DB41∕T 3027-2025 花椒组织培养快繁技术规程

ICS65.020.01

CCSB05

41

河南省地方标准

DB41/T3027—2025

花椒组织培养快繁技术规程

2025-10-30发布2026-01-29实施

河南省市场监督管理局发布

DB41/T3027—2025

目次

前言.................................................................................II

1范围...............................................................................1

2规范性引用文件.....................................................................1

3术语和定义.........................................................................1

4缩略语.............................................................................1

5培养前准备.........................................................................2

6培养基配制.........................................................................2

7外植体处理.........................................................................2

8芽诱导.............................................................................2

9增殖培养...........................................................................2

10生根培养..........................................................................3

11炼苗与移栽........................................................................3

12档案管理..........................................................................3

附录A（资料性）WPM培养基成分.......................................................4

附录B（资料性）MS营养液成分........................................................5

I

DB41/T3027—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由河南省林业局提出并归口。

本文件起草单位：河南省林业科学研究院、河南农业大学。

本文件主要起草人：王文君、翟晓巧、任媛媛、王念、侯志华、何威、董玉山、陈超、王星斗。

II

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花椒组织培养快繁技术规程

1范围

本文件规定了花椒组织培养快繁的术语和定义、缩略语、培养前准备、培养基配制、外植体处理、

芽诱导、增殖培养、生根培养、炼苗与移栽、档案管理等内容。

本文件适用于花椒的组织培养快繁育苗。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

LY/T1882林木组织培养育苗技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

花椒

花椒（ZanthoxylumbungeanumMaxim.）为芸香科花椒属落叶小乔木，枝具短刺，小叶对生。顶生

花序，花被片黄绿色，雌花常无发育雄蕊。果紫红色，分果瓣具油点。花期4～5月，果期8～9月或10月。

外植体

从植株上切取下来用于建立组织培养体系的离体植物器官或组织。

芽诱导

将培养材料在诱导培养基中进行培养，诱导分化出不定芽的过程。

增殖培养

将诱导产生的不定芽转移到增殖培养基进一步扩大培养的过程。

生根培养

将诱导产生的芽转移到生根培养基中诱导生根从而形成完整植株的过程。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

6-BA：六苄氨基腺嘌呤（6-Benzylaminopurine）

NAA：萘乙酸（NaphthaleneAceticAcid）

1

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TDZ：噻苯隆（Thidiazuron）

IBA：吲哚丁酸（IndolebutyricAcid）

WPM：WPM基本培养基（WoodyPlantMedium）

MS：MS培养基（MurashigeandSkoogculturemedium）

5培养前准备

器械灭菌

将培养容器瓶、剪刀、镊子、解剖刀等接种器械用灭菌袋包好，置于高压蒸汽灭菌锅中121℃灭菌

20min。

无菌水准备

根据生产需要，取适量蒸馏水于三角瓶等容器中，高压蒸汽灭菌锅121℃灭菌20min，之后取出备

用。

6培养基配制

以WPM为基本培养基进行培养基配置（WPM培养基成分见附录A）。

芽诱导及增殖培养基为WPM+0.5mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+0.003mg/LTDZ+20g/L蔗糖+5.0g/L琼脂。

生根培养基为WPM+1.5mg/LIBA+0.1mg/LNAA+35g/L蔗糖+4.5g/L琼脂。

将配置好的培养基分装至培养瓶中（常用容量为350mL，1L培养基可分装10～12瓶），分装后封口、

标记，置于高压蒸汽灭菌锅中灭菌。培养基的配制程序按照LY/T1882的规定执行。

7外植体处理

外植体选择

宜选生长健康的花椒当年生嫩枝，取叶柄1.0cm～1.5cm为外植体。

外植体处理

取花椒叶片的叶柄，用清水清洗干净后，先用75%乙醇浸泡1min，再用7.5%次氯酸钠溶液浸泡

15min～30min，最后在无菌环境中用无菌水冲洗4～6次。

8芽诱导

将处理好的叶柄两端各剪掉1.0mm～2.0mm后，将其接种于芽诱导培养基上，培养瓶放置于培养室

中。培养温度为25±2℃，光照强度1500lx～3000lx。光周期通常采用光照16h、黑暗8h。培养30d左

右分化出芽。

9增殖培养

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DB41/T3027—2025

当诱导出的芽高1.5cm～3.0cm时接种于增殖培养基上。培养瓶放置于培养室中，培养条件同芽诱

导。通常增殖芽高1cm左右时更换增殖培养基继续培养。

10生根培养

当诱导出的丛生芽长到2.5cm～3.0cm高时，从茎基部切下，接种于生根培养基上进行生根培养。

培养瓶放置于培养室中，培养条件同芽诱导。

11炼苗与移栽

当花椒幼苗在生根培养基上根长到约3.0cm～3.5cm高时，在自然光下先闭口炼苗7d左右，然后敞

口炼苗7d左右。炼苗后取出生根苗，清洗掉根部培养基，移入装有基质（蛭石+草炭土按1:1比例混合后

用5%高锰酸钾消毒处理或121℃高温灭菌20min）的穴盘（可选穴径和穴深为6.5cm）中，放到温室中培

养，用MS营养液（MS营养液成分见附录B）浇灌保持基质湿润，初始14d内空气湿度保持85%以上，温度

25℃～28℃，14d后湿度逐渐降低与室外环境相同，约30d后移栽到大田中。

12档案管理

建立花椒组织培养基本情况档案，包括以下内容：品种名称、材料来源、培养过程、培养照片等。

档案由组培人员填写，档案填写后，及时整理归档。

3

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A

A

附录A

（资料性）

WPM培养基成分

表A.1给出了花椒组织培养WPM培养基成分。

表A.1花椒组织培养WPM培养基成分表

名称成分含量（mg/L）

硫酸钾K2SO4990

七水硫酸镁MgSO4·7H20370

大量元素

磷酸二氢钾KH2PO4170

硝酸铵NH4NO3400

四水合硝酸钙Ca(NO3)2·4H20556

钙盐

二水氯化钙CaCl2·2H2096

七水硫酸亚铁FeSO4·7H2027.8

铁盐

乙二胺四乙酸二钠Na2EDTA37.4

硫酸锰MnSO4·H2016.9

七水硫酸锌ZnS04·7H208.6

微量元素硼酸H3BO36.2

五水硫酸铜CuSO4·5H200.25

二水合钼酸钠Na2Mo04·2H200.25

肌醇Myo-insitol100

甘氨酸Glycine2.0

有机物盐酸硫胺素ThiamineHCL1.0

烟酸NicotinicAcid0.5

盐酸吡多醇PyridoxineHCL0.5

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B

B

附录B

（资料性）

MS营养液成分

表B.1给出了花椒炼苗用MS营养液成分。

表B.1花椒炼苗用MS营养液成分表

名称成分每升母液含量（g）每升MS称取量（ml）

硝酸铵NH4NO333.0

硝酸钾KNO338.0

大量元素二水氯化钙CaCl2·2H2O8.850

七水硫酸镁MgSO4·7H2O7.4

磷酸二氢钾KH2PO43.4

七水硫酸亚铁FeSO4·7H200.556

铁盐50

乙二胺四乙酸二钠Na2EDTA0.748

硼酸H3BO30.62

硫酸锰MnSO4·H20