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文档简介

2026年发酵工程分析题库及答案一、单项选择题(本大题共20小题,每小题1分,共20分。在每小题给出的四个备选项中,只有一个是符合题目要求的)1.在发酵工程中,用于衡量微生物生长过程中底物转化为细胞生物量的效率的参数是()。A.比生长速率μB.得率系数C.维持系数D.饱和常数2.工业发酵生产中,最常用的灭菌方法是()。A.过滤除菌B.化学药剂灭菌C.紫外线灭菌D.高压蒸汽灭菌3.在Monod方程中,当底物浓度S远大于饱和常数时,微生物的生长处于()。A.延滞期B.对数生长期C.减速期D.稳定期4.氧气在发酵液中的传递过程,其控制步骤通常是()。A.气相主体中的扩散B.气液界面的气膜扩散C.气液界面的液膜扩散D.液相主体中的扩散5.补料分批培养与分批培养相比,其主要优势在于()。A.设备投资成本低B.染菌风险极低C.可解除底物抑制并延长发酵周期D.操作控制极其简单6.在发酵罐搅拌功率的计算中,搅拌雷诺准数R的定义式为()。A.B.C.D.7.某发酵过程中,若测得呼吸商(RQ)大于1,通常意味着()。A.碳源氧化不完全,产生乙醇或有机酸B.碳源完全氧化生成CO2和H2OC.微生物处于内源呼吸阶段D.发酵过程缺氧8.在基因工程菌发酵中,为了防止质粒丢失,通常在培养基中加入()。A.抗生素B.维生素C.诱导剂D.缓冲剂9.下列关于发酵热计算的描述中,错误的是()。A.发酵热包括生物合成热、搅拌热、蒸发热等B.生物合成热主要由微生物代谢产生C.搅拌热是机械搅拌输入的机械能转化为热能D.发酵过程中发酵热是恒定不变的10.气升式发酵罐与机械搅拌发酵罐相比,其最显著的特点是()。A.剪切力大,适合丝状菌B.溶氧系数高,能耗低C.结构复杂,清洗困难D.混合效果极差11.在分批培养中,微生物的比生长速率μ在哪一期达到最大值?()A.延滞期B.对数生长期C.稳定期D.衰亡期12.下列哪种传感器通常用于在线检测发酵过程中的溶解氧浓度?()A.热电偶B.pH电极C.复膜氧电极D.电导率电极13.对于牛顿型流体,其黏度主要取决于()。A.温度B.压力C.剪切速率D.流速14.在发酵罐放大设计中,若以a相等为准则,通常适用于()。A.高黏度非牛顿流体发酵B.溶氧控制为关键因素的发酵C.剪切力敏感的细胞发酵D.主要产物为次级代谢物的发酵15.丝状菌发酵过程中,发酵液流变学特性通常表现为()。A.牛顿流体B.塑性流体C.假塑性流体D.胀塑性流体16.连续培养达到稳态时,下列哪项描述是正确的?()A.底物浓度随时间变化B.细胞浓度随时间变化C.稀释率D等于比生长速率μD.产物生成速率随时间变化17.在发酵液预处理中,加入絮凝剂的主要目的是()。A.杀灭细菌B.调节pH值C.增加过滤速度,改变固体颗粒大小D.提取产物18.下列哪种物质常作为微生物发酵的碳源?()A.硫酸铵B.磷酸二氢钾C.葡萄糖D.玉米浆19.在测定发酵液中菌体浓度时,对于体积较大的丝状菌,最适合的方法是()。A.光密度法(OD值)B.干重法C.血球计数板法D.荧光法20.为了提高发酵罐的氧传递速率,下列措施中最有效的是()。A.降低搅拌转速B.降低通气量C.增加搅拌转速并增加通气压力D.升高发酵温度二、多项选择题(本大题共10小题,每小题2分,共20分。在每小题给出的四个备选项中,有两个或两个以上是符合题目要求的)1.影响微生物生长的主要环境因素包括()。A.温度B.pH值C.溶解氧D.营养物质浓度2.发酵工业中常用的种子扩大培养的目的是()。A.增加菌体数量B.诱导产酶C.缩短发酵罐的延滞期D.节约生产成本3.下列关于分批培养中各生长阶段的特征,正确的有()。A.延滞期:菌体不生长,细胞内物质合成活跃B.对数期:菌体以最大比生长速率生长C.稳定期:菌体生长速率等于死亡速率,次级代谢产物大量合成D.衰亡期:细胞自溶,释放胞内产物4.提高发酵罐氧传递系数a的措施包括()。A.增加搅拌转速B.增加通气量C.降低发酵液黏度D.增加发酵罐装液量5.发酵过程中染菌的常见原因有()。A.空气过滤系统失效B.设备泄漏C.种子带菌D.培养基灭菌不彻底6.常用的发酵产物分离纯化方法包括()。A.沉淀B.萃取C.离子交换D.色谱分离7.在发酵工艺控制中,补料策略的控制参数通常有()。A.pH值B.溶解氧(DO)浓度C.尾气CO2浓度D.菌体浓度8.与机械搅拌发酵罐相比,气升式发酵罐的优点包括()。A.结构简单B.无机械密封,泄漏风险低C.剪切力小,适合动植物细胞D.氧传递效率高9.发酵液的流变特性对发酵过程的影响主要体现在()。A.影响氧传递效率B.影响混合效果C.影响热量传递D.影响菌体形态10.下列关于代谢调控的描述,正确的有()。A.初级代谢产物是微生物生长繁殖所必需的B.次级代谢产物通常在菌体生长稳定期大量合成C.碳代谢调节(碳源分解代谢物阻遏)影响酶的合成D.氮代谢调节影响次级代谢产物的合成三、填空题(本大题共20小题,每小题1分,共20分)1.发酵工程是指利用微生物的__________获得产品或服务的工程技术体系。2.微生物生长曲线主要包括延滞期、__________、稳定期和衰亡期四个阶段。3.在发酵工程中,表示__________得率系数。4.氧体积传递系数a的单位通常是__________。5.丝状真菌在发酵过程中容易形成__________,导致发酵液黏度显著增加。6.工业微生物菌种主要来源于自然界筛选和__________。7.发酵罐的几何尺寸中,高径比(H/8.为了保证发酵过程的无菌状态,空气过滤系统通常采用__________介质进行过滤。9.在分批培养中,当稀释率D大于最大比生长速率时,会发生__________现象。10.微生物发酵的碳源主要包括糖类、脂类和__________。11.测定发酵液pH时,最常用的方法是使用__________电极。12.发酵过程中的热平衡方程为:发酵热=生物热+搅拌热蒸发热_________。13.发酵罐放大时,常采用的准则有等a放大、等__________放大等。14.莫诺方程的表达式为μ=S/15.在发酵液中,气泡的平均直径越小,气液比表面积__________,有利于氧传递。16.柠檬酸发酵生产中,常用的菌种是__________。17.发酵罐搅拌器的类型主要有平桨式、涡轮式和__________式。18.在连续培养中,比生长速率μ主要由__________控制。19.基因工程菌发酵中,IPTG常作为__________剂使用。20.发酵下游处理过程的一般流程是:预处理、固液分离、__________和精制。四、简答题(本大题共8小题,每小题5分,共40分)1.简述分批培养、补料分批培养和连续培养的区别及优缺点。2.什么是氧传递系数(a)?影响a的主要因素有哪些?3.简述发酵过程中引起pH变化的原因及工业上控制pH的方法。4.什么是代谢调控?在工业发酵中如何利用营养缺陷型菌株进行代谢调控?5.简述发酵罐放大设计的常用准则及其适用范围。6.什么是流变学?发酵液的流变特性主要有哪几种类型?对发酵过程有何影响?7.简述微生物发酵热的主要来源及其对发酵过程的影响。8.在发酵过程中,为什么要进行中间补料?补料的方式有哪些?五、计算与分析题(本大题共5小题,共50分)1.(10分)在分批培养中,以葡萄糖为底物培养某种细菌。已知初始菌体浓度=0.5

g/L,初始底物浓度=10

g/L。经过4

h(1)求该段时间内的平均比生长速率。(2)求菌体对底物的得率系数。2.(10分)某发酵罐在标准状态下进行通气搅拌实验,已知搅拌功率P=5

kW,通气量=1/min,发酵液体积=10(1)若发酵液中的临界溶解氧浓度=0.5

mg/L,饱和溶解氧浓度(2)若微生物的摄氧率(OUR)为0.15·3.(10分)在一个10L的机械搅拌发酵罐中进行酵母培养,已知搅拌桨直径=0.2

m,转速N=600r/min(1)计算搅拌雷诺准数R并判断流型。(2)若该搅拌器在全挡板条件下操作,功率准数=5,计算搅拌功率P4.(10分)采用连续发酵法生产乙醇,已知稀释率D=0.5,进入发酵罐的底物浓度=50

g/L。Monod方程参数为:=0.8,=(1)计算发酵罐出口处的稳态底物浓度S。(2)计算发酵罐出口处的菌体浓度X和产物浓度P。5.(10分)某抗生素发酵过程,已知菌体生长符合产物非偶联模型。即产物生成速率方程为:=βX,其中β为非生长相关系数,X为菌体浓度。在发酵稳定期,测得β=0.05

g/(g(1)计算该阶段产物生成的平均速率。(2)若发酵结束时产物总浓度为50

g/L参考答案与解析一、单项选择题1.B解析:得率系数定义为消耗单位底物所生成的细胞量,是衡量底物转化为细胞效率的参数。μ是比生长速率,是维持系数,是半饱和常数。2.D解析:工业生产中,培养基和设备的灭菌最常用且最有效的方法是高压蒸汽灭菌(实罐灭菌或连消)。过滤除菌主要用于空气除菌。3.B解析:当S≫时,Monod方程简化为μ4.C解析:氧传递阻力主要分布在气膜和液膜,但氧气是难溶气体,液膜阻力远大于气膜阻力,因此液膜扩散通常是控制步骤。5.C解析:补料分批培养可以控制底物浓度在较低水平,解除底物抑制或葡萄糖效应,同时延长发酵周期,提高产物产量。6.A解析:搅拌雷诺准数R=7.A解析:RQ=释放CO2摩尔数/消耗O2摩尔数。RQ>1通常表明碳源氧化不完全,产生了比CO2氧化度更高的还原性物质(如乙醇、有机酸),属于有氧发酵但处于不完全氧化状态(如Crabtree效应)。8.A解析:为了保持基因工程菌的选择压力,防止质粒丢失,通常在培养基中加入相应的抗生素。9.D解析:发酵热在发酵过程中不是恒定的,随着不同生长阶段代谢强度的变化而变化。10.B解析:气升式发酵罐利用气流带动循环,剪切力较小,溶氧效率相对较高,且无机械搅拌密封,能耗相对较低。11.B解析:在对数生长期,微生物代谢旺盛,比生长速率达到最大值并保持相对稳定。12.C解析:复膜氧电极(原电池型或极谱型)是测定溶解氧浓度的专用电极。13.A解析:牛顿型流体的黏度是物理属性,仅取决于温度和压力,与剪切速率无关。14.B解析:以a相等为准则进行放大,主要保证发酵过程中的氧传递效果不变,适用于耗氧量大的发酵过程。15.C解析:丝状菌发酵液通常呈现假塑性流体特征,即随着剪切速率增加,表观黏度下降。16.C解析:连续培养稳态时,dX/dt=17.C解析:絮凝剂通过电中和或架桥作用使细小颗粒聚集成较大的絮团,从而加快固液分离(过滤或沉降)速度。18.C解析:葡萄糖是常用的碳源。硫酸铵和磷酸二氢钾是氮源和无机盐,玉米浆是氮源/生长因子。19.B解析:丝状菌易缠绕,OD值测定不准确,血球计数板计数困难,干重法是测定菌体浓度的直接且准确的方法。20.C解析:增加搅拌转速和通气压力可以增加气液湍动,打碎气泡,增加气液接触面积,从而显著提高氧传递速率。二、多项选择题1.ABCD解析:温度、pH、溶解氧和营养物质浓度均是影响微生物生长的关键环境因子。2.AC解析:种子扩大培养的主要目的是增加接种量所需的菌体数量,并使菌体处于旺盛生长状态,从而缩短发酵罐内的延滞期。3.BCD解析:延滞期菌体生长速率接近0,但并非“不生长”(极慢),且细胞内物质合成活跃(适应环境)。B、C、D描述均正确。4.ABC解析:增加搅拌、通气量和降低黏度均能提高a。增加装液量会降低气液传质面积,降低a。5.ABCD解析:空气系统、设备、种子、培养基灭菌不彻底以及操作不当均是染菌的常见原因。6.ABCD解析:沉淀、萃取、离子交换、色谱分离均为发酵下游常用的分离纯化技术。7.ABCD解析:pH、DO、尾气CO2(反映代谢活性)和菌体浓度均可作为反馈控制补料策略的参数。8.ABC解析:气升式结构简单,无机械密封(泄漏低),剪切力小。其氧传递效率通常低于高性能的机械搅拌罐,但在某些特定条件下能耗利用率高。9.ABCD解析:流变特性直接影响混合、传质(氧和热量)、流动状态及菌体形态。10.ABCD解析:初级代谢产物是生长必需;次级代谢多在稳定期合成;碳氮代谢调节(如碳阻遏、氮阻遏)是重要的代谢调控机制。三、填空题1.代谢活动(或特定功能)2.对数生长期3.产物对底物4.(或)5.菌丝球6.人工育种(或基因工程改造)7.2:1~3:1(或2~4)8.纤维(或玻璃纤维、聚四氟乙烯等)9.洗出10.醇类(或有机酸、烃类)11.pH(或玻璃)12.辐射热(或显热)13.单位体积功率(P/14.半饱和15.越大16.黑曲霉17.螺旋桨18.稀释率19.诱导20.提取(或初步纯化)四、简答题1.答:分批培养:一次性投料、一次性放料。优点:操作简单,不易染菌;缺点:非生长阶段时间长,设备利用率低,底物抑制难以控制。补料分批培养:过程中间歇或连续补加底物,但不取出产物。优点:可解除底物抑制,延长产物合成期,提高产量;缺点:操作控制较复杂。连续培养:连续进料出料。优点:发酵状态稳定(稳态),设备利用率高,便于自动控制;缺点:菌种易退化,染菌风险大,适用范围有限。2.答:氧传递系数(a):是反映发酵罐氧传递能力的重要参数,定义为单位体积发酵液单位时间内氧的传递量(推动力归一化后的速率常数)。它等于液膜传质系数与比表面积a的乘积。影响因素:(1)操作变量:搅拌转速、通气压力、通气量。(2)物理性质:发酵液的黏度、表面张力、扩散系数。(3)设备几何参数:搅拌器类型、挡板、空气分布器等。(4)发酵液成分:消泡剂、菌体浓度等。3.答:pH变化原因:(1)基质代谢:酸性产物(如有机酸)积累导致pH下降;氮源利用(如铵盐释放氨)导致pH上升。(2)产物生成:碱性或酸性产物的积累。控制方法:(1)基础配方调节:选择合适的碳氮比和缓冲成分(如磷酸盐、CaCO3)。(2)流加酸碱:在线监测pH,通过流加酸或碱进行自动控制。(3)补料策略:通过补加糖或氮源调节pH。4.答:代谢调控:通过控制微生物的代谢途径,使其最大量地积累目的产物。营养缺陷型的应用:营养缺陷型菌株缺乏合成某种必需物质(如氨基酸、维生素)的能力。在发酵培养基中,人为限制该物质的浓度(亚适量),使得菌体生长受到限制,从而切断正常的代谢调节网络(如解除反馈阻遏),迫使代谢流向支路,大量积累特定的次级代谢产物或中间代谢产物。5.答:常用准则:(1)等单位体积功率放大(P/(2)等氧传递系数放大(a=常数):适用于耗氧量大、溶氧为限制因素的发酵。(3)等搅拌尖端线速度放大(N=常数):适用于对剪切力高度敏感的细胞(如动植物细胞、某些丝状菌)。适用范围:见上述各点。通常高耗氧发酵优先考虑a准则;剪切敏感型优先考虑线速度或P/6.答:流变学:研究物质流动和变形的科学。发酵液流变类型:(1)牛顿流体:黏度恒定(如细菌、酵母低浓度发酵液)。(2)假塑性流体:黏度随剪切速率增加而降低(如高浓度丝状菌发酵液)。(3)胀塑性流体:黏度随剪切速率增加而增加(较少见,如某些淀粉悬浮液)。(4)塑性流体:存在屈服应力,需克服一定应力后才开始流动(如高浓度颗粒悬浮液)。影响:影响混合均匀度、氧传递效率、热量传递及搅拌功率消耗。例如,假塑性流体在高剪切区黏度降低,利于氧传递,但在低剪切区(如罐角)可能形成死区。7.答:主要来源:(1)生物热:微生物分解底物产生能量,部分用于合成,部分以热形式释放。(2)搅拌热:机械搅拌的动能转化为热能。(3)蒸发热:水分蒸发带走热量(冷却效应)。(4)辐射热:罐壁与环境温差交换的热量。影响:发酵热导致发酵温度升高。温度是影响微生物生长和产物合成的关键参数,因此必须通过冷却夹套或盘管移除多余热量,维持恒温。8.答:原因:(1)避免高浓度底物对菌体生长或产物合成的抑制(如底物抑制、葡萄糖效应)。(2)延长发酵周期,提高产量。(3)纠正发酵过程中的成分偏差(如pH、氮源水平)。(4)控制菌体浓度,防止过度生长导致耗氧过快。补料方式:(1)间歇补料:定时定量补加。(2)连续补料:恒速或变速流加。(3)指数补料:按指数规律流加,以维持比生长速率恒定。(4)反馈补料:根据DO、pH、尾气CO2等参数在线控制补料速率。五、计算与分析题1.解:(1)求平均比生长速率根据分批培养对数生长期动力学方程:X代入数据:4.08两边取自然对数:ln=(2)求得率系数消耗的底物量Δ生成的菌体量Δ

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