1.1微生物的培养需要适宜条件课件高二下学期生物浙科版选择性必修3

第一节

微生物的培养需要适宜条件第一章

发酵工程我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》中曾记载“浸曲发，如鱼眼汤，净海米八斗，炊作饭，舒令极冷。以毛袋海去曲宰，又以绸滤曲干于翁中，即投饭，以纸封口至酒熟，醇香甚饮”，意用是把酒曲浸泡在水中活化，一直到冒出鱼眼大小的气泡，把八斗米淘争，蒸熟，摊开放凉，用毛袋过滤去除曲渣，再用绸绢把曲计过浪到瓮里，马上把熟米放进去，然后用纸密封发酵。思考：（1）“浸曲发”过程中，酒曲中的微生物是指？

（2）“鱼眼汤”现象产生的原因是?

（3）“炊作饭”是为消除___________对酿酒过程的影响而采取的主要措施。

（4）“舒令极冷”的目的是？

（5）以纸封口的目的是？发酵工程采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接利用微生物的工作过程。酸奶

腐乳

醋微生物（microorganism）微生物是指人们对所有形体微小、肉眼不可见的生物的统称。病毒细菌酵母菌

霉菌原生生物发酵工程中的主角是微生物，在发酵工程中如何纯化、选育、培养目标微生物？1.需要提供其适宜的生长环境2.需要除掉与目标微生物具有竞争和寄生关系的异种微生物培养基：人们为满足微生物生长繁殖或积累代谢产物的需求而配制的混合养料。1.阅读课本P3，说说培养基各成分的作用和来源①

水②

无机盐③

碳

源④

氮

源⑤

生长因子

影响细胞的吸水能力代谢和生长为微生物生长提供碳元素，无机碳（CO2）、有机物（糖类等）合成蛋白质等有机物，如铵、硝酸盐、尿素、牛肉膏、蛋白胨调节、促进生长细胞的重要组成成分一.培养基

为目标微生物提供适宜的生长坏境一.培养基

为目标微生物提供适宜的生长坏境细菌喜___:

霉菌喜素

：

要含有较高有机氮，用蛋白胨和酵母提取物等来配置

一般用可溶性淀粉加无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁等配制pH:细菌中性偏碱，霉菌中性偏酸2.培养基的理化特性影响微生物的生长。荤一.培养基

为目标微生物提供适宜的生长坏境3.分类根物理特性分为液体培养基和固体培养基（加了凝固剂)液体培养基平板斜面固体培养基据1.液体培养基常用于大规模快速繁殖某种微生物，为什么？液体培养基能与微生物充分接触2.固体培养基包括“平板”和“斜面”,分别有什么作用?“平板”可用于微生物的分离、活菌计数、鉴定;大肠杆菌菌落乳白色，光滑，湿润白色，粗糙，干燥放线菌菌落红色，光滑，湿润单个细菌在固体培养基上大量繁殖，形成一个肉眼可见的子细胞集团，叫做单菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。如菌落大小、形状、边缘、光泽度、颜色、透明度等。“斜面”常用于菌种保存一.培养基

为目标微生物提供适宜的生长坏境3.分类根物理特性分为液体培养基和固体培养基（加了凝固剂)根据化学成分分为天然培养基、合成培养基合成培养基：化学成分完全清楚的培养基，一般用于实验室天然培养基：成分还不十分清楚或成分不恒定的天然有机物制成的培养基。

成本较低，多被用于大规模的生物发酵工业。

如：马铃薯蔗糖培养基、麦芽汁蔗糖培养基、LB培养基（蛋白胨，酵母浸膏）等①

消毒：采用较温和的物理、化学方法仅杀死物体表面或内部一部分不需要

的微生物。二.灭菌和无菌操作技术可以排除非目标微生物的干扰灭菌、消毒、防腐是实验室及生产生活中控制有害微生物常用的方法。方法如：煮沸消毒、巴氏消毒、紫外线消毒、化学药剂消毒在100℃水浴中煮沸5～6min70～75℃水煮30min或80℃水煮15min食品消毒、最大保持风味有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.芽孢②灭菌：采用强烈的物理、化学方法杀灭物体表面以及内部的一切微生物的

方法。包括杀死芽孢。二.灭菌和无菌操作技术可以排除非目标微生物的干扰高压蒸汽灭菌法在_____℃(___________压力)下灭菌________min1211kg/cm215-20灭菌锅/x/page/v3016yvci24.html?使用高压蒸汽灭菌锅时所需的温度、压力和时间是根据要消灭的微生物芽孢等结构的耐热性来确定的。（阅读书本P6）压力表连着放气软管1.图中甲、乙、丙所指的依次是（

）A.安全阀、放气阀、压力表B.放气阀、安全阀、压力表C.安全阀、放气阀、时钟D.放气阀、安全阀、时钟2.高压蒸汽灭菌后，打开灭菌锅的时间是（

）A.灭菌锅冷却至室温B.灭菌锅内压力与大气压相同C.灭菌锅内压力大于大气压D.灭菌锅内压力小于大气压3.使用高压蒸汽灭菌锅时，打开放气阀的目的是（

）A.排尽锅内冷空气B.排尽锅内有害气体C.防治锅内压力过高，造成灭菌锅爆炸D.防止锅内温度过高，使培养基成分受到破坏

不能使用脱脂棉，吸水后易引起污染培养皿可几个包在一起；玻璃试管加棉花塞或塑料盖后也是几个包在一起；再用牛皮纸或报纸包好1.各种器皿、器械必须是无菌的三角瓶可用_________(市售产品，既___________________)或6层纱布封口，再用牛皮纸或报纸封口；封口膜封口膜通气又不使菌进入1.各种器皿、器械必须是无菌的移液管上端用镊子放入少量棉花，再用牛皮纸包上；移液器的“枪头”放在可灭菌的专用塑料盒。1.各种器皿、器械必须是无菌的用高压蒸汽灭菌法对加塞的试管进行灭菌时，需要用牛皮纸包扎，其主要目的是（

）A.防止高温使得试管爆裂B.防止冷凝水进入器皿和浸湿试管棉塞C.防止细菌污染棉塞D.防止灰尘污染棉塞灭菌后，通常将实验用具放入_______℃的烘箱中烘干，以除去灭菌时的水分，避免金属器械锈蚀。培养基放在超净台上，然后打开_________和_________，灭菌30min。烘箱60~80紫外灯过滤风超净台经过滤风过滤后吹出的无菌空气可以排除超净台工作区的空气，将尘埃颗粒和生物颗粒带走，以形成无菌的高洁净的工作环境。2.各种培养基也必须是无菌的培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌，考虑到高压灭菌锅的使用效率，往往将培养基集中在一个较大的容器中放入高压灭菌锅灭菌。这样灭菌后的培养基不适于直接用来接种，需要分装到较小的培养容器中。因为空气中散布着许多微生物，所以分装最好在超净工作台内的酒精灯旁完成。倒平板水平放置，凝固后倒置？在分装时，应特别注意不要让培养基黏附在三角瓶口、试管口、培养皿内壁上，以免在培养过程中非目标微生物从瓶口沿器皿内壁上的培养基向内生长而污染，分装培养基时可用玻璃漏斗。如果培养基中有葡萄糖，为防止葡萄糖_______，要在_______g/cm2______℃灭菌______min。或者采用孔径最小的G6玻璃砂漏斗过滤除菌。漏斗使用前也要在121℃下用纸包好进行高压蒸汽灭菌。玻璃砂漏斗用后需用1mol/L盐酸浸泡，抽滤去酸，再用________洗至洗出液呈中性，干燥后保存。有些不能加热灭菌的化合物，如尿素(加热会分解)只能用过滤灭菌法除菌。焦化50011230蒸馏水采用抽滤方式，增加除菌速率过滤灭菌法G6玻璃砂漏斗将目标微生物转移到培养基的过程称为接种，接种使用涂布器或接种环。用接种环接种时，先将接种环在明火上灼烧使得微生物在高温中炭化，冷却后然后蘸取带菌的培养物，接种到新的培养基中。在使用涂布器接种时，应将涂布器浸在75%酒精中，使用前灼烧去除残留的少量酒精、冷却后用于涂布。

灼烧灭菌涂布器接种环瓶口或试管口时非目标微生物进入培养体系造成污染的通道。所以在接种时，打开塞子后和塞上塞子前都要将瓶口或试管口进行灼烧灭菌，防止受杂菌污染。接种时要靠近酒精灯的火焰，利用燃烧产生的气流减少空气中微生物落入培养基的可能性。2.培养基用什么方法灭菌？1.实验器具用什么方法灭菌？高压蒸汽灭菌法、G6玻璃砂漏斗过滤灭菌法高压蒸汽灭菌法(主要)、灼烧灭菌法总

结：3.实验结束后如何处理实验的废弃物、器皿？废弃物经过高压蒸汽灭菌法灭菌后丢弃，器皿经高压灭菌、洗涤烘干后保存①

消毒：采用较温和的物理、化学方法仅杀死物体表面或内部一部分不需要

的微生物