微生物的培养技术及应用（第2课时）课件2025-2026学年高二下学期生物人教版选择性必修3

第1章发酵工程1.2

微生物的培养技术及应用

第2课时

一、教材分析本章节内容涵盖微生物的培养技术及其应用。教学内容主要包括：无菌技术、微生物培养基的制备、灭菌和消毒、微生物的分离和纯化、微生物的计数和显微镜观察等。二、教学目标1.学生能够理解无菌技术的概念，并能够运用无菌技术进行实验操作。例如，学生在实验中能够正确使用酒精灯进行火焰灭菌，保证实验的准确性和安全性。2.学生能够掌握微生物培养基的制备方法，并能够根据实验需求选择合适的培养基。例如，学生在实验中能够根据不同微生物的生长需求，选择合适的培养基，并能够正确配制培养基。3.学生能够了解灭菌和消毒的区别，并能够正确选择和使用灭菌和消毒剂。

三、教学重难点教学重点：微生物培养基的制备和选择教学难点微生物培养的技术操作、微生物培养的实验设计、微生物培养的实验结果分析和解释微生物的纯培养任务：请同学们自主学习教材P11-13页，思考完成以下问题：

1.相关概念：培养物？纯培养物？纯培养？（P11）2.酵母菌的纯培养的基本步骤？（注意倒平板和接种的具体操作）3.什么是菌落？单菌落？（P12）4.获得单菌落的方法？（P12）纯培养物：纯培养：培养物：将接种于培养基内，在合适条件下形成的含有特定种类微生物的群体称为培养物。有单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。获得纯培养物的过程就是纯培养。配置培养基灭菌倒平板接种和分离培养操作步骤：三、微生物的纯培养①概念：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成

肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。②特征：③功能：鉴定菌种的重要依据大小、形状、隆起程度、颜色等。平板划线法、稀释涂布平板法(2)菌落：(1)原理：微生物群分散或稀释单个细胞单个菌落繁殖(3)获得单菌落的方法：【探究和实践】酵母菌的纯培养三、微生物的纯培养念珠菌显色培养基大肠杆菌培养基酵母菌培养基金黄色葡萄球菌和枯草杆菌培养基去皮切块加水(1000mL)加热煮沸软烂马铃薯纱布过滤加琼脂（15～20g）酵母菌培养基加水定容(1000mL)称取马铃薯(200g)马铃薯块滤液加葡萄糖/蔗糖（20g）

调pH①

②

2.方法步骤：三、微生物的纯培养【探究和实践】酵母菌的纯培养配置培养基培养基——高压蒸汽灭菌注意：先调pH再灭菌三、微生物的纯培养【探究和实践】酵母菌的纯培养灭菌2.方法步骤：配置培养基

将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15-30min。

将5-8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170℃灭菌2h。三、微生物的纯培养【探究和实践】酵母菌的纯培养灭菌2.方法步骤：配置培养基倒平板3.用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基（10-20mL）倒入培养皿，立即盖上皿盖1.拔出锥形瓶的棉塞2.将瓶口迅速通过火焰4.等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置倒平板注意事项：①温度：50℃左右②操作：在酒精灯火焰附近③冷凝后平板倒置总结操作注意事项1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你

用什么办法来估计培养基的温度？可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉温度下降到刚刚不烫手即可。2.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的

部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？最好不要用这个平板培养微生物。

防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，防止培养基表面的水分过快挥发，皿盖上水珠落入培养基造成污染。三、微生物的纯培养观看视频归纳对接种环灭菌的注意事项及划线的注意事项。Ⅱ.接种和分离酵母菌平板划线法是通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养可以分离得到单菌落。三、微生物的纯培养(2)“平板划线”实验操作7.灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。1.将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。2.在火焰旁冷却接种环，并拔出装有酵母菌培养液的试管的棉塞。3.将试管口通过火焰。4.将已冷却的接种环伸入菌液中，蘸取一环菌液。5.将试管口通过火焰，并塞上棉塞。6.左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基！平板划线法注意事项:①接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次.②划线首尾不能相接③每次划线前接种环进行灭菌④划线后,培养皿倒置培养总结平板划线法的操作注意事项第1区划线接种环灭菌第2区划线接种环灭菌第3区划线接种环灭菌接种环灭菌45123思考：若完成图示操作，共做了五次划线，接种环灼烧灭菌了几次？分区划线法（最常用）三、微生物的纯培养1.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？2.在做第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？答：以免接种环温度太高，杀死菌种。答：线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。思考讨论灼烧的顺序目的第一次灼烧每次划线之前灼烧划线结束灼烧杀死接种环上原有的微生物，避免杂菌污染杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使每次划线的菌种来自上次划线末端杀死残留菌种，避免污染环境、感染操作者3.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？思考讨论Ⅲ.培养酵母菌思考:为什么要同时放入未接种的平板？作对照，通过观察未接种平板是否有菌落存在以确定培养基是否被污染或灭菌是否彻底。完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右(培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异)的恒温培养箱中培养24-48h。三、微生物的纯培养1.分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种(甲)、培养结果(乙)如下图所示。下列有关叙述错误的是(

)A.甲中a区域为划线的起始位置B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落C.接种过程中至少需要对接种环灼烧5次D.接种后将培养皿倒置并在适宜温度下培养A练一练2.根据倒平板的方法及注意事项回答下列问题：（1）培养基灭菌后，需要冷却到________左右时，才能用来倒平板。（2）请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：_______________。（3）甲、乙、丙中的灭菌方法是__________。（4）丁中的操作需要等待_______________才能进行。为什么要将平板倒置？（5）整个过程为何要在酒精灯旁进行？（6）如何检测培养基制备是否成功？50℃丙→乙→甲→丁灼烧灭菌

平板冷却凝固

37℃倒置培养24～48h，观察是否有微生物生长使培养基表面的水分更好地挥发，防止皿盖上水珠落入培养基造成污染酒精灯旁空气中杂菌少课堂小结练一练P14【练习与应用】一、概念检测

1.微生物的纯培养既需要适宜的培养基，又要防止杂菌污染。判断下列相关表述是否正确。

（1）培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利。（）（2）消毒和灭菌的杀菌程度存在差异。（）（3）微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物。（）×√×

2.日常生活中保存食品的方法有哪些？这些方法是如何阻止或抑制微生物生长的？干制——降低食品的水分含量；腌制——通过食盐、糖等制造高渗环境，从而抑制微生物的生长和繁殖；低温储存——通过降低微生物的代谢速率来抑制微生物的生长和繁殖。二、拓展应用

1.某同学将5个手指尖在贴有“洗手前”标签的培养基上轻轻按一下。然后用肥皂将该手洗干净，再将5个指尖在贴有“洗手后”标签的同种培养基上轻轻按一下。将这两个培养皿放入37℃恒温培养箱中培养24h后，发现贴有“洗手后”标签的培养皿中菌落较少。请分析回答下列问题。（1）这个实验中需要进行灭菌处理的材料用具有________________。（2）“将指尖在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养中的哪一步操作？（3）从实验结果来看，洗手后我们就能进行无菌操作了吗？操作时，我们可以采用什么方法来避免手上微生物的污染？培养皿和培养基接种洗手后手上还有一些微生物，不能直接进行无菌操作。可以通过用酒精擦拭双手，或戴消过毒的手套等方法来避免手上微生物的污染。

2.某生物兴趣小组将从葡萄皮上成功分离来的野生酵母菌分别接种于3个盛有等量同种液体培养基的锥形瓶中，并放置在摇床上培养，摇床转速分别为210r/min，