2026届新高考生物三轮热点复习：微生物的基本培养技术

2026届新高考生物三轮热点复习

微生物的基本培养技术实验室培养微生物的条件:防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提，也是发酵工程的重要基础。——培养基——无菌技术一、要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件；二、要确保其他微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来。考点一

微生物的培养技术及应用一、培养基的配制1、培养基的概念、用途和类型①概念：人们按照微生物对

的不同需求，配制出的供其

的营养基质。②用途：用以

微生物或积累其

。营养物质生长繁殖培养、分离、鉴定、保存代谢物培养基的类型及用途标准培养基种类培养基特点作用物理性质固体培养基加凝固剂，如琼脂

微生物的分离与鉴定，活菌计数，保藏菌种半固体培养基加凝固剂，如琼脂。容器放倒不致流出，剧烈震动则破散观察微生物的运动、分类鉴定液体培养基不加凝固剂常用于扩大培养，工业生产功能选择培养基允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长培养、分离出特定微生物鉴别培养基在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物鉴别不同种类微生物成分来源天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确分类鉴定考点一

微生物的培养技术及应用一、培养基的配制2、培养基的配方①主要营养物质：水、

、氮源、

。②其他条件：pH、

和氧气。如下表：微生物乳酸杆菌霉菌细菌厌氧微生物特殊需求添加_______pH调至______pH调至_____________________维生素酸性中性或弱碱性无氧碳源无机盐特殊营养物质获得

的微生物培养物。考点一

微生物的培养技术及应用二、无菌技术1、目的：2、关键：防止

污染。纯净杂菌项目消毒灭菌作用强度较为

的理化因素

的理化因素作用程度杀死物体表面或内部________

微生物杀死物体内外的

微生物芽孢和孢子一般不能杀灭能杀灭温和强烈一部分所有3、方法：消毒与灭菌考点一

微生物的培养技术及应用二、无菌技术3、方法：消毒与灭菌②巴氏消毒：62-65℃下煮30min或80-90℃处理30s-1min，适合不耐高温的液体，如牛奶。可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且不破坏牛奶的营养成分。常用的消毒方法①煮沸消毒：100℃煮沸5-6min，可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢。③化学药剂消毒：用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源等。④紫外线消毒：接种室、接种箱或超净工作台可用紫外线照射30min。在照射前，适量喷洒石碳酸或煤酚皂溶液等消毒液，加强消毒效果。破坏DNA分子考点一

微生物的培养技术及应用二、无菌技术3、方法：消毒与灭菌①湿热灭菌：利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌。高压蒸汽灭菌效果最好，100kPa、121℃下维持15-30min，常用于培养基、无菌水等的灭菌。常用的灭菌方法②干热灭菌：160-170℃下加热2-3h。常用于玻璃器皿和金属器具（耐高温的和需要保持干燥的物品）。③灼烧灭菌：常用于涂布器、接种环、接种针、试管口或其它金属用具等的灭菌。直接在酒精灯火焰的充分燃烧层（外焰）灼烧。类型适用范围操作方法消毒灭菌较为温和理化方法，杀死部分微生物（不包括芽孢、孢子）强烈的理化方法，杀死所有微生物（包括芽孢、孢子）煮沸消毒法日常生活100℃煮沸5～6min巴氏消毒法不耐高温的液体63～65℃煮30min化学药剂生物活体、水源等擦拭等,如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源紫外线紫外线照射30min灼烧灭菌接种的金属工具、接种时用的试管口或瓶口等直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧干热灭菌耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等物品放入干热灭菌箱,160～170℃加热2～3h湿热灭菌培养基等,生产和实验室常用高压蒸汽灭菌锅内,100kPa,温度121℃,15～30min接种室、接种箱，超净工作台二、无菌技术考点一

微生物的培养技术及应用(4)注意事项①实验操作时，应避免已经灭菌处理的材料用具与

接触。②为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台上并在

附近进行。周围的物品酒精灯火焰二、无菌技术消毒和灭菌的比较及无菌技术的其他作用1.牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是什么？在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少。2.为什么体积分数为70%～75%的酒精杀菌效果最好？若酒精浓度过高，菌体表面蛋白质变性过快而凝固成一层保护膜，酒精不能渗入其中；若酒精浓度过低，杀菌能力减弱。3.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么作用？无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。目的：①防止培养物被污染；②防止感染实验操作者。考点一

微生物的培养技术及应用三、微生物的纯培养1、概念辨析一定形态结构固体培养基考点一

微生物的培养技术及应用毛霉沙门氏菌三、微生物的纯培养菌落的大小、形状、隆起程度、颜色等特征是鉴定菌种的重要依据获得单菌落的方法：平板划线法、稀释涂布平板法考点一

微生物的培养技术及应用三、微生物的纯培养2、酵母菌纯培养的操作步骤15～20g琼脂湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)法干热灭菌灭菌前调pH考点一

微生物的培养技术及应用三、微生物的纯培养2、酵母菌纯培养的操作步骤酒精灯火焰灼烧灭菌考点一

微生物的培养技术及应用三、微生物的纯培养△倒平板操作：防止水分蒸发过快，防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染考点一

微生物的培养技术及应用三、微生物的纯培养2、酵母菌纯培养的操作步骤平板划线法恒温培养箱28或稀释涂布平板法做对照，检测培养基灭菌是否合格考点一

微生物的培养技术及应用三、微生物的纯培养第1区划线接种环灼烧灭菌第2区划线接种环灼烧灭菌第3区划线接种环灼烧灭菌接种环灼烧灭菌12345操作的第一步、每次划线前及划线结束后都要灼烧接种环，灼烧后要冷却蘸取菌液3、平板划线法操作步骤平板划线法操作步骤使微生物的数目随着划线次数的增加而减少以便获得单菌落

1.为什么在操作第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗？为什么？灼烧时期目的取菌种前每次划线前接种结束后杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端，从而使每次划线时菌种数目逐渐减少，直至得到单个细胞。杀死接种环上原有微生物6.实验注意事项、分析、思考2.在灼烧接种环之后，要等其冷却再进行划线，目的是什么？避免温度过高杀死菌种使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落①一旦