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文档简介

实验指导

本课程为了提高实验课的教学质量,结合我院专业设置和学科的发展,根据

“湖北中医学院《病理学》教学大纲”、教学进度计划,以及教学实验和科学研究

的特点,并吸取其他兄弟院校实验教学的经验,我们在本课程原有《病理学实验

指导》(由梅家俊教授主持编写)的基础上,进行了反复多次的修订和补充。

此次修订的最大特点是图文并茂,增加了大量动物实验基本操作和实验过程

的线条图,以帮助学生掌握规范的实验操作,提高学生的动手能力。

同时,为了适应本、专科层次及不同专业的教学需要,该实验指导列入的内

容较多,以供选择使用。

病理学实验指导

中医、针灸、骨伤、高护专业

病理学教研室

病原病理实验室

编写

湖北中医学院

2004年9月

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病理学是现代医学基础理论学科之一,为基础医学与临床医学之间

的桥梁。根据《新世纪高等中医院校病理学教学大纲》对实验教学的要

求,病理学的教学过程包括课堂理论讲授和实验教学(人体标本、切片

标本、动物实验、幻灯、录相、电影及多媒体教学等)。为了提高实验

课的教学质量,结合我院专业设置和学科的发展,以及教学实验和科学

研究的特点,并吸取其他兄弟院校实验教学的经验,我们在教研室原有

《病理学实验指导》(由梅家俊教授主持编写)的基础上,进行了较大

幅度的补充和修订。为了适应本、专科层次及不同专业的教学需要,本

实验指导列入的内容较多,以供选择使用。

参加本次实验指导修订的有陈振发、赵婷秀、许湘、刘凌琪、王

秀莲、姜霞等老师。由于编者水平有限,经验不足,本实验指导的内

容和文字难免存在缺点和错误,请广大老师和同学多提宝贵意见,以

便今后修订时改正。

病理学教研室

病原病理实验室

2004.9

2

目录

第一部分病理学实验的目的和要求1

第二部分病理学动物实验的基本知识和基本操作2

一、病理学教学常用实验动物简介2

二、病理学动物实验的基本操作技术3

三、实验报告书写要求9

第三部分实验内容10

实验一细胞和组织的损伤与修复10

实验二局部血液循环障碍11

实验三实验性缺氧13

实验四实验性失血性休克14

实验五炎症15

实验六肿瘤17

实验七心血管系统病理19

实验八呼吸系统病理20

实验九消化系统病理21

实验十实验性肝性脑病23

实验H^一泌尿系统病理24

实验十二传染病25

实验十三电化教学26

实验十四病案讨论26

3

第一部分

病理学实验的目的和要求

一、实验目的

学习病理学必须贯彻理论与实践相结合的方法。通过实验教学证课堂理论,

巩固和加强所学理论知识;学习一定的实验观察方法和操作技能,培养学生严肃

的科学态度及实事求是的作风,以及根据实验结果进行独立思考和综合分析的能

力。

二、实验方法

病理学实验是以病理标本(包括肉眼标本和病理组织切片。的观察、幻灯片、

动物实验、临床病理讨论等方法进行。兹分别说明如下:

1、肉眼标本观察:标本系来自尸体剖检或手术切除之脏器、组织,观察时应

首先辨认是什么脏器,再联想该脏器的正常情况,加以比较,从表面及切面观察

它的大小、形状、颜色和质地等方面的变化,最后作出肉眼诊断,并思考其发生、

发展和结局。

2、显微镜标本观察:观察切片时,应用肉眼作初步观察,然后用低倍镜浏览

全片,辨认病变组织取材于何种脏器,寻找病变所在,再选某些病变用高倍镜作

进一步观察,了解或掌握病变的特点并联系肉眼病变进行思考。

3、动物实验:动物实验是在动物身上人工地造成各种病理模型,以探讨病变

发生的原因、条件、疾病发展的规律等。但对动物实验的结果必须有正确的认识

和评价,不能机械地搬用于人类。

4、临床病理讨论:一般选用较典型的尸体剖检或临床病例将其有关资料发给

同学,在老师的协助下,观察标本,分析资料,展开讨论,作出诊断,分析病因、

发病机制及各种临床表现。

三、实验要求

1、实验课前必须复习理论知识,预习实验内容,并了解实验的目的要求及方

法。

2、实验时态度严肃,操作认真,观察仔细,务求达到实习目的。

3、尊敬老师,团结互助,不谈笑喧哗,保持良好的学习环境。

4、爱护动物和各种器材、标本,如有损坏,应向实习的老师讲明情况,由老

师根据有关规定,决定是否需要赔偿。

5、归还器材、标本,搞好清洁卫生。

4

第二部分

病理学动物实验的基本知识和基本操作

一、病理学教学常用实验动物简介

(-)实验动物的选择原则:

病理学实验动物的选择是决定实验能否成功的重要因素之一。一般应根据实

验目的和要求、各种实验动物的特点以及复制动物模型的经验来确定采用何种动

物较为合适。通常应综合考虑下列因素:

1、预想的动物模型是否能复制成功,其成功率的大小。应尽可能地选用近似

于人类疾病、病证的动物模型,力求能特异性地反映某种疾病或某种机能、代谢

和结构的变化。

2、所采用的实验方法和所观察的指标是否简单易行。宜选用复制时间短、复

制方法简单的动物模型和特异性好、重现性高。又切合本单位仪器设备等实际条

件的观察的指标。

3、实验结果的稳定程度是否一致。应尽量选用年龄(或体重)一致或相近的动

物,其健康和营养状态必须良好,有时还应考虑其性别因素。

.4、动物是否便于管理,人力、物力、财力是否经济。

5、在教学实验中还应考虑在单位时间内能否完成以及教学效果的优劣。

(-)几种常用实验动物的特点和用途:

病理学实验常用的动物有小白鼠,大白鼠、豚鼠、家兔。狗、猴和青蛙等,

它们各有不同的特点和用途。现将儿种教学用实验动物简介如下。

1、家兔:属于哺乳类动物,其生理特性与人类相接近。

家兔的主要特点有:①性情温顺、繁殖率高,容易选出条件类似的家兔分组

配对比较。②在家兔身上容易做到颈动脉压、股动脉压、肺小动脉楔压、中心静

脉压等指标的直接描记。③价格低廉、饲养容易。

家兔可用于复制许多病理过程和疾病,如水肿、发热、炎症、失血性休克、

动物粥样硬化、慢性肺心病、肝炎、肾炎等。

2、小白鼠:系哺乳类动物,是实验室最常使用的一种动物。

小白鼠的主要特点有:①小白鼠可以进行大量繁殖,容易满足实验对动物同

种、纯种、性别和年龄等方面的要求,也容易达到需要大量实验动物的统计学要

求。②小白鼠对许多疾病有易感性,因而适用于研究这类疾病,如血吸虫病、脑

炎等。小白鼠的纯种品系甚多,各有其独特的生物学特性,被广泛应用于各种肿

瘤研究。③小白鼠价格低廉,生活条件容易控制,并因其器官较小而在做某些检

直(如电镜)时,可节约人力和物力。④小白鼠对外界环境适应性差,不耐冷热,

难经饥饱,比较娇嫩,故实验时宜耐心细致、动作轻柔,以免干扰实验结果。

用小白鼠可以复制如水肿、炎症、缺氧,肿瘤、多种传染病……等许多病理

过程和疾病。

3、大白鼠:系哺乳类动物,其形体较小白鼠大。

大白鼠主要特点有:①大白鼠生活条件容易控制,便于大量繁殖,也容易满

足实验对其同种、纯种、性别、年龄的要求,尤其适用于需要大量动物而小白鼠

5

又不能达到实验要求的实验,如亚硝胺可诱发大白鼠食道癌,而小白鼠则很少发

生。②适用于需要较大体型动物的实验,如可以直接记录血压和研究休克,DIC

时血液循环的改变。

常用于复制如水肿、炎症、缺氧、休克、DIC、心肌梗死、肝炎、各种肿瘤……

等许多病理过程和疾病。

4、蟾蛛、青蛙:属于两栖类动物,是脊椎动物由水生向陆生过渡的中间类型,

也是医学实验中常用的动物之一。

蛙类的主要特点及用途有①离体的蛙心因能有节奏地搏动很久而常用于研究

心脏的功能。②蛙类的腓肠肌和坐骨神经可用于观察外周神经的功能。③其肠系

膜的血管可用于观察局部血液循环障碍和炎症微循环的改变。④容易捕捉,易养

活,价格低廉。

(三)常用实验动物的性状判别:

动物年龄、性别、健康状态和个体差异对实验结果常有直接影响,动物实验

时宜选用性别、年龄一致或接近,个体状态大致相同的健康、活泼的动物作实验

对象,并按随机原则分到实验组和对照组。

1、哺乳类动物健康状态的判定:健康者喜活动,喜吃食,发育良好,肌肉丰

满,反应灵活。眼睛明亮,瞳孔清晰,结膜不充血。皮毛柔软光泽,皮肤无破损、

感染。中部不膨大、无腹泻(肛周无稀便或分泌物污染)。

2、动物年龄的判断:一般常选用发育成熟的青壮年动物。由于一般实验室难

以知道其确切年龄而常根据某些生理特征和体重判断其年龄。

3、哺乳类动物性别辨认方法(表1)

表1哺乳动物的性别辨认方法

雄雌

体型体大,躯干前部较发达体小,躯干后部较发达

性征拨开生殖孔有性器官突出,有时见睾丸乳头较明显

其它肛门和外生殖器距离较远肛门和外生殖器距离较近

4、某些实验动物的常见正常值(表2)

表2几种实验动物的常用正常值

狗兔大白鼠小白鼠

寿命(年)10-204~92〜32-3

性成熟期(日)180—300120—24060〜7535〜60

成年体重(kg)8-201.5以上早0.1580.25以上0.02以上

体温(直肠。C)37〜3938.5—4037.5—3936.5—39

心率(次/分)80~130120—150200~260520—780

呼吸(次/分)20-3038-8066~15084~230

血压(mmHg)108—18990~13070~18493〜138

总血量(占体重%)8〜95.465.76-6.947.78

二、病理学动物实验的基本操作技术

(-)动物的捉拿和固定:

动物的捉拿和固定是进行动物实验的基本操作之一,实验者应熟练掌握。

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1、家兔:家兔性情温顺,除应避免被锐利的脚爪抓伤外,较易捕捉。捉拿时

用右手抓其项背部皮毛,轻提动物再以左手托其臀部,使其呈坐位姿势落在左手

掌心(图1)。切忌以手捉兔耳、拖拉四肢以提腰背部。

图1家兔的正确捉拿方法图2捆绑家兔四肢的布带活套

将家兔仰卧固定于兔台的方法是,先以四条布带作为活套(图2),分别套在

其四肢的腕或踝关节上方,收紧布带将兔仰卧于兔台上,先后将两后肢扣两前肢

固定并系于兔台的木桩上,再用索线缚住其上门齿(或用兔头固定锯)将免头固定

于兔台的竖杆上(图3)o

图4小鼠的抓取方法A抓住提起鼠尾B将小鼠放在左手上

7

2、小白鼠:小白鼠虽然性情温顺,但也要提防其咬伤手指。捉拿时先用右手

抓住鼠尾提起或放在左手上(图4)。固定时,将小鼠置于鼠笼或实验台上,用左

手拇指和食指抓住小鼠两耳后的项背部皮肤(图5),将鼠体置于左手手心中,拉

直后以无名指及小指按住鼠尾以固定小鼠(图6),右手进行操作。

3、大白鼠:大白鼠较小白鼠凶狠,牙齿锋利,要提防被其咬伤,捉拿时最好

戴上棉手套。先用右手捉住其尾巴,置于实验台上,以左手拇指和食指、中指抓

其两耳后的项背部皮肤,将鼠固定在左手掌中(图7),右手即可进行操作。

4、青蛙(或蟾蛛):先用左手将青蛙背部紧贴手掌,以中指、无名指,小指压

住其左腹侧和后肢,拇指和食指分别压住左、右前肢,将动物提起(图8)右手

进行操作。在捉拿蟾除时注意勿挤压其两侧耳部突起之毒腺,以免使毒汁射入眼

图5小鼠的固定方法A置小鼠于鼠笼上B抓住小鼠两耳后的项背部皮肤

图6将鼠体置于手心以固定小鼠图7大鼠的抓取方法

8

(二)动物被毛的去除:

最常用的除毛方法是剪毛。动物固定后,可用粗剪刀将其所需部位的被毛依

次剪去。剪毛时剪刀需紧贴皮肤,不可用手提起被毛,以免剪破皮肤。剪下的被

毛应集中放在装毛的容器内,以免其污染环境和手术野。

(三)动物的给药途径:

现将常用的给药方法简介如下。

1、皮下注射:以左手拇指和食指提起皮肤,将注射器针头直接刺入皮下注药

即可。

2、腹腔注射:用小白鼠做实验时,以左手固定动物使其腹部向上,右手将注

射器针头于左(或右)下腔部刺入皮肤,并以45°角穿过腹肌,固定针头后缓注药

物。为避免损伤内脏,可使动物处于头低位而使内脏移向上腹(图9)。

家兔的腹腔注射宜在下腹部的腹白线旁开1cm处进针。

图8抓取两栖类动物方法图9小鼠腹腔注射方法

3、静脉注射:

(1)家兔:一般采用耳缘静脉注射。兔耳中央为动脉,内、外缘为静脉(图

10);内缘静脉深,不易固定而不用;外缘静脉表浅,易固定而常用。其注射方法

是先拔去注射部位的被毛,用手指弹动或轻柔兔耳使其静脉充盈,左手食指和中

指夹住静脉的近端,拇指绷紧静脉的远端,无名指和小指垫在兔耳的下面,右手

持注射器将针头G主射器刻度面及针尖斜面向上)从静脉远端刺入,移动左手拇指

以固定针头,放开食指和中指,缓慢注入药液(图11)。药物注毕拨出针头时宜

用手指压迫针眼片刻以止血。

(2)小白鼠和大白鼠:一般采用鼠尾静脉注射,鼠尾静脉有三根,左、右两侧

及背侧各一根(图12),其中左、右两侧的尾静脉较易固定而多采用,其注射方

法是先将动物固定在鼠筒内,露出鼠尾并涂擦二甲苯使其血管扩张,左手拇指和

食指捏住鼠尾两侧,使静脉充盈,中指下面托住尾巴,以无名指和小指夹住鼠尾

末梢,右手持注射器使针头与静脉平行(小于30°角)刺入,缓注药液无阻力即表

示针头已进入静脉,继续注完药物(图13)o拔出针头后将鼠尾向注射侧弯曲即

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可止血。

静脉注射时应尽量从兔的耳缘静脉或鼠尾静脉的远端进针注药,以便需要反

射静脉注射或穿刺失效时,可以由远而近,渐次前移注射部位,提高该静脉的使

用效率。

图10兔耳部血管分布图11兔耳静脉注射方法

图12小鼠尾部血管分布图13小鼠尾静脉注射方法

A动脉V静脉

附:表3常用实验动物注射量和使用针头

动物项目灌胃皮下注先肌肉注」寸腹腔注」寸静脉注射

家兔最大给药量20ml2ml2ml5ml10ml

使用针头10号导尿E6%号6%号6号7号

大鼠最大给药量2ml1ml0.4ml2ml4ml

使用针头静脉切开针6号6号6号5号

小鼠最大给药量1ml0.4ml0.4ml1ml0.8ml

使用针头9号5%号5%号5%号4号

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(四)动物的麻醉方法:

麻醉可分为全身和局部麻醉两大类,全身麻醉又可分为注射麻醉和吸入麻醉

两种。其中注射麻醉应用最多。注射麻醉常选用戊巴比妥钠和乌拉坦等药物,多

采用静脉注射和腹腔注射的方式给药。

局部麻醉常以建盐酸普鲁卡因溶液,在手术部位作皮下浸润麻醉,其药量按

所需麻醉的范围而定。

(五)动物的处死方法:

不同动物的处死方法有所不同。鼠类常采用脊椎脱臼法,即右手抓住鼠尾用

力向后拉的同时,以左手拇指和食指用力向下按住鼠头,使其脊髓与脑断离,鼠

即死亡。家兔等大动物常用空气栓塞、放血等方法将其处死。

(六)常用的动物手术方法:

病理学教学实验常以急性动物实验为主,多以血压、呼吸等为观察指标,以

静脉注射、放血等为实验方法,因而常需暴露气管、颈总动脉、颈外静脉、股动

脉、股静脉并作相应插管。现将常用的家兔颈总动脉和颈外静脉的分离(图14)

和插管简介如下:

图14家兔颈部血管神经解剖位置

1、家兔颈总动脉的分离及插管术:颈总动脉插管主要用于测量动脉血压。

分离的方法是先在颈部正中切开皮肤及皮下筋膜,暴露肌肉,可见颈正中部

位有两层肌肉,浅层为呈“V”字形走行而向左、右两侧分开的胸锁乳突肌,深层

为与气管平行走向并覆于气管上的胸骨舌骨肌。用止血钳分离两层肌肉的交接处

(切勿在肌肉内分离,以免出血),即可见深层有搏动的颈动脉鞘,游离颈总动脉

2〜3cm,在其下穿线备用。

插管前需先将动物肝素化(由耳缘静脉注入适量肝素),并将抗凝液体充满插

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管以防血液凝固。插管的方法是先将游离段颈总动脉的远心端结扎,近心端用动

脉夹夹住,另一线置于动脉夹与远心端结扎线之间,再将左手食指从血管背后轻

扶血管,右手持眼科剪,朝向心方向与血管呈45°角,在紧靠远心端结扎线的部

位剪开动脉周径的1/3左右,将动脉插管与动脉平行地朝向心方向插入动脉内,

用近心端的线扎紧并固定于插管的橡皮圈上,以防滑脱,然后放开动脉夹即可检

测血压。为了更好地固定插管和保证插管通畅,可将其适当固定于兔台上。

2、家兔颈外静脉的分离及插管术,颈外静脉插管可用于注射、输液和中心静

脉压的测量。

分离的方法是颈部正中切开皮肤,用手指从皮肤外将一侧组织顶起,在胸锁

乳突肌外缘可见粗而明显的颈外静脉,仔细分离静脉周围的筋膜组织,游离长约

3cm的颈外静脉穿线备用。

插管的方法是在动物肝素化后,先用动脉夹夹住颈外静脉的近心端而使血管

充盈,再结扎远心端(若先结扎远心端可使静脉塌陷呈细线状而难以插管),随后

在结扎线的近心侧剪开颈外静脉并插入导管(方法同前),放开动脉夹,轻柔地将

导管插入5~8cm即可到达右心房入口处(也可先在体表预测插管深度),扎紧插管

并固定在导管橡皮圈上以免滑脱。插管成功后,立即将输液装置开起,以每分钟

数滴的速度输液以保持导管通畅。

三、实验报告书写要求

实验课教学是培养学生科研能力的重要场所,除要求学生进行正规、准确的

独立操作和全面、细致地观察实验结果外还要求学生按实验要求认真地书写实验

报告,并强调实验报告的正确书写可以为将来撰写科研论文打好基础。

1、实验报告的基本要求:实验报告要求结构完整,条理分明,文字简炼,书

写工整,措辞应注意科学性和逻辑性。一般应包括下列内容:姓名、班级、组别、

日期、实验名称、实验目的、实验原理、实验动物(包括种类、数量、性别、体重)、

实验方法、实验结果、讨论和结论等。

2、实验结果的整理:在实验过程中应以严谨的、实事求是的科学态度观察实

验出现的每个现象,并准确、及时、客观地予以记录,随后根据实验目的将原始

资料系统化、条理化地予以整理,并采用适当方式(叙述式、表格式或曲线式)予

以表达。

3、实验结果的讨论和结论:对实验结果应运用所学的理论予以解释和分析,

以验证实验目的;对实验结果中出现的“异常现象”,应加以分析讨论,最后根据

实验结果可以提示和说明哪些问题而简要地归纳为儿点结论。

12

第三部分

实验内容

实验一细胞与组织的损伤与修复

[目的要求]

1、观察几种常见的组织损伤与修复的肉眼形态及其镜下结构。

2、结合理论掌握各类变性、坏死和肉芽组织的概念及其病变特点。

[实验内容]

一、大体标本:

㈠标本是从肾外缘纵行切开,显示肾实质及肾盂肾盏,肾盂扩张变形,内

含多个大小不等的结石,肾实质普遍萎缩变薄,部分萎缩明显处仅0.3厘米厚,

这是由于肾盂积水压迫所致。

诊断:肾萎缩。

思考:何谓萎缩?萎缩有哪几种?

㈡肝脏表面呈黄色,包膜光滑紧张,说明肝脏肿大。大切面,可见肝脏呈

黄色切面隆起,边缘外翻,血管因无病变,略显内陷。此为肝脏脂肪变又有浊肿

之表现。

诊断,肝脂肪变。

思考:肝脂肪变的原因及结局如何?为何脂肪变与浊肿可发生在同一脏器?

㈢标本是一片脾脏,棕褐色,质地致密,脾小体不易见到。标本右侧皮包

膜增厚显著,由于结缔组织增生,营养障碍而发生玻璃样变,表现为均匀一致,

略带灰白色,半透明如毛玻璃样,使脾脏状似药丸裹上一层糖衣,故有糖衣脾之

称。

诊断:脾包膜玻璃样变。

思考:玻璃样变分为哪儿种?

㈣脾凝固性坏死(脾梗死)。

㈤肾干酪样坏死(肾结核)。

闲肝液化性坏死(肝脓肿)。

(七)足湿性坏疽。

(2心萎缩。

W心代偿性肥大。

(+)骨折愈合。

二、显微镜标本:

㈠肾混浊肿胀(编号3)

观察要点:

1、低倍镜下认出肾小球及其附近的近曲小管,然后着重观察近曲小管的变化。

2、高倍镜下,近曲小管上皮细胞肿大,胞浆向管腔内突出,使管腔狭窄而参

13

差不齐,细胞浆内充满无数大小相仿,粉红色的细小颗粒(用稍暗的光线观察则更

清楚)。细胞核可因胞浆内颗粒所遮盖而模糊不清。在少数肾小管管腔内尚可见红

染之蛋白物质。

㈡脾小动脉玻璃样变(编号4)

观察要点:

1、切片标本取自脾组织,低倍镜下见组织外覆有纤维结缔组织构成的被膜,

被膜组织向实质深入,形成许多不规则小梁的断面,血管穿行于小梁内,在小梁

之间淋巴细胞密集成团之处是脾小体(白髓),其余均由血窦和髓索构成(红愤)。

2、在高倍镜下观察脾小体,其中央或边缘有小动脉,称为中央动脉。中央动

脉管壁增厚,管腔变小,细胞核减少,原有的层次不能辨认,呈现细致均匀的红

染物质,此即脾小动脉玻璃样变的特点。

㈢示教:肝脂肪变,正常脾小动脉,肉芽组织。

实验二局部血液循环障碍

[目的要求]

1、了解充血和栓塞动物模型的复制及其对机体的影响。

2、观察儿种局部血循环障碍的肉眼形态及慢性肺淤血的镜下结构。

3、结合理论掌握淤血、栓塞、梗死的概念、病变特点及其后果。

[实验内容]

一、动物实验:

㈠实验性动脉性充血:

1、动物:家兔1只。

2、药品:二甲苯棉球少许。

3、方法:用二甲苯棉球涂擦家兔一侧耳朵,与对侧比较。

4、要求:观察涂二甲苯之兔耳,血管数增多,变粗,充血,颜色鲜红,温度

增高。

㈡栓塞:

1、实验性空气栓塞:

(1)动物:家兔1只。

(2)器材:20mL注射器1付,水盆1个,手术刀,手术剪各1把,有齿、

无齿镜子各2把,缝合线少许,或止血钳2把。

(3)方法:取家兔1只,于兔耳缘静脉内注入空气10ml,观察家兔有何变

化。兔死后,开胸观察其下腔静脉内充满气泡,然后结扎出入心腔之大血管,从

结扎之远心端剪断血管,放入水盆,在水中切开心腔,观察心腔中有无气泡逸出。

(4)要求:观察空气栓塞的形成及后果。

2、实验性脂肪栓塞:

(1)动物:青蛙或蟾蛛。

(2)器械及药品:显微镜,大玻板(有孔蛙板),小玻片,毁蛙脑针,眼科剪

刀和镶子,烧杯,滴管,1ml注射器和5号针头,棉花少许,生理盐水20〜30ml,

植物油2〜5ml。

(3)方法:

14

①破坏蛙脑脊髓:左手握蛙,以食指压蛙头部前端,拇指按压背部,使头

前俯,右手持毁脑针,从枕骨大孔垂直刺入,将针尖端向头方探入颅腔,左右搅

动,以破坏脑组织。而后,将针退出,再从枕骨大孔转向尾方,与脊髓平行刺入

椎管,以破坏脊髓待四肢紧张性完全消失,即表示脑和脊髓已完全破坏。

②捣毁脑脊髓后,将蛙腹向上放在大玻板上,在剑突处沿中线剪开胸部皮

肤及胸骨,剖开胸腔,剪破心包,暴露心脏,从心尖处向心室内注入植物油0.3〜

0.5mlo

③沿腹左侧剪开皮肤打开腹腔,小心用镜子将肠神拉出,降无扭结的肠系

膜拉开,固定在小玻片上,在低倍镜下可见大小不等之脂肪滴分散地随血液流动,

有时可见到脂肪滴发生栓塞,血流停止。

(4)要求:观察脂肪滴在蛙肠系膜血管的栓塞现象。

—•大体标本:

㈠肝脏切面可见暗红色条纹与浅黄色条纹相间,形似推榔之切面,故又称

“槟榔肝”。呈暗红色区域为肝小叶中央静脉及窦状隙之淤血,淡黄色区域为肝细

胞脂肪变性。以上变化使肝脏体积增大。

诊断:慢性肝淤血。

思考:何谓淤血?慢性肝淤血的原因是什么?

㈡大脑水平切面,显示内囊及脑室。右侧内囊区严重出血,破坏部分脑组

织,呈黑色。出血灶的血液破入脑室。此为高血压病时大脑中动脉分支豆纹动破

脉裂出血所致。

诊断:脑出血。

思考:出血的结局和后果如何?

㈢脾脏切面见一三角形之梗死灶,境界清楚,向表面隆起,灰白色,无结

构。此病灶之尖端向脾门,底部位于脾表面,梗死灶之上缘略带灰黄色为中性粒

细胞渗出所形成,梗死灶近下缘处见灰红色弯曲条纹,是梗死机化之表现。

诊断:脾贫血性梗死。

思考:何谓梗死?梗死的结局和后果如何?

㈣肺切面见三个略呈三角形的病灶,病灶底部位于肺表面,病灶尖端向肺

门,境界分明,呈黑褐色,实变,由于肺有双重血液供应及肺组织疏松,故组织

坏死后有出血,经甲醛固定呈黑褐色。

诊断:肺出血性梗死。

思考:出血性梗死多发生于哪些器官?

㈤肾贫血性梗死。

的脑膜出血。

(七)中药槟榔。

三、显微镜标本:

㈠淤血肺(编号1)

观察要点:

1、用肉眼观察见肺组织稍变致密,失去正常之疏松状态。

2、低倍镜观察可见肺泡间隔增宽,部分肺泡腔内有淡红色物质。

3、高倍镜下可见肺泡间隔增宽,是由于毛细血管显著扩张,腔内充满红细胞

所致(正常情况下,毛细血管壁腔狭窄,仅能通过1一2个红细胞)。部分肺泡腔内

有均匀的淡红色水肿液(因含少量蛋白质,故染成淡红色)。

15

㈡示教:正常肺组织。

实验三实验性缺氧

[目的要求]

1、了解不同类型实验性缺氧动物模型的复制方法。

2、观察各种类型缺氧的特点及其对机体的影响。

[实验内容]

一、实验材料:

㈠动物:小白鼠

㈡器械与药品:广口瓶、一氧化碳发生装置一套、注射器,吸管、剪刀、

镶子、酒精灯、甲酸、浓硫酸、10%亚硝酸钠,10%氧氧化钠

㈢观察指标:呼吸频率、深度,耳血管口径、数目、颜色,鼻尖部颜色,

全身状态、痉挛、排便等情况。

二、实验方法:

㈠不同机体状态对缺氧耐受性影响:

取体重相近的小白鼠3只,其中1只腹腔内注入10%乌拉坦液0.3mL待其

反正反射消失后,将3只小白鼠分别放入3个广口瓶(图15)内,塞紧瓶塞(不

得漏气)后立即将装有未给药小白鼠的1瓶置于40-50°的水浴锅中,另两瓶置

于室温中。观察并记录小白鼠上述指标及症状出现的时间和死亡时间。

㈡一氧化碳{C0}中毒性缺氧

1、用吸管吸取甲酸3ml放入C0发生器(图16)的试管中,再加入浓硫酸2ml,

立即塞紧瓶塞,试管内即有C0产生。有时可用酒精灯加热试管,加快C0的产生

速度,但不宜过热以免液体沸腾,因C0产生过多过快可使动物迅速死亡,血液颜

色则改变不明显。

图15小白鼠缺氧瓶

16

2、将装有小白鼠的广口瓶连接于CO发生器,仔细观察小白鼠有何变化。待

小白鼠出现痉挛、跌倒等症状或呼吸明显减慢时,立即打开瓶塞(注意先撤走试管

下的酒精灯,夹住通气导管,以免CO外溢),并将小白鼠从瓶中取出,观察其恢

复情况。

3、另取小白鼠1只,重复CO中毒实验,但不予抢救,观察并记录上述指标

及死亡时间。

4、CO中毒死亡和正常小白鼠眼球(或心脏)各取血3滴(注意两只小鼠不要用

同一注射器取血),分别放入预先盛好4ml生理盐水的试管中摇匀,比较两者的颜

色。然后每管加入10%氢氧化钠溶液6滴,再比较二者的颜色。

附:眼球取血方法:左手拇指和中指捏住小白鼠两耳间头皮轻轻向下压迫颈

部两侧(可阻断静脉回流),使眼球外突,手持眼科剪将眼球取出,球后静脉丛的血

液即可自行流出,立即用注射器取血(取血时最好不用针头,以免血液凝固而阻塞

针孔)。

㈢亚硝酸钠中毒:

取小白鼠1只,腹腔注射10%亚酸钠溶液1ml后放入广口瓶内,观察上述指

标,直至动物死亡。

㈣比较不同缺氧类型的颜色变化:

将上述乏氧性、C0中毒性和亚硝酸钠中毒性缺氧的小鼠和正常对照死亡鼠并

排在一起比较其皮肤、趾端、口唇等部位的颜色变化。

思考:本实验复制的动物模型分别属于哪些类型的缺氧?各有何特点?

附:血脑屏障机能:

1、动物:小白鼠1只。

2、器械与药品:1ml注射器、4%号针头、眼科剪刀和镶子、二甲苯棉球和干

棉球少许、1%锥兰4ml。

3、方法:先将小鼠固定于鼠盒内,用二甲苯棉球擦鼠尾,使血管充血,由助

手固定小鼠尾根部,操作者由尾静脉注入1%锥兰0.4ml,以脊柱脱臼法处死小鼠,

将鼠俯卧,由正中剪开头皮,露出颅头,用小剪刀和小镜子按''「形三条缝,小

心剥开颅骨,观察脑有何变化。再将鼠翻转仰卧,打开胸、腹腔,观察内脏有何

变化。

4、要求:观察血脑屏障之作用,脑实质仍为白色,其它内脏皆染成兰色。

思考:实验说明血脑屏障对机体有何意义?

实验四实验性失血性休克

[目的要求]

1、了解失血性休克动物模型的复制方法。

2、观察休克不同时期微循环的改变和血液动力学的变化。

[实验内容]

一、实验材料:

㈠动物:家兔1只,2kg左右。

㈡器械与药品:动物手术器械一套、动脉血压装置一套、中心静脉压、静脉

输液装置一套、微循环观察镜一套。注射器:lml、2ml、30mlo药品:3%戊巴比妥

17

纳、现肝素、生理盐水。

㈢观察指标:血压,中心静脉压,微循环的毛细血管数目、血管半径、流

速、流态等变化。

二、实验方法:

㈠手术操作:

1、取家兔1只,称重后仰卧固定于兔台,剪去颈部和腹部被毛,以3%戊巴

比妥纳溶液(1ml/kg)从耳缘静脉缓慢推注。

2、颈部正中切口,长度约6cm,分离左侧颈总动脉,右侧颈外静脉,穿线备

用。

3、由耳缘静脉注现肝素(0.5ml/Kg),行肝素化抗凝血。

4、颈总动脉插管,接血压描记装置,颈静脉插管接输液装置和中心静脉压装

置。(注意应使水银检压计和中心静脉压装置的"0〃点与动物心脏处于同一水平

面)°

5、于剑突下5cm处向下作约4cm长的腹部正中切口,剪开腹膜,拉出一

段小肠,用大头钉置于带磁铁的方形泡沫框上,将其置于显微镜下,以观察肠系

膜微循环。

㈡实验步骤:

1、记录正常血压,中心静脉压,观察微循环状态(毛细血管数目、血管半径,

流速、流态等)。

2、由颈动脉放血,待血压降至60mmHg,停止放血,记录失血量并观察血压、

中心静脉压、微循环的变化。

3、待血压回升后,第二次放血至40mmHg处,记录血压、中心静脉压,观察

微循环发生的变化。

㈢实验结果:____________________________________________________

_____________微循环___________

处理措施BpmmHgCVPcmH?0流速流态口径管拌数目

正常

第一次放血

第二次放血

㈣讨论:

附:中心静脉压测量方法:

测量中心静脉压用水检压计,通过三通管与静脉插管相连。测压前,阻断与

静脉导管相通的侧管,以输液瓶内盐水灌满水检压计;测压时,阻断与输液瓶相

通的侧管,使水检压计与静脉导管相通,即可观察到水检压计内的液面下降,当

液面不再下降而随呼吸上下波动时,其液面刻度即为中心静脉压;测压后,又按

前法将水检压计内充满盐水,然后阻断与水检压计相通的侧管,使输液瓶与静脉

导管相通,缓慢输液维持导管通畅。

思考:休克不同时期微循环出现哪些变化?为什么会出现这些变化?

实验五炎症

18

[目的要求]

1、观察不同类型炎症的肉眼形态及脓肿,蜂窝织炎的镜下结构。

2、认识炎症时的渗出现象和各种炎症细胞的形态结构。

3、结合理论掌握各种性质炎症的病变特点。

[实验内容]

一.大体标本:

㈠剪开心脏壁层的心包膜,显示心脏表面的脏层心包膜显著增厚。标本之

右侧,见大量纤维素沉积并聚合呈絮状;标本之左前面,见大小不等之灰白色半

透明的斑块,为渗出之纤维素机化后发生的玻璃样变,标本之左侧的另一块为分

离的部分壁层心包膜也有明显增厚。

诊断:纤维素性心包炎。

思考:纤维素性炎常发生在哪些脏器?

㈡肝脏表面包膜光滑紧张,标本之右上部切面可见大小不等之多个脓肿病

灶,有互相融合的倾向,位于包膜下,此处正常结构已被破坏,脓肿腔内的部分

脓汁因甲醛固定作用而凝固,部分则因脓汁流出而呈空腔,大部分脓肿边缘呈明

显黑褐色,为肝组织炎性充血之故。

诊断:肝多发性脓肿。

思考:什么叫脓肿?

㈢瓶中有3例阑尾标本。

底部1例比正常阑尾肿大,浆膜充血显著,表面覆有灰黄及灰白色纤维素性

脓性渗出物,为一般的化脓性阑尾炎。

诊断:急性蜂窝织性阑尾炎。

上面1例,因阑尾在炎症过程中被大网膜所包裹而失去阑尾外形,仅在根部

可见阑尾断面。表面暗淡而无光泽,部分呈黑褐色区域是淤血及出血所致,其末

端见约绿豆大的小孔。)

诊断:急性化脓性阑尾炎伴阑尾周围炎及穿孔。

下面1例,阑尾组织灰黑色,污秽粗糙,出血及坏疽,正常组织结构破坏。

诊断:急性坏疽性阑尾炎。

思考:什么叫蜂窝织炎?

㈣结肠一段,其上端有数个绿豆、豌豆至黄豆大之息肉,息肉突出于肠腔,

标本右缘的一个息肉有蒂连于粘膜而悬垂,息肉形成是由于长期炎症刺激,使粘

膜组织及肉芽组织增生所致。

诊断:结肠息肉。

思考:增生性炎症有几种?

㈤阿米巴性痢疾肠。

因输卵管积水。

(七)细菌性痢疾肠。

二、显微镜标本:

㈠阑尾蜂窝织炎(编号5)

观察要点:

1、标本取自阑尾的横切面。先用低倍镜再转高倍镜由腔内向外逐层观察其肠

壁。

19

2、阑尾腔内有炎性渗出物,粘膜上皮部分缺损形成溃疡,阑尾各层(有内向

外:粘膜层、粘膜下层、肌层、浆膜层)均有充血、水肿和大量中性粒细胞呈弥

漫性浸润,组织坏死不明显,是为蜂窝织炎的病变特点。

㈡肝脓肿(编号6)

观察要求,

1、标本取自脓毒血症患者的肝脏。

2、低倍镜下肝组织切片中可找到多个小脓肿灶,选择一个小脓肿用高倍镜进

行观察。

3、脓肿灶内肝细胞已坏死溶解,其中有大量变性,坏死的中性粒细胞。

4、病灶周围有的肝细胞胞浆内出现小空泡,称水样变性,有的肝细胞坏死,

肝窦扩张。

㈢示教:中性粒细胞的附壁及渗出,浆细胞。

三、作业:

仔细观察阑尾蜂窝织炎的切片后,描绘下列炎症细胞及病理现象。

1、中性粒细胞2、淋巴细胞3、浆细胞

4、巨噬细胞5、中性粒细胞靠边6、中性粒细胞游出

实验六肿瘤

[目的要求]

1、观察各种常见肿瘤的一般形态及恶性肿瘤的组织结构和细胞形态。

2、结合理论掌握肿瘤的特性和良性肿瘤与恶性肿瘤的主要区别。

[实验内容]

一、大体标本:

㈠肿瘤发生于皮下组织,瘤之表面覆有梭形皮肤。肿瘤略呈扁圆形,部分

呈分叶状,色黄,质软,油腻感,与正常脂肪组织甚为相似,表面有一层完整的

纤维组织包膜。

诊断:皮下脂肪瘤。

㈡类圆形肿物,表面有一层完整的纤维组织包膜。切面见瘤组织呈灰白色

略带淡红,质硬。有灰白色粗细不等之纤维条索,纵横交错呈编织状。

诊断:纤维瘤。

㈢肿瘤组织色灰白,向表面突起如帽针头至绿豆大小的菜花状物,即为乳

头,切面可见许多和表面垂直且向表面突起的乳头状结构。

诊断:乳头状瘤。

㈣标本为子宫(宫颈已切除),中部裂隙为子宫腔,两侧约有3.5X2.5X

4.5cm的肿物各1个,瘤与周围正常组织界限清楚,切面见瘤组织呈灰白色,其

光泽与周围正常平滑肌组织相似,唯瘤内肌纤维束粗大呈团状或编织状,排列紊

乱。

诊断:子宫平滑肌瘤。

㈤囊肿组织约12X8cm,表面光滑,一侧可见剪除输卵管的条索状残迹,

切面为大小不等的多房,壁薄,内壁光滑,房内充满浅紫色之粘液。

诊断:卵巢粘液性囊腺瘤。

20

思考:卵巢囊腺瘤有哪几型?各有何特点?

优于胫骨上端可见一巨大肿瘤,切面见瘤组织自骨膜向外及向内呈浸润性

生长,破坏胫上端的骨皮质、干断端的骨松质及骨髓腔的正常结构,右上方为灰

白色和灰黄色的肉瘤组织,左下方破碎不整的区域为肉瘤组织发生坏死,出血所

致。

诊断:胫骨成骨肉瘤。

(七)肠脂肪垂的存在证实这是一段结肠。瓶中一侧见肠壁显著增厚,几乎无

肠腔存在,完全为肿瘤所填塞,瘤组织形状不规则,灰白色,质软,细腻,如鱼

肉样外观,其中有若干灰黑色出血灶。

诊断:肠何杰金氏病。

思考:肉瘤与癌有何区别?

(A)肝体积肿大,色黄呈脂变外观,表面及切面均可见多个暗红色转移癌结

节,切面见癌结节呈现明显出血、坏死,这是绒毛膜上皮癌经血道转移至肝的结

果。

诊断:转移性肝癌。

思考:肿瘤的转移途径有哪几种?

⑺卵巢浆液性囊腺瘤。

(十)食管癌。

(十一)胃癌。

(十二)肺癌。

(十三)子宫颈癌。

(十四)乳腺癌。

(十五)阴茎鳞癌。

(十六)多发性结肠息肉。

二、显微镜标本:

㈠恶性肿瘤组织及细胞的异型性(编号8)

观察要点:

1、低倍镜下:

(1)移动切片,仅于切片组织的边缘见有少数残存的呈囊状扩张的、有矮立

方上皮内衬的乳腺导管,可辨认出这是乳腺组织。切片中组织的主体是具有明显

异型性的癌组织,这是本次实习所要重点观察的部分。

(2)癌细胞多呈片状分布,也有呈团状或条索状排列。癌细胞形态不规则,

呈圆形,多角形,梭形,不规则形。癌细胞体积大小极不等,有的体积很大为瘤

巨细胞。癌细胞浆多丰富红染。

(3)部分区域见癌组织出血、坏死。

2、高倍镜下,进一步观察癌细胞的异型性,可见癌细胞核多呈圆形,有的核

形怪异,核多数较大,核膜厚,核染色质粗糙,浓染,集结成团块或线索状,常

见单个或多个核仁,多极性病理核分裂象常见,有的核内(或胞浆内)可见一红染

的、近圆形或卵圆形的较大包函体。有的尚可见癌细胞吞噬有细胞和碎屑。

㈡皮下腺癌转移(编号9)

观察要点:

1、低倍镜下可见正常的肠粘膜。染色较深的腺样结构之癌组织呈灶状浸润破

坏肌层,并伴若干炎细胞浸润。

21

2、高倍镜下可见由腺样癌巢和实体性癌巢(团块状或条索状)混合而成。癌

细胞多呈高柱状,不规则排列呈多层,极性消失,形成大小不等,形状不规则的

腺样结构,有的可见腺腔共壁及筛网结构。癌细胞核大深染,核仁大而清晰,核

分裂像多见。间质纤维血管组织增生,并有炎细胞浸润。

㈢示教:恶性肿瘤的病理性核分裂,高分化鳞癌癌巢。

三、作业:

用文字描述子宫平滑肌瘤的肉眼特点。

实验七心血管系统病理

[目的要求]

1、观察儿种常见心血管疾病的肉眼形态及镜下结构。

2、结合理论掌握风湿性心瓣膜病,动脉粥样硬化、高血压病的病变特点,并

联系病变认识其临床表现。

[实验内容]

一、大体标本:

㈠心脏体积明显增大(正常人心脏大小相当于本人右拳),二尖瓣之瓣膜显

著增厚、缩短,变形,并互相粘连愈着在一起,加上腱索增粗,缩短以致瓣膜口

狭窄及闭锁不全,故造成左房壁增厚,腔扩大,左室轻度扩大,心外膜下脂肪浸

润。

诊断:风湿性心脏病。

思考:在观察二尖瓣狭窄及闭锁不全心脏所发生的变化的同时,分析其对机

体有何影响?

㈡标本中主动脉二段,显示内膜病变、内膜失去正常的平滑、光泽,并见

有形状及大小不一,微隆起的黄白色和灰白色条纹或斑块,左侧段主动脉可见肋

间动脉开口处病变较为显著,右侧段病变较弥漫、严重,于右下角有形成粥样化

溃疡的倾向。

诊断:主动脉粥样硬化。

㈢心脏显著肥大,左心室肌肉明显增厚(正常1cm),乳头肌增粗变圆,主

动脉开口处之内膜可见灰黄色及灰白色突起的粥样硬化病灶,心外膜下有脂肪组

织浸润,心冠状动脉之切面箭头所示管壁明显增厚,腔缩小且因血栓形成而闭塞。

诊断:冠心病(冠状动脉血栓形成)

㈣标本可见组成脑底动脉环之各段动脉均明显增粗、变硬,粗细不等,由

于脑内动脉中膜及外膜甚薄,故可透过管壁看到内膜上有多个黄白色粥样硬化斑。

诊断:脑底动脉粥样硬化。

思考:脑底动脉、心冠状动脉的粥样硬化对机体有何严重的危害性?

二、显微镜标本:

㈠风湿性心肌炎(编号12)

观察要点:

1、低倍镜下:可见标本取自心肌组织,心肌间质疏松水肿,于血管之一侧有

若干大细胞浸润,较聚集成团,即风湿小结。

2、高倍镜下,

(1)风湿小结主要由风湿细胞和纤维素样坏死灶构成。风湿细胞胞浆多少不

22

等,多较丰富,呈卵圆形、多角形,单核、双核或多核,核大,核膜厚,核染色

质集中于中央呈点状或毛虫状,在风湿细胞之间可见少许无定形结构的、红染的

纤维素样坏死物。此外,尚可见若干成纤维细胞,单核细胞,淋巴细胞等。

(2)心肌有的呈轻度浊肿。

㈡主动脉粥样硬化(编号13)

观察要点:

1、肉眼观察,切片标本为一条带状组织,条带中部隆起,染色较淡,即是本

片所要观察主动脉内膜病变的区域。

2、低倍镜下可见正常动脉组织,内膜菲薄,中膜最厚,外膜也较薄,将隆起

区域移于视野中,则见动脉内膜显著增厚,形如丘状,部分内膜缺损,形成溃疡。

3、高倍镜下:

(1)内膜浅层为增生的纤维结缔组织“帽”,并呈玻璃样变。

(2)内膜深层着色浅淡,为无细胞的不定形物质,坏死组织和少许纤维素,

其中可见许多棱形空隙,是为酒精溶解之胆固醇结晶。

(3)在斑块的边缘部分与内膜交界处常可见许多泡沫细胞。

(4)中膜及外膜无特殊病变。

㈢示教:风湿小结,泡沫细胞。

实验八呼吸系统病理

[目的要求]

1、观察肺炎、肺结核的肉眼形态及其镜下结构。

2、结合理论掌握各类型肺炎及肺结核病的病变特点,并联系病变认识其临床

表现。

[实验内容]

一、大体标本:

㈠肺脏肿大,包膜紧张,表面有灰白色纤维素性渗出物,切面肺脏实变似肝

脏,呈灰白色细颗粒状,失去肺脏原有的细海绵状结构,部分支气管腔内亦可见

纤维性炎性渗出物。

诊断:大叶性肺炎(灰色肝样变期)

㈡小儿肺脏各叶均有散在灰白色针帽头到西米大小,形状不规则的实变病

灶,一侧下叶底部明显,病灶多而集中,并见部分病灶融合。

诊断:小叶性肺炎。

思考:大叶性肺炎与小叶性肺炎的病理变化有何区别?

㈢为部分气肿肺的切面,可见容积显著增大,柔软少弹性,指压有压痕,

颜色灰白(缺血)。满布针孔大空泡,状如海绵。

诊断:肺气肿。

㈣小儿肺脏,切面见肺门、气管、支气管旁淋巴结肿大,自绿豆、黄豆到

小蚕豆大,为灰黄色干酪样坏死,有的互相融合。两肺叶满布自帽针头、粟米、

到融合成片的灰黄

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