瓶塞穿刺器紧密配合。按制

造厂使用说明操作时，输血器瓶塞穿刺器不应该损坏所插入的细胞冻存袋的塑料膜。

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每个输血插口应有一个与外界隔绝的、一旦打开留有痕迹的保护装置，以保持内表面

无菌。

6.3.8罗伯特软管夹

管路中充入温度为(23±5)°C的水，罗伯特软管夹正常处于开启状态，液体能畅

通经过管路，关闭时应能截流，连续开关十次应不损坏。

6.3.9鲁尔接头

按照《GB/T1962.1-2015注射器、注射针及其他医疗器械6%（鲁尔）圆锥接头第

1部分：通用要求》的规定进行检测，结果应符合规定。

6.4不溶性微粒

按照《中华人民共和国药典（2020）版》四部通则0903不溶性微粒检查法光阻

法试验时，产品不溶性微粒符合规定。

6.5化学试验

6.5.1聚烯烃灼烧残渣

按GB14232.1-2020规定试验时，灼烧残渣应符合5.1.5.1的要求。

6.5.2试验液的制备

6.5.2.1先后两次向空袋体（管路）中充入公称容量的注射用水，振摇约1min后排

空血袋。洗液排空后，向空细胞冻存袋中充入公称容量的注射用水。然后挤压细

胞冻存袋，排除细胞冻存袋中残存的空气并密封细胞冻存袋，在(37±1)°C下浸

提72小时。取出同等容量的注射用水做对照液(空白液)。

6.5.2.2按照GB14232.1-2020的规定对上述试验液实验时，应不超过规定的浸提

液化学限量。

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6.6无菌

按照《中华人民共和国药典（2020）版》四部通则1101无菌检查法直接接种法进

行试验，应符合5.1.6的要求。

6.7细菌内毒素

按《中华人民共和国药典（2020）版》四部通则1143细菌内毒素检查法进行试验，

应符合5.1.7的要求。

6.8热原

按《中华人民共和国药典（2020）版》四部通则1142热原检查法进行试验，应符

合5.1.8的要求。

7包装、储运要求

7.1包装

7.1.1内包装采用吸塑盒和特卫强盖材热合密封。

7.1.2外包装采用瓦楞纸箱包装。

7.2储运要求

7.2.1产品储存保持于清洁、通风处，温度-10~30℃，湿度＜80%RH。

7.2.2产品在运输时，应防止重压，阳光直射和雨水淋湿。

8标签要求

8.1包装标签:

该标签应是明显可见的﹐应包括下列信息

8.1.1制造商的名称和地址。

8.1.2产品名称、型号、规格。

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8.1.3批号。

8.1.4有效期。

8.2辐照标签

灭菌后辐照标签由黄色转变为红色。

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目录

前言........................................................................................................................................................3

引言........................................................................................................................................................4

1范围...........................................................................................................................................................5

2规范性引用文件........................................................................................................................................5

3术语和定义................................................................................................................................................5

3.1CAR-T............................................................................................................................................5

3.2CAR-T疗法...................................................................................................................................5

3.3无菌接头........................................................................................................................................6

3.4罗伯特软管夹.................................................................................................................................6

3.5输血插口(又名蝴蝶接头)...............................................................................................................6

4产品材质....................................................................................................................................................6

4.1细胞冻存袋....................................................................................................................................6

4.2细胞储液袋....................................................................................................................................6

5技术要求：细胞冻存袋、细胞储液袋....................................................................................................6

5.1细胞冻存袋技术要求.....................................................................................................................6

5.2细胞储液袋技术要求.....................................................................................................................9

6检验方法...................................................................................................................................................11

6.1外观...............................................................................................................................................11

6.2尺寸...............................................................................................................................................12

6.3物理试验.......................................................................................................................................12

6.4不溶性微粒...................................................................................................................................14

6.5化学试验.......................................................................................................................................14

3

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6.6无菌...............................................................................................................................................14

6.7细菌内毒素...................................................................................................................................15

6.8热原...............................................................................................................................................15

7包装、储运要求.......................................................................................................................................15

7.1包装...............................................................................................................................................15

7.2储运要求.......................................................................................................................................15

8标签要求.............................................