临床实验室梅毒血清学检测流程指南(2025版)

临床实验室梅毒血清学检测流程指南(2025版)出了展望。年全国梅毒报告发病率由26.86/10万上升至37.60/10万，整体呈持中的占比很高，从2000年的9.91%(7946/80181)上升至2019年的82.95%(444465/535819),因无临床症状，更易被漏诊。梅毒主要采用暗视野显微镜检查、分子生物学检查、兔感染试梅毒患者湿性皮损组织中梅毒螺旋体暗视野显微镜检查易受取材部位、取材方法等因素影响，敏感度较低；分子生物学检查梅毒螺旋体核酸对于一期或二期梅毒患者的湿性皮损有较高的敏感度和特异度，但对于较易获得的血液样本，其检出率低；兔感染试验的周期需要3~6个月，目前主要用于科研，不适用于临床检测。由于目前梅毒螺旋体的病原学检测在临床应用较少，血清学检测是梅毒诊断的主要实验室检测方法，是术前患者、孕产妇、输血或献血人员、性病门诊患者、健康体检人群等需要进行梅毒筛查群体的必检项目。梅毒的血清学检测包括两大类型：(1)非梅毒螺旋体血清学试验(nontreponemaltests,NTT),检测梅毒螺旋体非特异性抗体(简称梅毒非特异性抗体);(2)梅毒螺旋体血清学试验(treponemaltests,TT),检测梅毒螺旋体特异性抗体(简称梅毒特异性抗体)。鉴于采用单一血清学试验用于梅毒检测时均存在敏感度和特异度的局限性，因此需要一种以上的血清学试验组合以完成梅毒检测流程。即以一种血清学试验方法做初筛，另外一种血清学试验方法进行验证，273—2018)未提及梅毒诊断的实验检测流程，在2020年制定的“预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播工作实施方案”中，对首次就诊的孕产妇采用逆向血清学检测流程和双检血清学检测流程两种筛查方案，但采用何种筛查方案及筛查方案的适用场景未做进一步规定。不同地区不同机构的临床医生常根据自己的偏好或实验室现有检测试剂选择不同检测流程，甚至只依赖1种血清学试验方法。研究发现传统血清学检测流程漏诊率高达24.2%,再加上梅毒血清学生物学假阳性和前带现象等影响，误诊病例也时有发生，这不仅影响梅毒的规范化诊疗和防控，也给就诊者的身心健康带来伤害。为此，中国性病艾滋病防治协会性病防治专业委员会牵头组织国内本领域专家研讨，结合梅毒的血清学检测特点，在详细解读各种梅毒的血清学检测技术和检测流程的基础上，形成临床实验室梅毒的血清学检测流程指南，为从事临床、实验室、公共卫生管理的相关人员提供筛查梅毒流程的指导，避免漏诊与误诊，助力梅毒防控，并对该领域的发展方向提出了展望，助力健康中国战略的实施。指南制定方法：(1)指南制订工作组：本指南由项目指导专家组、执笔专家组和评议专家组共同完成。2023年5月30—31日在珠海召开启动会，杨天赐、尹跃平和王千秋3位教授牵头，项目指导专家组提出撰写意义和写作提纲，执笔专家组撰写指南并根据评议专家意见进行修改，评议专家组对指南撰写意义、写作提纲、文稿进行评议、讨论和修改。(2)临床问题的确定：采用调查问卷形式收集临床问题，调查对象为临床专家、实验室专家、公共卫生专家和基础研究专家(专家的学科情况见文中的专家组成员部分),同时调查国内外梅毒血清检测流程的相关指南和系统评价，收集并确定关键问题。CochraneLibrary、中国知网数据库和万方数据库上进行广泛的文献检索；关键问题的中文检索词为梅毒、梅毒螺旋体、梅毒螺旋体特异检索建库至2024年6月发表的文献，根据研究标题、摘要和全文逐级筛选文献。(4)证据质量与推荐强度分级andEvaluations,GRADE)方法，对文献的质量进行评价，形成指南的初步文本。(5)推荐意见的形成过程和达成专家共识的方法：执笔人形成指南初步文本后，经3位教授，即来自实验室代表杨天赐、背的修订。修订稿经评议专家3轮审核，3位通信作者再对所有专家终由3位通讯作者集体决议确定。定稿会于2024年12月20—22日1.NTT:NTT是最早应用于临床的梅毒血清学检测，在很长的一速血浆反应素环状卡片试验(rapidplasmareagintest,RPR)和现凝集反应。一般人体感染梅毒螺旋体后5~7周产生抗脂质抗原的抗体(又称反应素),即梅毒非特异性抗体，在感染早期可能出现“窗检测敏感度较TT低，容易造成漏检。于临床。一般早期梅毒患者在规范治疗后3~6个月，临床症状好转或消失，梅毒非特异性抗体滴度下降≥2个稀释度(如从1:16下降为1:4)或阳性转为阴性，作为梅毒治疗有效的评估标准。但是，在未察到梅毒非特异性抗体滴度有下降≥2个稀释度(如从1:16下降为1:4)或转阴，提示在梅毒螺旋体感染的自然病程中其NTT滴度也可是一种挑战(图1)。深入开展梅毒非特异性抗体产生机制及其在疾一—梅毒螺旋体特异性抗体2～4周5～7周2年晚期梅毒外周血梅毒非特异性抗体在规定的随访时间(早期梅毒随访2年，晚期梅毒随访3年)结束后，持续不转阴因此，2024年美国疾病控制中心的梅毒实验室检测指南认为继续使敏、特异的TT方法，并逐步应用于梅毒实验室检测。TT是检测宿主中的抗梅毒螺旋体免疫球蛋白G(immunoglobulinG,IgG)和/或免疫球蛋白M(immunoglobulinM,IgM)类抗体等，所用的抗原主要有以下几类：(1)完整的梅毒螺旋体Nichols株悬液，如荧光密螺旋体抗体吸收试验(fluorescenttreponemalantibodytest,FTA-ABS);(2)梅毒螺旋体Nichols株重组蛋白及其组合谱，常用的方法有梅毒螺旋体化学发光试验 immunoassay,Tp-EIA)和梅毒螺旋体免疫层析试验(Treponemapallidumgolloidalgoldimmunechromatographyassay,Tp-GICA)梅毒螺旋体入侵机体后，最早产生的是特异性IgM抗体(感染后约2周),其消失也较早，然而只要有活的梅毒螺旋体存在，就会刺激机体持续产生IgM抗体；特异性IgG抗体产生较晚(感染后约4周),即使治疗后也不易消退，绝大多数终身存在(图1)。梅毒螺旋体试体中的梅毒螺旋体抗原(如Tp0524和Tp0984)或抗体(如Tp17抗体)在梅毒疾病进程和转归中存在时相性变化，是潜在的疗效判断指征。而且，有文献研究发现，15%~25%的一期梅毒患者治疗后梅毒特推荐意见1考虑到专有名称的延续性，根据我国现行的行标，梅毒的血清学检测两类方法名称延续并统一为：(1)非梅毒螺旋体血清学试验(nontreponemal抗体(简称梅毒非特异性抗体);(2)梅毒螺旋体血清学试验 (treponemaltests,TT),检测梅毒螺旋体特异性抗体(简称梅毒特异性抗体)。建议逐步以脂质抗原试验替代NTT(强，高)。推荐意见2梅毒特异性抗体检测的窗口期比梅毒非特异性抗体推荐意见3尽管已有研究提示未能及时治疗的梅毒患者或早期梅毒感染的兔模型中，其梅毒非特异性抗体滴度也会有≥2个稀释度的下降(如从1:16下降为1:4)或转阴，但目前仍推荐该指标作床，将是重要的研究方向(强，高)。异度的局限性，因此需要1种以上的血清学试验组合以完成梅毒检测筛试验，出现阳性反应再用TT进行验证(图2)。NTT操作简便，且等在24124例梅毒螺旋体血清检测试验的横断面研究中，发现传统血清学检测流程的敏感度仅为75.8%(2084/2749),漏诊率达24.2% (665/2749)。且NTT易出现前带现象和生物学假阳性结果，因此排除梅毒感染梅毒螺旋体血清学试验阴性阳性非梅毒螺旋体血清学试验生物学假阳性支持梅毒诊断注：“临床高度怀疑一期梅毒，可行梅毒螺旋体病原学检测(如验等),并随访推荐意见4以NTT作为初筛的传统血清学检测流程的应用主要基于实验室资源(人力、空间、费用、检测量以及服务人群)的考虑，2.逆向血清学检测流程：随着检测技术的发展和自动化高通量TT的普及，以TT方法作为初筛的逆向血清学检测流程已广泛应用于步采取另一种不同原理或不同包被抗原的TT进行验证(图3)。该大多数国家所推荐。2015年以后的美国疾病预防控制中心指南也开这一策略也被纳入我国2020年推荐的检测方案之一。逆向血清学检异性抗体检测不同，目前的TT方法中的Tp-CIA和Tp-EIA可以实现方法(如TPPA)通常需要人工判读结果，其敏感度低于Tp-CIA,因梅毒螺旋体血清学试验(如梅毒螺旋体血清学试验(如Tp-CIA或Tp-EIA等)阴性阳性阴性阴性阳性非梅毒螺旋体血清学试验阳性注：“临床高度怀疑一期梅毒，可行梅毒螺旋体病原学检测(如验等),并随访。随访1、4、6周后(询问病史为既往感染者可不体吸收试验、免疫印迹等作为补充试验。Tp-CIA为梅毒螺旋体化学推荐意见5以TT作为初筛的逆向血清学检测流程，具有更高敏感度和特异度，推荐临床使用(强，高)。推荐意见6用于临床TT初筛的方法可以选择高敏感度和高通量的方法(如Tp-CIA和Tp-EIA),而验证试验更应考虑特异度高的方异度的梅毒特异性抗体试验(如TPPA、FTA-ABS等)作为验证(强，验证(如TPPA)阴性阳性毒感染注：“临床高度怀疑一期梅毒，可行梅毒螺旋体病原学检测(如验等),并随访。随访1、4、6周后(询问病史为既往感染者可不推荐意见7首先推荐有条件的地区和实验室，或根据临床需要 经内科等可疑患者的诊疗)采用双检血清学检测流程进行梅毒检测，其梅毒非特异性抗体不一定阳性。因此，Tong等认为若仅针对梅毒诊断而言，在逆向诊断程序中，进行梅毒特异性抗体初筛后，可能不必再用梅毒非特异性抗体做验证，并于2014年提出第4种血清学检测流程(以前也称为第3种血清学检测流程，鉴于引入双检血清学检测流程，故称为第4种血清学检测流程):以TT作为初筛，阳性标本再用另一种TT进行验证(图5A)。与逆向血清学检测流程最大的不同是没有将NTT纳入梅毒检测流程中。目前，第4种血清学检测流程已经被2014年以后的欧洲指南以及2015年加拿大公共卫生实验室指南所推荐。在一项梅毒较低患病率(1.4%)的119891例大样本的梅毒检测试验中，第4种血清学检测流程与逆向血清学检测流程中仅有5例结果判断不同，一致率近100%。Li等的研究也证实无论是选用Tp-EIA还是Tp-CIA作为初筛方法，第4种血清学检测流程与逆向血清学检测流程的一致率都超过90%。Tong等在较高患病率(11%)的就诊者研究中，第4种血清学检测流程与逆向血清学检测流程的敏感度和特异度均达到99%。因此，无论在高患第4种血清学检测流程与逆向血清学检测流程都具有高度一致的诊梅毒螺旋体血清学试验(如阴性阳性另一种梅毒螺旋体血清学试验验证(如阴性阳性梅毒诊断梅毒螺旋体血清学试验(如排除梅支持图5梅毒的其他血清学检测流程(5A为第4种血清学检测流程；5B为简易血清学检测流程。在患者的临床症状体征和流行病史明确的前提下使用)注：临床高度怀疑一期梅毒，可行梅毒螺旋体病原学检测(如验等),并随访。随访1、4、6周后(询问病史为既往感染者可不用随访),再次采样，若TT筛查和验证均阴性，可排除梅毒诊断；用同等敏感度或更高敏感度的另一种不同原理的梅毒特异性抗体试Qiu等采用构建的BosonTp-CIA与TPPA检测结果进行比较，发现二者的一致性为99.59%,进一步提示在患者症状体征和流行病史即简易检测流程(图5B)。在简易检测流程中，梅毒特异性抗体处推荐意见8第4种血清学检测流程与逆向血清学检测流程的一致性高，都具有良好的诊断效能(强，高)。推荐意见9随着TT技术的不断进步，各种方法学的一致性进一采用一种TT作为诊断依据。建议对可疑阳性样本采特异性抗体试验作为验证(弱，高)。推荐意见10不管是第4种或简易检测流程，推荐对诊断后的患步的诊疗提供依据(强，高)。血清学检测流程存