临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立

临床基因扩增检验试验室设置及质量管理体系建立第1页临床基因扩增检验试验室设置依据：卫生部颁发《临床基因扩增检验试验室管理暂行方法》（卫医发[]10号）第2页临床标本接收

通常工作流程：标本采集血清分离编号保留或检测应在四个测定区域之外地方或区域内接收接收标本应搜集在原始容器中在核酸提取时带入至标本制备区第3页理想PCR试验室设置A产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊工作流向扩增区标本制备区试剂准备区第4页产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊工作流向扩增区标本制备区试剂准备区理想PCR试验室设置B第5页门试剂准备区标本制备区扩增区产物分析区外走廊门门门门试剂准备区标本制备区扩增及产物分析区外走廊门门门门AB第6页试剂准备区标本制备区扩增及产物分析区门门门门空气流向空气流向空气流向第7页走廊走廊试剂准备区标本制备区扩增和产物分析区空气流向空气流向空气流向其它试验室其它试验室其它试验室其它试验室其它试验室其它试验室其它试验室第8页门试剂准备区标本制备区扩增及产物分析区门门门空气流向空气流向+空气流向++走廊走廊试剂准备区标本制备区扩增和产物分析区空气流向空气流向+空气流向++其它试验室其它试验室其它试验室其它试验室其它试验室其它试验室其它试验室空气流向第9页临床基因扩增试验室设置普通标准各区独立注意风向因地制宜方便工作“十六字口诀”第10页产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊工作流向扩增区标本制备区试剂准备区传递窗传递窗传递窗第11页试验室质量管理体系建立质量手册质量体系程序文件标准操作程序(相关统计表格)第12页质量管理内涵写你所做做你所写统计你已做分析你已做第13页怎样编写SOP？第14页试验室清洁SOP关键点

目标:为了使试验室台面、地面和仪器设备在实用后，处于洁净和无感染性状态，以预防出现因仪器设备不洁影响检测或仪器使用寿命；预防因试验室台面、地面和仪器设备生物传染危险性造成试验室人员感染，以及预防试验室交叉污染而出现假阳性结果等。适用范围应包含试验室地面、台面和仪器设备等清洁。按试验室台面、地面和仪器设备分开来写各自详细清洁方法，要详细而又有可操作性应要求工作人员在清洁时，必须按试剂准备区

标本制备区

扩增(及产物分析)区方向进行，不得逆行要求每一工作区域清洁必须使用专用清洁用具，不得混用要求有潜在生物传染危险性材料溅出时消毒清洁方法第15页生物安全防护SOP关键点明确要求试验室工作人员在进行哪一类接触到有潜在生物传染危险性物品和材料时，应使用哪类个体生物安全防护设备和用具制订试验室内锐器物品使用规则制订发生意外如手指划破、血清溅入眼内等情况下处理程序明确有潜在生物传染危险性废弃物（包含废弃临床标本）拿出试验室前消毒方法如高压或化学消毒第16页仪器设备维护和校准SOP

责任人维护和校准基本方面：光路、滤光片、波长、加热模块清洁、详细校准点选择（如加样器校准体积点选择、温度计校准温度点选择等）、维护和校准详细方法包含用具校准合格判断标准维护和校准间隔时间

第17页仪器设备操作SOP按照每台仪器设备使用说明书，将其详细操作步骤包含开机关机次序、编程、调试、运行、计算等按实际使用中先后次序逐项列出，最终还应有使用注意事项。第18页临床标本采集、运输、接收和保留SOP特定标本采集详细方法步骤明确要求标本采集容器要求明确标本采集量明确标本采集后送到试验室检测所能允许最大时间间隔，亦即标本采集后，应在多长时间内送至试验室明确标本采集后，在送至试验室检测前保留方式和条件明确标本从采集处运输至试验室过程中所要求运输条件明确标本接收时，签收程序、拒收标准和标本唯一编号规则要求标本在试验室内短期（应有详细时间）和长久（应有详细时间）保留条件和要求制订确保标本安全，即怎样预防标本丢失、掉换、变质办法第19页试剂和消耗品质检SOP试剂质检基本方面，如试剂抗干扰能力（主要是针对提取试剂），即对溶血、脂血标本扩增抑制作用了解。可经过自行制备含已知量病毒核酸不一样程度溶血或脂血标本进行质检。如为定量检测试剂，还应包含检测重复性、线性范围等质检，通常使用2-3份样本进行检测即可。如为定性检测试剂，则应重点考查测定下限，可用系列稀释含已知量靶核酸血清标本进行核酸提取用离心管质检基本方面带滤心吸头质检主要是滤心密封性

第20页项目检测、结果判断、解释和汇报SOP标本进入试验程序后操作编号方式依据所用试剂盒确定详细操作流程仪器编程及文件名编写规则结果判读流程和规则结果分析解释流程结果汇报流程第21页试验统计及其管理SOP日常检验过程中应统计基本内容要求，如仪器设备操作、维护和校准过程及相关数据；检验试剂起源和批号；检验标本起源和唯一编号；试剂配制；试验环境条件控制统计；试验室清洁统计；质控统计；原始检测数据及其推导统计等对试验统计者署名方式要求和要求试验统计管理基本方面：指定专门管理人；有专门保留处如柜子等；统计登记归档方法；统计借阅及销毁统计；统计保留时间；电子统计备份保留详细方法及保留时间等第22页室内质量控制SOP明确室内质控物起源及浓度明确所选取质控方法明确失控判断标准或所采取失控规则明确失控后分析及处理办法第23页参加室间质量评价SOP明确要求室间质评样本接收统计方式、保留条件及试验编号规则明确室间质评样本检测流程，要强调是，室间质评样本应以与临床标本相同方式处理和检测明确室间质评样本汇报流程，即填写、复核和签发怎样进行，由谁负责明确对返回结果分析流程和责任人明确室间质评检测失败原因分析流程明确假如测定准确性出现问题后，怎样针对性采取办法流程第24页投诉处理SOP明确投拆第一接触人对投拆处理流程，即怎样统计、怎样针对相关投诉深入处理程序、是否需要汇报和怎样汇报、以及怎样向投拆人返回处理意见等。可将投拆分为不一样类如对检验结果正确性、服务态度、汇报单填写错误等分别编写处理流程投拆有效时怎样改进和采取何种办法详细流程。应非常详细并含有可操作性第25页临床PCR检验流程统计表

检验日期

检验项目：

扩增仪中保留文件名：

使用说明：1．本统计表须严格遵照试剂准备区

标本制备区

扩增区（产物分析区）单一流向移动，禁止逆向移动。2．各项工作执行后，在对应叙述前“

”内打“

”。3．本统计表最终与对应标本接收统计等归档保留于扩增区专用文件柜内，以备查找。试验前准备

试剂在使用期内

扩增仪、加样器和温度计在校准使用期内

生物安全柜滤膜在使用使用期内

消毒溶液在使用期内

冲眼器内无菌生理盐水在使用期内

离心管、带滤心吸头已经过质检合

操作者：

第26页试剂准备区（1区）试验前：

打开通风设备

试验台面清洁（水或70%酒精擦拭）

冰箱温度：冷藏室（2~8℃）

℃；冷冻室（

18℃

2℃）

℃

试验室温度：

℃（允许范围：10~30℃）；相对湿度：

（允许范围：30%~70%）PCR试剂起源：（可直接列出相关厂家名称）批号：

检验项目：

此次试验用量：

人份，剩下量：

人份。其它相关试剂配制：

按XXX（将相关SOP编号列出）SOP配制1%含氯消毒液

毫升；

按XXX（将相关SOP编号列出）SOP配制4％NaOH溶液

毫升；

按XXX（将相关SOP编号列出）SOP配制0.1%焦磷酸二乙酯

毫升；

按XXX（将相关SOP编号列出）SOP配制

毫升；

其它：仪器设备使用：离心机：

正常

不正常振荡器：

正常

不正常试验后：

按XXX（将相关SOP编号列出）SOP清洁试验室台面、地面、加样器和离心机，并进行紫外照射30分钟以上。

按XXX（将相关SOP编号列出）SOP处理试验废弃物。

操作者：

第27页标本制备区（2区）试验前：

打开通风设备

试验台面清洁（水或70%酒精擦拭）

冰箱（柜）温度：冷藏室（2~8℃）

℃；冷冻室（

18℃

2℃）

℃

试验室温度：

℃（允许范围：10~30℃）；相对湿度：

（允许范围：30%~70%）阳性室内质控物起源：

浓度及批号：

扩增位置：

阴性室内质控物起源：

批号：

扩增位置：

所取理标本（对应标本接收唯一编号）及拟扩增位置：1

9

17

25

2

10

18

26

3

11

19

27

4

12

20

28

5

13

21

29

6

14

22

30

7

15

23

31

8

16

24

32

核酸提取及加样过程：按XXX（列出编号）SOP进行。仪器设备使用：生物安全柜：

正常

不正常恒温仪温度校准：

℃离心机：

正常

不正常振荡器：

正常

不正常试验后：

按XXX（将相关SOP编号列出）SOP清洁试验室台面、地面及仪器设备。

按XXX（将相关SOP编号列出）SOP处理试验废弃物。

操作者：

第28页

扩增及产物分析区（3区）试验前

打开通风设备

试验台面清洁（水或70%酒精擦拭）

试验室温度：

℃（允许范围：10~30℃）；相对湿度：

（允许范围：30%~70%）扩增仪操作：

开机自检及运行正常

按XXX（列出编号）SOP进行编程、参数设定标准曲线计算值：Slope值：（）Intercept值：（）r值：（）室内质控结果：结果：

□填写室内质控统计、描质控图是否失控：□否□是试验结果：见所附扩增仪打印结果试验后：

按XXX（将相关SOP编号列出）SOP清洁试验室台面、地面及仪器设备。

按XXX（将相关SOP编号列出）SOP处理试验废弃物。

操作者：

失控原因及分析：（失控判断标准及原因分析按XXXSOP进行）第29页

临床PCR试验室标本接收统计唯一编号姓名性别病历号采集时间接收时间标本特征标本状态

以上标本编号从

至

，送检人（签字）：

接收人（签字）

以上标本编号从

至

，送检人（签字）：

接收人（签字）

以上标本编号从

至

，送检人（签字）：

接收人（签字）

男

女月日时月日时

全血

正常

男

女月日时月日时

全血

正常

男

女月日时月日时

全血

正常

男

女月日时月日时

全血

正常

男

女月日时月日时

全血

正常

男

女月日时月日时

全血

正常

男

女月日时月日时

全血

正常

第30页姓名性别病历号采集时间接收时间标本特征拒收原因

男

女月日时月日时

全血

（列出原因号）

男

女月日时月日时

全血

（列出原因号）

男

女月日时月日时

全血

（列出原因号）

标本拒收原因：1．患者姓名不符。2．标本容器为非不含任何添加剂真空采血管。3．采血量低于2ml。4．标本采取肝素抗凝。5.容器破损。6．标本采集后送检时间超出6小时。7．标本重度溶血。8．标本脂血。9．标本不正确。10．其它：

临床PCR试验室标本拒收统计第31页试验室日常工作管理工作项目核查点水浴箱、微量恒温器（加热模块）□校准及统计温度

次氯酸钠溶液□新鲜配制生物安全柜□先起动运行30分钟后再开始工作室内质控弱阳性质控（定性）