DB54T-食品安全-黄石爬鮡

ICS FORMTEXT点击此处添加ICS号FORMTEXT点击此处添加中国标准文献分类号FORMTEXT     DBFORMTEXT  DBFORMTEXTXX/FORMTEXTXXXXX—FORMTEXTXXXXFORMTEXT     FORMTEXT黄石爬鮡FORMTEXT     FORMTEXT     FORMDROPDOWNFORMTEXT     FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX发布FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX实施FORMTEXT西藏自治区市场监督管理局   发布DBXX/XXXXX—XXXX25560前  言 II199641范围 1239112规范性引用文件 1236373术语和定义 1214874主要形态构造特征 1235855生长和繁殖特性 3209876遗传学特性 4293887检测方法 5164238检验规则与结果判定 625566附录A 725566附录B 8前  言本文件按GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由西藏自治区农业农村标准化技术委员会提出并归口。本文件起草单位：华中农业大学、西藏自治区农牧科学院水产科学研究所、华电金沙江上游水电开发有限公司、西南大学。本文件主要起草人：杨瑞斌、杨学芬、夏勇、赵恒、唐茂刚、熊皓、邢伟、曾本和、王壮壮、刘海平、卢嘉懿、苏晓静、范雅文、汪灏。本文件为首次制定。黄石爬鮡1范围本文件规定了黄石爬鮡（Euchiloglaniskishinouyei）的主要形态构造特征、生长与繁殖特性、遗传学特性、检测方法、检验规则与结果判定。本文件适用于黄石爬鮡的种质鉴定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18654.1养殖鱼类种质检验第1部分：检验规则GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分：抽样方法GB/T18654.3养殖鱼类种质检验第3部分：性状测定GB/T18654.4养殖鱼类种质检验第4部分：年龄与生长的测定GB/T18654.6养殖鱼类种质检验第6部分：繁殖性能的测定GB/T18654.12养殖鱼类种质检验第12部分：染色体组型分析GB/T18654.13养殖鱼类种质检验第13部分：同工酶电泳分析GB/T22213水产养殖术语3术语和定义下列术语和定义适用于本规范。3.1学名和俗名黄石爬鮡Euchiloglaniskishinouyei（Kimura，1934）；俗称石爬子，黄石爬。3.2分类地位硬骨鱼纲（Osteichthyes）、鲇形目（Siluriformes）、鮡科（Sisoridae）、石爬鮡属（Euchiloglanis）。4主要形态构造特征4.1外部形态特征4.1.1外部形态体延长，前部宽扁，后部侧扁，腹部平直，体表光滑无鳞。头部宽扁；眼小；口下位，横裂，唇厚，具发达乳突，上唇乳突呈梳状排列，下唇中央具缺刻；上颌齿带两端向后延伸部有明显节痕；须4对：鼻须1对，长度可达眼后缘；颌须1对，基部宽扁，末端延长、尖细，可伸达胸鳍基部；2对颐须，外侧颐须较长，刚达或略超过胸鳍起点。胸鳍短，其末端显著不达腹鳍起点；腹鳍盖过肛门，活体背部呈黄褐色至灰褐色，散布不规则深褐色云纹状斑块；体侧颜色渐浅，腹部乳白色或淡黄色；各鳍条浅灰色，胸鳍和尾鳍基部常具不明显暗斑。雌雄个体的外形区别在于非生殖期雄性肛门后面具有生殖乳突，生殖期雌体腹部突出较高。黄石爬鮡外形见图1~图5，黄石爬鮡雌、雄生殖孔见图6。图SEQ图\*ARABIC1~5黄石爬鮡的外部形态体背面观；2.体侧面观；3.体腹面观（雌）；4.体腹面观（雄）；5.上颌齿带图6黄石爬鮡雌性（左）、雄性（右）生殖孔4.1.2可数性状4.1.2.1背鳍鳍式：D.i-5~6；4.1.2.2臀鳍鳍式：A.i-4~5；4.1.2.3胸鳍鳍式：P.i-12~14；4.1.2.4腹鳍鳍式：V.i-5；4.1.2.5鳃耙数：8~11；4.1.2.6脊椎骨数：36。4.1.3可量性状黄石爬鮡的可量性状实测比例值见表1。表1黄石爬鮡可量性状比例值体长/体高体长/头长体长/尾柄长体长/尾柄高头长/吻长头长/眼径头长/眼间距尾柄长/尾柄高6.10~7.943.59~4.443.40~5.5011.86~19.174.33~8.9915.20~21.792.12~3.662.40~3.204.2内部构造4.2.1鳔单室鳔，退化为薄壁囊状。4.2.2肠肠道呈“Z”字形，肠道系数为0.45。4.2.3肝脏分为主肝和副肝，主肝左右两叶位于围心腔后，左叶稍长，主肝侧边伸出连接带与副肝相连，副肝位于胸鳍基部后方的皮下腔隙中。4.2.4性腺雄性精巢下端为一囊状物，囊状物以上分为左右两页不规则的羽状分支，悬系于腹腔背壁两侧；雌性卵巢为单个，呈椭圆形囊状，卵巢系膜悬系于腹腔背壁，位于肾脏的腹面，消化道的背面。5生长和繁殖特性5.1生长4龄到14龄年龄组黄石爬鮡的体长和体重的分布情况见表2，体长与体重关系式、体长和体重生长方程见附录A。表24龄-14龄年龄组黄石爬鮡的体长和体重组成年龄Age体长Bodylength(cm)体重Bodyweight(g)范围

Range平均值±标准差

Mean±SD范围

Range平均值±标准差

Mean±SD411.4~13.312.47±0.9725~4431.67±10.69512.7~14.313.73±1.7934~4539.50±14.11612.9~15.714.03±1.2743~5046.25±2.87713.2~16.314.68±1.7146~6052.00±7.21813.3~16.414.75±1.1045~8758.43±11.44913.7~17.314.88±1.1851~9361.67±13.301014.8~19.015.87±1.5252~9466.40±22.931115.1~19.116.57±1.3656~9677.07±16.571215.4~19.3518.09±1.7664~11294.71±30.891316.0~19.4181.2±1.7864~115102.17±24.101417.6~19.6186.3±1.9168~122104.94±17.215.2繁殖5.2.1性成熟年龄雌鱼为6龄，雄鱼为5龄。5.2.2繁殖季节繁殖期为6月~8月。5.2.3产卵类型一次性产卵类型。以卵块形式整体产出，卵粒之间常成片地粘附在石块和砂粒上。卵块无粘性，卵沉性，黄色。5.2.4怀卵量个体绝对繁殖力214粒~455粒，平均283粒/尾。6遗传学特性6.1细胞遗传学特性6.1.1体细胞染色体数2n=54式中：n——倍性。6.1.2核型公式16m+14sm+6st+18t式中：m——中部着丝粒染色体；sm——亚中部着丝粒染色体；st——亚端部着丝粒染色体；t—端部着丝粒染色体。6.1.3染色体臂数NF=84式中：NF——染色体臂数。6.1.4黄石爬鮡染色体组型图7黄石爬鮡染色体组型标引序号说明：m—中部着丝粒染色体；sm—亚中部着丝粒染色体；st—亚端部着丝粒染色体；t—端部着丝粒染色体。6.2生化遗传学特性黄石爬鮡10种组织乳酸脱氢酶（LDH）电泳图谱见图8。条带从左到右依次为：主肝、副肝、脑、心、脾、肾、鳃、眼、背部肌肉、消化道。图8黄石爬鮡10种组织乳酸脱氢酶酶谱模式图注：ML：主肝；AL：副肝；B：脑；H：心脏；S：脾脏；K：肾脏；G：鳃；E：眼；M：背部肌肉；D：消化道7检测方法7.1抽样按GB/T18654.2的规定执行。7.2性状测定按GB/T18654.3的规定执行。7.3年龄鉴定采用脊椎骨鉴定年龄，按GB/T18654.4的规定执行。7.4繁殖力测定按GB/T18654.6的规定执行。7.5染色体检测按GB/T18654.12的规定执行。7.6同工酶检测7.6.1试剂及配制方法同工酶各种试剂的配制见附录B。7.6.2样品的采集与制备选取健康活鱼，MS-222麻醉后迅速取出各组织研磨，在冰浴条件下按1:5（g/mL）的比例加入20%蔗糖进行匀浆并分装于离心管中。匀浆液于4℃、12000r/min条件下离心40min，取其上清液按1:1（V:V）的比例加入氯仿，再次离心30min，取上清液，分装于离心管中（每管50μL），于-20℃短时间保存。7.6.3制胶将分离胶液倒入模板约3/4高度，注入双蒸水，静置40min。待凝胶聚合，去除其上层水，将浓缩胶倒入模板，插上梳子，静置30min，待凝胶聚合。7.6.4点样点样量为10μL。吸取20μL样品与4μL加样指示剂（溴酚蓝）混匀，吸取10μL注入样孔中。7.6.5电泳分离1.采用聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳。分离胶浓度8%，浓缩胶浓度5%；2.电极缓冲液：pH为8.3的Tris-Gly溶液；3.电泳：恒压600V，电流为10mA，电泳约1.5h~2h，指示剂过浓缩胶后将电流调至20mA，继续电泳约3.5h；4.染色：电泳结束，加入显色液，37℃培养箱避光孵育5min~10min。8检验规则与结果判定按GB/T18654.1的规定执行。

（资料性附录）

生长方程、体长与体重关系式A.1体长与体重关系式黄石爬鮡雌、雄个体的体长（L）、体重（W）数据经幂函数公式W=aLb拟合后，结果如下：W♀=5×10-5L2.7828(R2=0.9111,n=107)W♂=3×10-5L2.9013(R2=0.9248,n=101)以实测体长为协变量进行协方差分析，结果显示黄石爬鮡体重和性别无关（F=0.613，P=0.435＞0.05），故采用雌雄群体合并的方程：W=3×10-5L2.8838(R2=0.9188,n=208)A.2体长和体重生长方程体长生长方程：Lt=248.3[1-e-0.089(t+2.495)]体重生长方程：Wt=242.0[1-e-0.089(t+2.495)]2.8838式中：Lt—t龄时鱼体体长，mm；Wt—t龄时鱼体体重，g；e—自然对数；t—鱼的年龄。

（资料性附录）

同工酶试剂的配制B.1凝胶制备B.1.1凝胶制备溶液配制各种凝胶制备溶液的配方及配制方法见表B.1。表B.1各种凝胶制备溶液配方溶液配制方法Tris-Gly原液取6gTris和28.8gGly混匀，加入ddH2O到1L，常温储存Tris-Gly缓冲液Tris-Gly原液稀释10倍APS（10%PAGE胶凝固剂）取1gAPS，加入10mLddH2O，使用移液枪分装为50μL/管LDH显色液取1%的辅酶Ⅰ（NAD）溶液3mL、6%乳酸钠溶液2mL、1%氯化硝基四氮唑蓝（NBT）4.8mL和1%吩嗪甲酯硫酸盐（PMS）溶液0.4mL混匀，避光储存B.1.2分离胶和浓缩胶的制备表B.2凝胶制备配方15mL8%分离胶组分名称组分体积30%PAGE(Acr/Bis=29:1)4.05mL1.5MTris-HCL(PH=8.8)3.75mLddH2O6.90mLAPS150μLTEMED（PAGE胶促凝剂）15μL5mL5%浓缩胶30%PAGE0.83mL1.5MTris-HCL(pH=6.8)0.625mLddH2O3.42mLAPS75μLTEMED7.5μLB.2加样指示剂0.15%溴酚蓝-