基因工程公开课

12月13日基因工程（二）

高考频度：★★★☆☆难易程度：★★★☆☆

典例在线

科研人员通过PCR获得肝细胞特异性启动子一白蛋白启动子，将该电动子与Cre重组酶基因结合构建表

达载体，培育出在肝细胞特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠。下列叙述正确的是

A.将该表达载体导入肝细胞以获得转基因小鼠

B.PCR获得白蛋白启动子需设计特异性的引物

C.构建该表达载体需要限制酶和DNA聚合酶

D.通过核酸分子杂交技术检测目的基因是否完成表达

【参考答案】B

【试题学析】将该表达羲体导入受精加以获得转基因小鼠，A错浜：PCR技术需谈计师异性的交物，B正

成：构建该表达薮京香要限制解和DYA连接第.C绻误：,唆贪目的玉园是否完成表达常用坑原一发体打文

技术，D错误。z学科xx网k

飞解题必备

1.基因表达载体中启动子、终止子的来源

（1）如果目的基因是从自然界中己有的物种中分离出来的，在构建基因表达载体时，不需要在质粒上

目的基因的前后端接上特定的启动子、终止子，因为目的基因中已含有启动子、终止子。

<2）如果目的基因是通过人工方法合成的，或通过cDNA文库获得的，则目的基因是不含启动了•和终

止子的。若只将基因的编码序列导入受体生物中，目的基因没有启动子、终止子，是无法转录

的，因此，在构建基因表达载体时，需要在与质粒结合之前，在目的基因的前后端接上特定的启

动子、终止子。

2.基因工程中的几种检测方法

学曲推荐

1.下图是利用基因工程技术生产可食用疫苗的部分过程，其中PstI、SmaI、EcoRI、ApaI为四种限

制性核酸内切的。下列有关说法中正确的是

PxtISmaI氏〃RI

含抗原基.

因的DNA

抗原基因

SmaI

EcoR\

抗卡那徭

素基因

A.图示过程是基因工程的核心步骤，所需的限制性核酸内切萌均来自原核生物

B.图示中构建基因表达载体时，需用到一种限制性核酸内切酶

C.一种限制性核酸内切酣只能识别一种特定的核糖核甘酸序列

D.抗K那霉素基因的存在有利于格含有抗原基因的细胞筛选出来

2.科学家通过基因工程方法，将苏云金芽胞杆菌的Bl毒蛋白基因转入普通棉株细胞内，并成功实现了表

达，从而培育出了能抗棉铃虫的梅花植株一抗虫棉。其过程大致如下图所示：

，。人

TiMi粒

怖怫圳做

抗火的

根据题意，回答下列问题：

（1）基因工程的操作程序主要包括的四个步骤是：目的基因的获取、、

和0

（2）Ti质粒是农杆菌中的•种质粒,其上有T-DNA,把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用T-DNA

的特点.

（3）Bt毒蛋白基因转入普通棉株刑胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为。

<4）将口的基因导入受体细胞的方法有很多种，该题中涉及的是.

（5）目的基因能否在棉株内稳定维持和表达其遗传性质的关键是,这需要通过

检测才能知道，检测采用的方法是。

2

1.【答案】D

【解析】图示表示基因表达载体的构建过程，这是基因工程的核心步骤，所需的限制性核酸内切酹一般

来自原核生物，A错误：此表达载体构建时需要用到氏.RI、Pwl限制性核酸内切酶，B错误：限制

爵具有特异性，即一种限制性核酸内切酪只能识别一种特定的脱氧核甘酸序列并在特定的位点切割，C

错误；抗卡那霉素基因作为标记基因，主要作用是筛选含有目的基因的受体细胞，D正确。z学科xx网

k

2.【答案】（1）基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定

<2）可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体DNA上

（3）转化

（4）农杆菌转化法

（5）目的基因是否插入了受体生物细胞的染色体DNA上DNA分子杂交技术

【学析】（1）基因工程的操作程序主要包急D个步或：目的基因为获取、基因表达戴体的均建、将目

的玉四导入殳体姻史充目的玉国的检更与娶友.（2）11.笠立走农开意中的一种质粒，其上有I-DNA,

把目的基因播入Ti质粒的T-DNA中是利用了T-DNA的可转•移至受体箔电并登合到受体毡胞类之体

DNA分子上的特点，（3）Bt毒•蛋白基因性人普通格徐鲍胞内并成功安猊表达的过程，在基因工程中称

为转化。（4）将目的基因导入受体细胞的方法很多，国中利用了农杆菌转化法将目的基因导入桃花细

胞中。（5）目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是目的基因是否插入了受体细

胞的染色体D