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2025年大学大四(生物制药技术)生物制药分离纯化综合测试题及答案
(考试时间:90分钟满分100分)班级______姓名______第I卷(选择题共40分)答题要求:每题只有一个正确答案,请将正确答案的序号填在括号内。(总共20题,每题2分)1.以下哪种分离技术利用了物质在两相之间的分配系数差异进行分离?()A.离子交换色谱B.凝胶过滤色谱C.液液萃取D.超滤2.在生物制药分离纯化中,常用于去除热源的方法是()A.活性炭吸附B.离子交换C.超滤D.亲和色谱3.蛋白质等生物大分子在离子交换色谱中的保留行为主要取决于()A.分子大小B.电荷性质C.疏水性D.亲和力4.凝胶过滤色谱中,最先被洗脱出来的物质是()A.分子量最大的B.分子量最小的C.带正电荷的D.带负电荷的5.亲和色谱的特异性配体与目标生物分子之间的相互作用是()A.共价键B.离子键C.氢键D.疏水作用6.超滤的分离原理主要基于()A.分子大小B.电荷差异C.溶解度D.亲和力7.离子交换树脂的活性基团可分为阳离子交换基团和阴离子交换基团,其中磺酸基属于()A.阳离子交换基团B.阴离子交换基团C.中性基团D.两性基团8.在反相色谱中,固定相的性质是()A.极性B.非极性C.中性D.两性9.以下哪种方法可用于蛋白质的等电聚焦电泳?()A.SDSB.NativeC.IEFD.双向电泳10.盐析法沉淀蛋白质时,常用的盐是()A.氯化钠B.硫酸钠C.硫酸铵D.碳酸钠11.在生物制药分离纯化中,可用于浓缩蛋白质溶液的方法是()A.透析B.超滤C.离子交换D.亲和色谱12.以下哪种色谱技术适用于分离小分子化合物?()A.凝胶过滤色谱B.离子交换色谱C.反相色谱D.亲和色谱13.蛋白质的疏水相互作用色谱中,固定相表面具有()A.疏水基团B.亲水基团C.离子基团D.中性基团14.用于分离核酸的常用方法是()A.离子交换色谱B.gelfiltrationchromatographyC.琼脂糖凝胶电泳D.亲和色谱15.在生物制药分离纯化中,可用于去除内毒素的方法是()A.高温灭菌B.酸碱处理C.活性炭吸附D.超滤16.以下哪种蛋白质沉淀方法属于可逆沉淀?()A.盐析B.有机溶剂沉淀C.重金属盐沉淀D.生物碱沉淀17.离子交换色谱中,缓冲液的pH值对蛋白质的保留有重要影响,这是因为()A.影响蛋白质的电荷性质B.影响固定相的活性C.影响流动相的离子强度D.影响蛋白质的溶解度18.亲和色谱中,洗脱目标生物分子的方法通常是()A.改变pH值B.增加离子强度C.加入特异性竞争剂D.升高温度19.以下哪种技术可用于分析蛋白质的分子量和纯度?()A.SDSB.NativeC.IEFD.HPLC20.在生物制药分离纯化中,可用于去除色素等小分子杂质的方法是()A.超滤B.离子交换C.活性炭吸附D.亲和色谱第II卷(非选择题共60分)答题要求:请根据题目要求,在相应位置作答。(总共5题)21.简述离子交换色谱的基本原理及操作步骤。(10分)22.比较凝胶过滤色谱和离子交换色谱在分离生物大分子方面的异同点。(12分)23.某蛋白质样品含有杂质,欲通过亲和色谱进行纯化,请设计简要的实验方案。(14分)24.材料:在生物制药分离纯化过程中,发现一种蛋白质在低离子强度的缓冲液中容易沉淀。请分析可能的原因,并提出解决措施。(12分)25.材料:有一种新的生物活性分子,需要从复杂的生物样品中分离出来。请讨论可以采用哪些分离纯化技术,并说明理由。(12分)答案:1.C2.C3.B4.A5.A6.A7.A缉8.B9.C10.C11.B12.C13.A14.C15.D16.A17.A18.C19.A20.C21.离子交换色谱基本原理:利用离子交换树脂上的活性基团与生物大分子的离子基团之间的静电作用进行分离。操作步骤:选择合适离子交换树脂,处理树脂;装柱;平衡柱子;上样;洗脱;收集洗脱液。22.相同点:都用于分离生物大分子。不同点:凝胶过滤色谱基于分子大小分离,小分子保留时间长;离子交换色谱基于电荷性质分离,与分子大小无关。23.选择合适亲和配体与载体偶联制成亲和柱;将蛋白质样品上样到亲和柱;用适当缓冲液洗涤去除杂质;加入特异性竞争剂洗脱目标蛋白质;收集洗脱液并进一步处理。2(4.可能原因:蛋白质在低离子强度下溶解度降低。解决措施:适当增加离子强
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