DB54T 0592-2026 藏猪大肠杆菌病防治技术规范

ICS65.020.3054CCSB4154西 藏 自 治 区 地 方 标 准DB54/T0592—2026藏猪大肠杆菌病防治技术规范2026-03-09发布 2026-04-09实施西藏自治区市场监督管理局  发布DB54/T0592DB54/T0592—2026PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前言 II范围 1规范性引用文件 1术语和定义 1诊断 1预防 3治疗 4疫情监测与处理 4附录A（资料性） 大肠埃希氏菌的分离鉴定 6附录B（资料性） 大肠埃希氏菌分型毒力基因鉴定 7附录C（资料性） 大肠埃希氏菌黏附素基因鉴定 9前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由西藏自治区农业农村标准化技术委员会提出并归口。本文件起草单位：西藏农牧大学、江苏农牧科技职业学院、南京农业大学。DB54/T0592DB54/T0592—2026PAGEPAGE1藏猪大肠杆菌病防治技术规范范围本文件规定了藏猪大肠杆菌病的诊断、预防、治疗和疫情监测与处理等方面的技术要求。本文件适用于藏猪大肠杆菌病的防治。规范性引用文件（包括所有的修改单适用于本文件。GB4789.6 食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验GB5749 生活饮用水卫生标准GB13078 饲料卫生标准GB/T36195 畜禽粪便无害化处理技术规范NY/T388畜禽场环境质量标准NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY/T682畜禽场场区设计技术规范NY/T1167畜禽场环境质量及卫生控制规范NY/T2839致仔猪黄痢大肠杆菌分离鉴定技术NY/T3075畜禽养殖场消毒技术术语和定义下列术语和定义适用于本文件。致泻大肠埃希氏菌藏猪大肠杆菌病诊断临床综合诊断易感动物7日龄内仔猪易感仔猪黄痢；10日龄～30日龄仔猪易感仔猪白痢；断奶仔猪易感猪水肿病。传染源主要是病猪和带菌猪。传播途径主要通过消化道传播，粪-口传播是主要途径。流行特点一年四季均可发生，春冬季气候剧变时多发。临床症状仔猪黄痢以腹泻、粪便呈水样或黄色糨糊状为特征。仔猪白痢以腹泻、粪便呈白色糨糊状为特征。猪水肿病以颜面部和颈部水肿、神经系统症状为特征。病理变化仔猪黄痢仔猪白痢病程短的几乎不见胃肠炎的病变，病程稍长的病例呈现轻度卡他性胃肠炎的变化，胃内有凝乳块。猪水肿病实验室诊断样品采集及运送采集肠内容物或粪便，置于无菌采样袋中。样品采集和运送符合NY/T541的规定。分离鉴定具体操作步骤见附录A。大肠埃希氏菌分型毒力基因鉴定分离菌株符合4.4.2中大肠杆菌特性的进行PCR鉴定。参照GB4789.6进行，操作步骤见附录B。大肠埃希氏菌黏附素基因鉴定参照NY/T2839进行，操作步骤见附录C。综合判定仔猪黄痢临床症状符合4.2.1，病原鉴定主要为产肠毒素大肠埃希氏菌，以F4/F5/F6/F41菌毛为主。仔猪白痢临床症状符合4.2.2，病原鉴定主要为产肠毒素大肠埃希氏菌，以F5/F41菌毛为主。猪水肿病临床症状符合4.2.3，病原鉴定为产志贺毒素大肠埃希氏菌，以F18菌毛为主。预防饲养管理饲养管理遵循以下要求。NY/T682GB13078GB5749NY/T388、NY/T1167免疫接种疫苗选择符合《兽药管理条例》和《中华人民共和国动物防疫法》的规定。疫苗接种对疫区和受威胁区的猪群定期接种疫苗，按照疫苗使用说明书进行免疫。注意事项免疫接种遵循以下注意事项。选择针对本地区流行菌株疫苗进行免疫接种。疫苗保存、接种剂量严格按照使用说明书进行。接种前核查藏猪健康状况，接种时避免交叉感染。进行免疫抗体效价监测，开展补免工作。根据本地区流行病学监测结果，优化免疫程序。消毒消毒制度日常消毒和紧急消毒相结合，制定并严格执行消毒制度。消毒管理消毒管理遵循以下要求。消毒剂选择符合《中华人民共和国药典》和《中华人民共和国兽药典》的规定，严格按照说明书使用。定期对场区道路、猪场内部环境及工具进行消毒，在疫病多发季节增加消毒频次。场区入口设置可覆盖全车的消毒设施，严格执行消毒程序。生产区设置消毒通道，人员消毒后方可进出。消毒记录包括消毒日期，消毒场所，消毒剂名称、生产厂家、生产批号，消毒浓度，消毒方法，消毒人员签字。NY/T3075治疗治疗原则按照早发现、早隔离、早治疗的原则，采用抗菌、补液等措施治疗。抗菌疗法（环丙沙星（头孢噻呋（磺胺甲噁唑对症疗法严重下痢的病猪，口服痢菌净（5mL/kg），每日1次～2次，混料喂服硫酸钠或硫酸镁20g、大黄640mg/g1510000IU/g）混合维生素B12（100μg/头～200μg/头），每日2次，连用2天。水肿症状的病猪静脉注射25mL、10250mL、维生素C1g，每日1次；肌肉注射100万单位硫酸卡那霉素加地塞米松5mg，每日2次。中药疗法选用白头翁散、四黄止痢颗粒等中药复方制剂灌服或拌料饲喂，使用方法参考药物使用说明进行。疫情监测与处理疫情监测与处理遵循以下要求。根据养殖场（户或村或牧场）及周边地区大肠杆菌病流行情况制定监测计划，按照计划开展病原学监测。周边地区大肠杆菌病流行时应进行紧急监测。受威胁藏猪群进行紧急免疫接种。GB/T36195的规定进行处理。该病暴发流行时，按照农业农村部动物疫情报告的规定及时上报并处置。附 录 A（资料性）大肠埃希氏菌的分离鉴定培养基分离鉴定大肠埃希氏菌的分离培养步骤如下。1g5mL3712h～18h。3718h～24h，观察菌落特征。在麦康凯琼脂培养基平板上，典型菌落为砖红色。在伊红美蓝琼脂培养基平板上，典型菌落为中心紫黑色带或不带金属光泽。形态学检查生化鉴定附 录 B（资料性）大肠埃希氏菌分型毒力基因鉴定模板提取取新鲜菌落，加灭菌水0.5mL，煮沸10min，冷却，12000r/min离心2min。取上清液即为DNA模板。也可选用商品化试剂盒参照说明书进行DNA提取。引物信息表A.1大肠埃希氏菌分型毒力基因鉴定引物信息表基因名称引物序列（5′-3′）片段大小（bp）退火温度（℃）escVF-ATTCTGGCTCTCTTCTTCTTTATGGCT54463R-CGTCCCCTTTTACAAACTTCATCGCeaeF-ATTACCATCCACACAGACGGT39763R-ACAGCGTGGTTGGATCAACCTbfpBF-GACACCTCATTGCTGAAGTCG91063R-CCAGAACACCTCCGTTATGCstx1F-CGATGTTACGGTTTGTTACTGTGACAGC24463R-AATGCCACGCTTCCCAGAATTGstx2F-GTTTTGACCATCTTCGTCTGATTATTGAG32463R-AGCGTAAGGCTTCTGCTGTGACltF-GAACAGGAGGTTTCTGCGTTAGGTG65563R-CTTTCAATGGCTTTTTTTTGGGAGTCstpF-CCTCTTTTAGYCAGACARCTGAATCASTTG15763R-CAGGCAGGATTACAACAAAGTTCACAGsthF-TGTCTTTTTCACCTTTCGCTC17163R-CGGTACAAGCAGGATTACAACACinvEF-CGATAGATGGCGAGAAATTATATCCCG76663R-CGATCAAGAATCCCTAACAGAAGAATCACipaHF-TTGACCGCCTTTCCGATACC64763R-ATCCGCATCACCGCTCAGACaggRF-ACGCAGAGTTGCCTGATAAAG40063R-AATACAGAATCGTCAGCATCAGCpicF-AGCCGTTTCCGCAGAAGCC111163R-AAATGTCAGTGAACCGACGATTGGastAF-TGCCATCAACACAGTATATCCG10263R-ACGGCTTTGTAGTCCTTCCATuidAF-ATGCCAGTCCAGCGTTTTTGC147863R-AAAGTGTGGGTCAATAATCAGGAAGTGPCR以B.1中的上清液为模板，具体反应体系及程序参照商品化DNA聚合酶说明书进行，并设立阴阳性对照。PCRPCR产物经1.2%琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像分析。结果判定表A.2大肠埃希氏菌分型毒力基因鉴定结果对照表致泻大肠埃希氏菌类别目标条带的种类组合肠道集聚性大肠埃希氏菌aggR，astA，pic中一条或一条以上阳性+/）肠道侵袭性大肠埃希氏菌（+-）（+）（）（-）产志贺毒素大肠埃希氏菌/肠道出血性大肠埃希氏菌产肠毒素大肠埃希氏菌lt，stp，sth中一条或一条以上阳性肠道侵袭性大肠埃希氏菌（+）在判定肠道侵袭性大肠埃希氏菌或产志贺毒素大肠埃希氏菌/与基因等效;基因等效；97阳性。附 录 C（资料性）大肠埃希氏菌黏附素基因鉴定引物信息表B.1大肠埃希氏菌黏附素基因鉴定引物信息表基因名称引物序列（5′-3′）片段大小（bp）退火温度（℃）F4F-GATGAAAAAGACTCTGATTGCA84162R-GATTGCTACGTTCAGCGGAGCGF5F-CTGAAAAAAACACTGCTAGCTATT54362R-CATATAAGTGACTAAGAAGGATGCF6F-GTTACTGCCAGTCTATGCCAAGTG46362R-TCGGTGTACCTGCTGAACGAATAGF18F-GTGAAAAGACTAGTGTTT