1.2.1微生物的基本培养技术课件高二下学期生物人教版选择性必修3

食用自制酸奶导致肠胃不适屡见不鲜葡萄酒、酸菜等变质2.怎么才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？1.失败的原因是什么？主要原因是在制作过程中有杂菌大量繁殖①制作工具和原料进行消毒灭菌②接种纯的单一菌种③控制发酵条件（如制作泡菜时创造无氧环境），避免杂菌繁殖(1）提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件(2）确保其它微生物无法混入(3)并将需要的微生物分离出来培养基无菌技术研究和应用微生物的前提（发酵工程的重要基础）是：

、

。防止杂菌污染获得纯净的微生物培养物实验室培养微生物基本要求：纯化培养一微生物的基本培养技术1.概述培养基的配置方法。2.概述微生物纯培养的基本操作要求。3.进行酵母菌的纯培养。第2节微生物的基本培养技术及应用（一）培养基的配置3.类型：1.概念：一微生物的基本培养技术2.作用：人们按照微生物对

的不同需求，配制出供其

的营养基质。营养物质生长繁殖①培养、分离、鉴定、保存微生物；②积累其代谢物。讲菌落单个或少数同种微生物固体培养基上大量繁殖肉眼可见的子细胞群体微生物结构简单、形体微小，眼睛看不到，若想得到纯净的微生物，就必须对其进行

。分离和培养知识补充：1.特征：2.功能：形状、大小、颜色、光泽度、透明度等。菌落是鉴定菌种的重要依据。一个菌落是一个种群还是一个群落？青霉菌4.培养基的营养组成：（一）培养基的配置无机碳源：②碳源（提供碳元素）③氮源（提供氮元素）氮是微生物合成蛋白质、核酸等物质的元素有机碳源：糖类、脂质、蛋白质、牛肉膏、蛋白胨、石油等CO2、CO32-、HCO3-等异养微生物有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、尿素CO(NH2)2、氨基酸等无机氮源：NH4＋、NO3-、N2、NH3等功能：①调节PH;功能：a.良好的溶剂；a.构成细胞结构物质和一些代谢产物;

b.有机碳既是碳源又是能源物质（1）基本成分：水、碳源、氮源、无机盐自养微生物①水④无机盐功能：②维持渗透压b.维持生物大分子结构的稳定（结合水）功能：牛肉膏蛋白胨一微生物的基本培养技术④培养厌氧微生物时，需要提供

的条件。①培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加

；②培养霉菌时，需要将培养基调至

；③培养细菌时，需要将培养基调至

；维生素酸性中性或弱碱性无氧主要指生长因子：维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等思考：所有微生物是否都可以用培养基进行培养?否。病毒是没有细胞结构的微生物,必须在活细胞内寄生

并以复制的方式增殖,因此不能用培养基进行培养。4.培养基的营养组成：（一）培养基的配置（2）特殊需求：对pH、特殊营养物质以及O2的需求一、微生物的基本培养技术3.含有C、H、O、N的有机物可作为

微生物的碳源、氮源、能源微生物碳源氮源能源蓝细菌硝化细菌根瘤菌大肠杆菌CO2NH4＋、NO3-等光能CO2NH3NH3氧化的化学能糖类等有机物N2有机物中的化学能糖类、蛋白质等有机物蛋白质、NH4＋、NO3-等有机物中的化学能1.自养型微生物与异养型微生物培养基的主要差别在于

2.无机氮源不但能给有些自养型微生物提供

，也能作为

碳源氮源能源物质异养型光能自养化能自养异养、固氮菌异养4.同一种物质不能既做碳源又做氮源（）×检1.请根据微生物的代谢类型，完成相关内容的填写。超净工作台微生物接种操作时为什么要“全副武装”在专门的设备内进行？获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。（1）防止培养物被杂菌污染；（2）防止微生物感染实验操作者。1.类型①消毒:使用较温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部的一部分微生物②灭菌:使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子2.对象芽孢是某些细菌在营养条件缺乏时，细胞内形成的含水量低、抗逆性强的休眠体；孢子是细菌、真菌等产生的无性生殖细胞(是繁殖体)，能直接发育成新个体。①对实验操作的空间、操作者的

衣着和手，进行

。②将用于微生物培养的器皿、接种

用具和培养基等器具进行

。培养皿、灭菌桶清洁和消毒灭菌【注意事项】p10最后一段①实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品

②为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在：

超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行相接触（二）无菌技术一微生物的基本培养技术（二）无菌技术类型适用范围操作方法消毒灭菌煮沸消毒家庭餐具等生活用品100℃煮沸5～6min巴氏消毒牛奶等不耐高温的液体62～65℃煮30min或80-90℃煮30s-1min化学药剂生物活体（皮肤、伤口）、水源等擦拭等,如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源紫外线紫外线照射30min灼烧灭菌接种的金属工具、接种时用的试管口或瓶口等直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧干热灭菌耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等物品放入干热灭菌箱,160～170℃加热2～3h湿热灭菌培养基、部分塑料制品及多种器材高压蒸汽灭菌锅内,100kPa,温度121℃,15～30min接种室、接种箱，超净工作台阅读教材P9资料卡（迅速彻底）3.常用的消毒和灭菌方法（效果最好）一微生物的基本培养技术检不耐高温的液体（牛奶）：接种室、超净工作台：培养皿、吸管等玻璃器皿：接种环等金属工具：实验操作者的双手：培养基：家庭餐具等生活用品消毒：1.说出以下器具、物品或对象与所采用的消毒或灭菌方法。煮沸消毒法巴氏消毒法化学药剂消毒紫外线消毒灼烧灭菌干热灭菌高压蒸汽灭菌酒精消毒液中酒精浓度对效果的影响：75%的酒精杀菌效果最好浓度过高，菌体表面蛋白质变性过快而凝固成一层保护膜，酒精不能渗入其中浓度过低，杀菌能力减弱涂布器探究.实践培养物：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体。纯培养物：由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。微生物群分散或稀释单个个体单个菌落（纯培养物）繁殖该培养物是纯培养物吗？获得纯培养物的前提是什么？（三）微生物的纯培养【原理】一微生物的基本培养技术探究.实践（三）微生物的纯培养(以酵母菌的纯培养为例)【操作步骤】1.制备培养基2.接种和分离酵母菌3.培养酵母菌恒温培养箱马铃薯琼脂培养基一微生物的基本培养技术探究.实践（三）微生物的纯培养(以酵母菌的纯培养为例)【操作步骤】马铃薯加热煮沸至软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖（也可用蔗糖代替）15~20g琼脂，用蒸馏水定容至1000mL。①配制培养基②灭菌1.制备培养基将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15~30min。将5~8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160~170℃灭菌2h。培养基：高压蒸汽灭菌培养皿：干热灭菌（保持干燥）如果要调节培养基的pH，应该在灭菌前还是灭菌后？灭菌前调pH在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞，在取出培养基锥形瓶时起到隔绝空气中杂菌污染的作用。一微生物的基本培养技术探究.实践（三）微生物的纯培养(以酵母菌的纯培养为例)【操作步骤】1.制备培养基③倒平板待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰旁附近倒平板。目的：灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。不能完全打开，以免杂菌污染培养基目的：既可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染；又可避免培养基中水分过快散失。一微生物的基本培养技术探究.实践（三）微生物的纯培养(以酵母菌的纯培养为例)【操作步骤】2.接种和分离酵母菌分散或稀释微生物群单个细胞单菌落繁殖用接种环连续划线、逐步稀释（平板划线法）①灼烧接种环，直至接种环金属丝烧红⑥将皿盖打开一条缝隙，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划3-5条平行线，盖上皿盖。⑤试管口通过火焰，并塞上棉塞②在火焰旁冷却接种环，拔出酵母菌培养液试管的棉塞③试管口通过火焰④在火焰附近用接种环蘸取一环菌液⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线

的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连。一微生物的基本培养技术探究.实践平板划线法的接种步骤：分区划线法12345第1次划线灼烧接种环灭菌第2次划线灼烧接种环灭菌第3次划线接种前灼烧接种环灭菌灼烧接种环灭菌①接种环只蘸

次菌液，但要在培养基不同位置连续划线多次；②划线首尾

相接；③每次划线前灼烧接种环进行灭菌；④划线操作结束后，仍需灼烧接种环，培养皿倒置培养。【平板划线法注意事项】接种环共需灼烧几次？一不能思考.讨论1.不同时期灼烧接种环的目的是什么？灼烧时期目的取菌种前每次划线前接种结束后杀死接种环上原有微生物。杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。2.在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线的原因？3.在作第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线的原因？使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，以便获得单个菌落。避免接种环温度太高，杀死菌种。探究.实践（三）微生物的纯培养(以酵母菌的纯培养为例)【操作步骤】3.培养酵母菌接种后的平板未接种的平板完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将

的平板和一个

的平板倒置，放入

左右的恒温培养箱中培养

h。培养皿底部用记号笔标记恒温培养箱28℃24-48接种后未接种警示：在实验室中，切记不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防被微生物感染。使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境。作为空白对照组一微生物的基本培养技术探究.实践3.在接种酵母菌的培养基上，你是否观察到了单菌落？这些菌落的颜色、形状和大小是否一致？如果观察到了不同形态的菌落，可能是由哪些原因引起的吗？

不同形态的菌落，可能是接种的菌种不纯或无菌操作不规范等原因引起的。2.如何记录实验结果？

可在培养12h和24h后，观察菌落的大小、形状、颜色、光泽度等1.在未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有，说明什么？在未接种的培养基表面应该没有菌落生长，如果有，说明培养基被杂菌污染或灭菌不彻底。【结果分析与评价】（三）微生物的纯培养(以酵母菌的纯培养为例)一微生物的基本培养技术思维训练有一段时间，水果“酵素”风靡各地。水果“酵素”制作的大致过程是：将洗净、切成块状的水果放入洁净的容器，再加入糖和水,密封，置于阴凉处发酵一至两周。有人说，吃水果“酵素”可以美容、减肥、促进消化和提高免疫力。请评估这一论点是否可信。追问以下问题可以帮助你分析。评估论点的可信程度“酵素”就是“酶”的另一种说法。其制作是利用微生物进行无氧呼吸的原理，进行像制作泡菜一样的发酵。其中可能有糖类(包括一些简单的糖和膳食纤维等)、蛋白质(包括多种酶)、有机酸等成分。不存在它独有的、特殊的营养物质。其中甚至可能含有微生物发酵产生的有毒物质，食用后可能会危害人体健康。因此，此论点值得怀疑！水果“酵素”是什么？其制作原理是什么？其中可能含有哪些成分？其是否含有人们无法从其他食品中获取但又是维护健康所必需的成分？其中的所有成分都有益于人体健康吗？检练习与应用p14一、概念检测1.判断下列相关表述是否正确。（1）培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利。（）（2）消毒和灭菌的杀菌程度存在差异。（）（3）微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物。（）×√×①干制：降低食品的含水量；②腌制：食盐、糖等制造高渗环境，抑制微生物的生长和繁殖；③低温储存：降低微生物的代谢速率从而抑制微生物的生长和繁殖。2.日常生活中保存食品的方法有哪些？这些方法是如何阻止或抑制微生物生长的？检练习与应用p14（1）这个实验中需要进行灭菌处理的材料用具有________________。（2）“将指尖在培养基上轻轻按一下”相当于哪一步操作？（3）洗手后我们就能进行无菌操作了吗？操作时，