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文档简介

第一章

血液一般检验第一节

白细胞检验一、白细胞计数二、白细胞分类计数三、白细胞形态检查

四、嗜酸性粒细胞计数五、红斑狼疮细胞检查概述嗜酸粒细胞(E)

1.白细胞的种类(三类五种):白细胞(WBC)粒细胞淋巴细胞(L)单核细胞(M)中性粒细胞(N)嗜碱粒细胞(B)中性分叶核粒细胞(Nsg)中性杆状核粒细胞(Nst)概述2.白细胞的功能1.中性粒细胞:具有较强的运动能力和吞噬活性。胞内酶有复杂的杀菌系统。——抗感染2.嗜酸粒细胞:可作变形运动,吞抗原抗体复合物,灭活组织胺减轻过敏反应。——抗过敏3.嗜碱粒细胞:与IgE具有较强的结合力,脱粒释放组胺导致速发性变态反应。——致敏4.淋巴细胞:参与体液免疫和细胞免疫。5.单核细胞:有强大的吞噬功能,传递抗原信息。概述3.白细胞的来源与分布概述分裂池成熟池贮备池边缘池循环池原始、早、中幼粒晚幼粒、杆状粒杆状粒、分叶粒骨髓外周血3.白细胞的来源与分布释放掌握一、白细胞计数

白细胞计数是指测定单位体积外周血中各种白细胞的总数。白细胞计数结果仅反映循环池中的细胞数量。白细胞显微镜计数法是将全血用稀酸溶液稀释一定倍数,使红细胞破坏后,充入改良牛鲍(Neubauer)计数板内,在普通光学显微镜下计数一定范围内的白细胞数,经换算求出每升血液内的白细胞总数。1.原理(一)显微镜计数法xx个/L一、白细胞计数成分

作用冰乙酸(2g)

破坏红细胞,且使白细胞核固定清晰蒸馏水(100ml)亚甲蓝或结晶紫

使白细胞核略着色,便于识别2.白细胞稀释液及其作用(2%冰乙酸溶液)一、白细胞计数大方格中方格小方格每个大方格体积=1X1x0.1=0.1mm3=0.1μL复习一、白细胞计数二、方法数左不数右

数上不数下计数:低倍镜下计算4个大方格的白细胞(N)计算:白细胞数/L=N/4×

10×106×200.1μL—1μL—1L稀释倍数

似成熟蚕卵,中央核深染,胞质色淡。

0.1μl/大方格要点:1.稀释倍数=(溶质+溶剂)/溶质2.换算为统一单位掌握一、白细胞计数(三)方法学评价白细胞计数的方法学评价方法评价显微镜计数法设备简单、费用低廉;费时、重复性较差;适用于基层医疗单位和分散检测血细胞分析仪法操作简便,效率高,重复性好;仪器较贵,准确性取决于仪器的性能及工作状态;适合于大批量的标本集中检测一、白细胞计数

取血40ul加入稀释液0.36ml,镜下计数了4个大格共有白细胞160个,求其白细胞计数结果?答案:稀释倍数=(360+40)/40WBC=160/4×10×106

×10

=10=4×109/L练习题(2)固有误差(工具仪器上的缺陷)①器材、试剂不合要求②采血与取血不当③稀释倍数不准④充池不当⑤细胞计数不准确质量保证(1)技术(偶然)误差由于操作不规范和/或技术不熟练所造成的误差。一、白细胞计数2.计数误差:1.采血时间:方便结果对比

最好固定采血时间一、白细胞计数3.有核红细胞的影响:需要校正X:校正前白细胞数Y:在白细胞分类计数时,计数100个白细胞的同时计数到的有核红细胞数一、白细胞计数

校正前白细胞数为12×109/L,在作白细胞分类计数时计数100个白细胞的同时数得的有核红细胞数为40个,则校正后白细胞数/L=12×109/L×=8.6×109/L一、白细胞计数以血涂片中所见白细胞的多少粗略核对白细胞计数结果有无大的误差。血涂片白细胞/HPWBC(×109/L)2~44~74~67~96~1010~1210~1213~184.经验控制

表血涂片白细胞密度与白细胞总数的关系一、白细胞计数参考区间白细胞总数高于参考区间的上限称白细胞增多,低于参考区间的下限称白细胞减少。白细胞总数增多或减少主要受中性粒细胞数量的影响,其临床意义见白细胞分类计数。(五)临床意义(四)参考区间成人:(3.5~9.5)×109/L儿童:(5~12)×109/L6个月~2岁:(11~12)×109/L新生儿:(15~20)×109/L成人(旧):(4-10)×109/L掌握二、白细胞分类计数方法:

显微镜分类计数法血细胞分析仪分类计数法原理:显微镜分类计数主要是将染色好的血涂片在油镜下根据白细胞形态学特征逐个分别计数(一般计数100~200个白细胞),得出各种白细胞的相对比值或百分率,并注意观察其形态的变化。掌握二、白细胞分类计数1.简要操作

血涂片制备染色低倍镜下检查油镜下分类计数采血高倍镜下检查二、白细胞分类计数

最佳观察部位:

头体尾体尾交界体尾交界处

最佳观察部位:

二、白细胞分类计数2.报告方式(1)白细胞分类计数结果:以各种白细胞所占的比值或百分率表示或者根据白细胞总数计算出各种白细胞的绝对值报告。(2)幼稚或异常白细胞:发现幼稚或异常白细胞,应计算在白细胞分类比值或百分率中。(3)有核红细胞:血涂片中如见到有核红细胞,应逐个计数,但不列入白细胞总数之内,而是报告分类计数100个白细胞的同时见到的有核红细胞个数。(4)寄生虫:如发现疟原虫等应报告。(5)红细胞、血小板的形态:如有异常改变应报告。

二、白细胞分类计数3.质量保证(1)标本:不宜冷藏和保存过久(<4小时)(2)推片及染色(3)镜检部位:体尾交界处,注意镜检顺序,避免重复检查和漏检(”城垛样“)(4)镜检白细胞数量:正常情况油镜下计数100个(可先用高倍镜进行估算WBC数量,再决定计数的数)量)二、白细胞分类计数经染色后外周血中常见各种成熟白细胞形态如下:方法细胞大小,形态细胞核形态,染色质结构细胞质,颗粒性状掌握二、白细胞分类计数⑴胞体:10~15μm,圆形。⑵胞核:分2~5叶,以3叶核为主(40-50%)⑶核染色质:粗糙,深紫红色。⑷胞浆:粉红色,颗粒量多、细小、均匀、

紫红色。(一)外周血正常白细胞形态1.中性分叶核粒细胞参考区间50-70%二、白细胞分类计数二、白细胞分类计数⑴胞体:10~15μm,圆形。⑵胞核:弯曲呈杆状、带状、“S”或“E”形、腊肠样。⑶核染色质:粗糙,深紫红色。⑷胞浆:粉红色,颗粒量多、细小、均匀、紫红色。2.中性杆状核粒细胞参考区间1-5%二、白细胞分类计数二、白细胞分类计数标准:a.核径最窄处小于最宽处1/3为分叶核b.核径最窄处大于最宽处1/3为杆状核二、白细胞分类计数杆状核粒细胞的核形中性分叶核粒细胞的核形分叶核杆状核二、白细胞分类计数临床意义一、白细胞总数与中性粒细胞二者的临床意义基本一致(一)生理变化

1.年龄

2.日间变化安静松弛---低活动和进餐后---高午后高于清晨:一日之内最高和最低可相差一倍

3.运动、疼痛、和情绪的影响

4.妊娠和分娩循环池边缘池结论:白细胞计数波动在30%以下,在临床诊断上无意义,只有通过定时和反复观察才有意义。二、白细胞分类计数中性粒细胞病理性增高严重的组织损伤大量血细胞破坏

急性感染

急性大出血

恶性肿瘤

急性中毒

白血病、类白血病

(二)中性粒细胞病理性增高二、白细胞分类计数中性粒细胞病理性减少某些血液病:如再生障碍性贫血

某些感染:伤寒、副伤寒沙门菌、病毒

慢性理化损伤

自身免疫性疾病:如系统性红斑狼疮

脾功能亢进

(三)中性粒细胞病理性减少放射科---X光西药房---化学药物2013

剧烈运动后白细胞升高的原因分裂池细胞进入成熟池增多成熟池细胞进入储备池增多储备池细胞进入边缘池增多边缘池细胞进入循环池增多ABCD提交循环池细胞进入组织固有池增多E单选题1分2015

病毒感染时,白细胞分类计数哪项相对减少

单核细胞嗜碱性粒细胞中性粒细胞嗜酸性粒细胞ABCD提交淋巴细胞E单选题1分二、白细胞分类计数二、嗜酸性粒细胞(1)胞体:13~15μm,圆形。(2)胞核:多分为两叶。(3)核染色质:粗糙,深紫红色。(4)胞浆:着色不清,橘黄/红色颗粒、粗大、整齐排列、均匀充满胞质。参考区间0.5-5%二、白细胞分类计数中性粒细胞嗜酸性粒细胞对比:核形态细胞质,颗粒情况二、白细胞分类计数1.生理变化

白天较低,夜间较高,上午波动大,下午较恒定。2.病理变化(1)嗜酸性粒细胞增多:①超敏反应性疾病:如支气管哮喘、荨麻疹、过敏等。②寄生虫病:如蛔虫、钩虫等。③某些皮肤病:如银屑病、湿疹等。④某些血液病:如慢性粒细胞白血病。⑤某些恶性肿瘤,如霍奇金病。⑥某些传染病:如猩红热。⑦某些内分泌疾病,如脑垂体功能低下。二、嗜酸性粒细胞二、白细胞分类计数2.病理变化(2)嗜酸性粒细胞减少:①伤寒、副伤寒、大手术后。②长期使用肾上腺皮质激素。3.嗜酸性粒细胞计数的其它应用①观察急性传染病的预后。②观察大手术和烧伤病人的预后。③肾上腺皮质功能测定。二、嗜酸性粒细胞二、白细胞分类计数三、嗜碱性粒细胞(1)胞体:10~12μm,圆形。(2)胞核:因颗粒遮盖而胞核不清晰。(3)核染色质:粗糙,深紫红色。(4)胞浆:着色不清,紫黑色颗粒、量少、大小不均、排列杂乱、可盖于核上。参考区间0-1%二、白细胞分类计数(1)嗜碱性粒细胞增多①慢性粒细胞性白血病:常伴嗜碱性粒细胞增多,可达10%或更多。②嗜碱性粒细胞性白血病:嗜碱性粒细胞异常增多,可达20%以上,多为幼稚型。③过敏性疾病:溃疡性结肠炎、超敏反应等。④骨髓纤维化和某些转移癌。(2)嗜碱性粒细胞减少

多无临床意义。三、嗜碱性粒细胞二、白细胞分类计数对比:核形态细胞质,颗粒形状2015正常外周血粒细狍依据颗粒特点的不同分为早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞分叶核粒细胞、杆状核粒细胞中性粒细胞、单核细胞 ABCD提交单核细胞、淋巴细跑E单选题1分二、白细胞分类计数四、淋巴细胞⑴胞体:6~15μm,圆形或椭圆形。⑵胞核:圆形、椭圆形、肾形。⑶核染色质:深紫红色,粗糙成块,核外缘光滑。⑷胞浆:透明、淡蓝色、多无颗粒,大淋巴细胞可有少量粗大、不均匀紫红色颗粒。大淋巴细胞小淋巴细胞参考区间20-40%二、白细胞分类计数(1)淋巴细胞病理性增多①绝对增多:某些病毒或细菌所致的传染病,如风疹、流行性腮腺炎、传单等;某些慢性感染,如结核病恢复期也可见淋巴细胞增多,但白细胞总数多正常;急、慢性淋巴细胞性白血病淋巴细胞增多明显,且可导致白细胞总数增高。②相对增多:再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症等淋巴细胞百分率相对增高。四、淋巴细胞二、白细胞分类计数(2)淋巴细胞减少淋巴细胞绝对减少主要见于免疫缺陷病(HIV)、流行性感冒恢复期,药物治疗(糖皮质激素)及自身免疫性疾病。在急性化脓性感染时由于中性粒细胞明显增高可导致淋巴细胞相对减少。四、淋巴细胞二、白细胞分类计数五.单核细胞⑴胞体:12~20μm,圆形、椭圆形或不规则形。⑵胞核:肾形、山字形、马蹄形、扭曲折叠不规则形。⑶核染色质:疏松网状,淡紫红色,有膨胀和立体起伏感。⑷胞浆:半透明、灰蓝色或灰红色。颗粒细小、尘土样紫红色。参考区间3-8%二、白细胞分类计数鉴别难点掌握二、白细胞分类计数掌握二、白细胞分类计数二、白细胞分类计数(1)单核细胞增多正常儿童单核细胞较成人稍高

病理性增多见于:①某些感染:如亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热病、急性感染的恢复期、活动性肺结核等。②某些血液病:单核细胞性白血病、粒缺恢复期、恶性组织细胞病、淋巴瘤及骨髓增生异常综合征(MDS)等。(2)单核细胞减少意义不大。五、单核细胞二、白细胞分类计数嗜碱性粒细胞嗜酸性粒细胞中性分叶核粒细胞中性杆状核粒细胞淋巴细胞单核细胞123456三、白细胞形态嗜碱性粒细胞嗜酸性粒细胞中性分叶核粒细胞中性杆状核粒细胞淋巴细胞单核细胞123456中性粒细胞的核形标志着它的发育阶段。正常以3~4叶为主。病理情况下,中性粒细胞的核象可发生变化,即出现核左移或核右移。1.中性粒细胞的核象变化---与细胞的成熟程度相关(二)外周血异常白细胞形态10:14:42三、白细胞形态三、白细胞形态轻度核左移:仅杆状核粒细胞>6%中度核左移:杆状核粒细胞>10%伴少数晚幼粒、中幼粒细胞重度核左移:杆状核粒细胞>25%,出现更幼稚的粒细胞(1)核左移?外周血中杆状核粒细胞增多并出现晚幼粒、中幼粒甚至早幼粒细胞时称为核左移。核左移常伴中毒颗粒、空泡、核变性等毒性变化。最常见于急性化脓性感染,急性中毒、急性溶血。再生性核左移:WBC↑退行性核左移:WBC→或↓三、白细胞形态(2)核右移?核右移常伴有白细胞总数的减少,属造血功能衰退的表现。主要见于营养性巨幼细胞性贫血及恶性贫血、炎症的恢复期。疾病进展期突然出现核右移则是预后不良的表现。外周血中5叶核及5叶核以上的中性粒细胞>3%。三、白细胞形态(2)核右移?巨多分叶核中性粒细胞外周血中5叶核及5叶核以上的中性粒细胞>3%。三、白细胞形态2013

中性粒细胞核左移是指外周血中性粒细胞核分5叶以上者超过3%中性粒细胞核分3叶以上者超过5%血涂片中粒细胞胞质内出现中毒颗粒中性粒细胞分叶核与杆状核比值大于1:13ABCD提交杆状核粒细胞増多或/和出现幼稚粒细胞E单选题1分2013疾病进行期突然出现核右移,常提示患者恢复期预后良好预后不良机体抵抗力强ABCD提交骨髄造血机能旺盛E单选题1分在严重传染病、各种化脓性感染、败血症、恶性肿瘤、中毒、大面积烧伤等病理情况下,中性粒细胞可发生下列形态改变

大小不均中毒颗粒空泡杜勒体

核变性

2.中性粒细胞的毒性变化10:14:42三、白细胞形态即中性粒细胞体积大小悬殊。可能是在内毒素等因素作用下骨髓内幼稚中性粒细胞不规则分裂的化脓性感染。(1)大小不均三、白细胞形态中性粒细胞胞质中出现的粗大、大小不等、分布不均匀的紫黑色或深紫褐色颗粒,称中毒颗粒。可能因特殊颗粒生成受阻或发生颗粒变性所致。常见于严重化脓性感染及大面积烧伤等。(2)中毒颗粒三、白细胞形态(2)中毒颗粒多颗粒中性粒细胞少颗粒中性粒细胞三、白细胞形态

中性粒细胞胞质内出现一个或数个空泡。一般认为空泡是细胞受损后胞质发生脂肪变性或颗粒缺失的结果。最常见于严重感染,特别是败血症时。(3)空泡变性空泡

三、白细胞形态

是中性粒细胞胞质毒性变化而保留的局部嗜碱性区域。呈圆形、梨形或云雾状,天蓝色或灰蓝色,直径1~2μm,

是胞质局部不成熟的表现。(4)杜勒体杜勒体三、白细胞形态(5)退行性变核肿胀核固缩核碎裂常见于细胞衰老后,严重感染时该类细胞增多。三、白细胞形态(5)退行性变三、白细胞形态中性粒细胞退行性变中性粒细胞其他异常形态三、白细胞形态分叶过多的中性粒细胞常见于巨幼细胞贫血或应用抗代谢药物治疗后。

分叶过多的中性粒细胞:中性粒细胞核分叶超过5叶以上棒状小体(Auer小体)三、白细胞形态中性粒细胞其他异常形态白细胞胞质中出现的紫红色细杆状物质,1个或数个,长约1~6um,称为棒状小体,出现数个棒状小体,呈束状排列(柴束状)的白细胞称为faggot细胞(柴捆细胞)棒状小体柴捆细胞急性粒细胞白血病(多见)急性单核细胞白血病(少见)急性淋巴细胞白血病则无三、白细胞形态Pelger-Hüet畸形

Chediak-Higashi畸形

三、白细胞形态中性粒细胞其他异常形态在病毒或过敏原等因素刺激下,外周血淋巴细胞增生并发生形态上的改变,称异型淋巴细胞。淋巴细胞的形态异常Ⅰ型(空泡型)

Ⅱ型(不规则型)Ⅲ型(幼稚型)(1)异型淋巴细胞(反应性淋巴细胞)三、白细胞形态

异淋正常人血片中可偶见此种细胞。一般病毒感染异型淋巴细胞<5%,而传染性单核细胞增多症时异型淋巴细胞常>10%。10:14:42三、白细胞形态即在淋巴细胞的主核旁边另有一个游离的小核。常见于接受较大剂量的电离辐射之后或其他理化因子、抗癌药物等对细胞造成损伤时,常作为致畸、致突变的客观指标之一。(2)卫星核淋巴细胞卫星核三、白细胞形态提问中毒颗粒三、白细胞形态提问空泡变性三、白细胞形态10:14:42提问杜勒体三、白细胞形态提问卫星核淋巴细胞三、白细胞形态四、嗜酸性粒细胞计数---显微镜计数(一)原理用嗜酸性粒细胞稀释液,将血液稀释一定倍数,并破坏红细胞和大部分其他白细胞,并使嗜酸性粒细胞着色,滴入计数池,计数一定范围内嗜酸性粒细胞数,换算成每升血中嗜酸性粒细胞数。四、嗜酸性粒细胞计数(二)试剂

稀释液试剂主要成分及作用:(1)保护嗜酸性粒细胞成分:如丙酮、乙醇(2)促进红细胞和中性粒细胞破坏成分:如碳酸钾、草酸铵或低渗状态。

(3)使嗜酸性粒细胞着色成分:

如伊红、溴甲酚紫、固绿。此外,稀释液中的甘油可防止乙醇挥发,抗凝剂可防止血液凝固。四、嗜酸性粒细胞计数2018

嗜酸性粒细胞计数稀释液中起着色剂作用的是枸橼酸钠乙醇丙酮伊红ABCD提交EDTAE单选题1分1.在小试管中加稀释液0.38ml2.将20ul血标本加入管内,溶解红细胞,然后滴入计数池。3.静置3-5min,低倍镜计数两个计数池中10个大方格内嗜酸性粒细胞数。嗜酸性粒细胞/L=10个大方格内嗜酸性粒细胞数(N)×20×106=N×稀释倍数×换算单位(1ul-1L)(106)(三)操作(四)计算提问四、嗜酸性粒细胞计数✓✓✓✓✓2019

手工法嗜酸性粒细胞直接计数是计数两个计数池中嗜酸性粒细胞数,共计大方格()个8101416ABCD提交18E单选题1分1.住院病人作嗜酸性粒细胞计数,应固定时间,以免受日间生理变化影响。2.若出现嗜酸粒细胞被破坏,可适当增加乙醇的剂量。3.在血液稀释混匀中,不要用力振荡,以免嗜酸粒细胞破碎。4.注意与中性粒细胞区别。中性粒细胞颗粒一般不受色或受色极浅,且其颗粒较小。5.本试验应在30min内计数完毕,否则嗜酸粒细胞逐渐破坏,使结果偏低。(五)注意事项---质量保证四、嗜酸性粒细胞计数(六)方法学评价(手工法、仪器法)(七)参考范围0.05×109/L~0.5×109/L(八)临床意义1.生理变化劳动、寒冷、精神刺激等使嗜酸性粒细胞降低,白天低,夜晚高,上午波动较大,下午比较恒定。2.病理变化增多:过敏性疾病、寄生虫病、某些传染病、皮肤病、某些恶性肿瘤、某些血液病减少:长期使用肾上腺皮质激素,某些传染病早期。四、嗜酸性粒细胞计数五、红斑性狼疮细胞检查是一种原因不明,累及多个系统和器官的自身免疫性疾病。多见于青壮年女性,是自身免疫性结缔组织病。临床表现复杂,缺乏特异性诊断,LE细胞检查成为一种重要辅助诊断。(一)概述系统性红斑狼疮(SLE)(二)红斑狼疮(LE)细胞的形成

系统性红斑狼疮等自身免疫病患者血液中含抗细胞核抗体(IgG),可使白细胞核DNA解聚、核溶解破坏,形成均匀体。均匀体吸引吞噬细胞形成花形细胞簇,或游离被中性粒细胞吞噬成红斑狼细胞(LE细胞)。五、红斑性狼疮细胞检查1、LE细胞的形成条件(1)患者血清存在LE因子(IgG型抗核蛋白抗体)(2)受累或退变的细胞核(3)具有吞噬能力的细胞五、红斑性狼疮细胞检查(1)前期白细胞在LE因子作用下肿胀,溶解成前期LE细胞,胞质崩解,核成云雾状游离均匀体。(2)花簇期有吞噬功能的中性粒细胞围绕于均匀体,形成花形细胞簇。(3)吞噬期中性粒细胞完全吞噬均匀体。2、LE细胞的形态特征游离均匀体花形细胞簇LE细胞五、红斑性狼疮细胞检查五、红斑性狼疮细胞检查

1.去纤维蛋白法

2.血块法(常用)(三)LE细胞的检查方法及步骤(略)五、红斑性狼疮细胞检查(五)临床意义1.参考区间:阴性3.LE细胞特异性不高,如类风湿、硬皮病以及活动性肝炎等,亦可发现LE细胞。因此.发现LE细胞尚需结合临床表现及抗核抗体检查才能确诊。2.系统性红斑狼疮患者,LE细胞阳性率一般为70%~90%。通常在活动期容易找到,在缓解期不易找到,使用激素治疗后常消失,病情严重者,在骨髓、血液、胸腹水的直接涂片中,亦可找到LE细胞。目前对SLE的诊断多采用检测自身抗体方法,如检查ANA,ds-DNA,ss-DNA等。五、红斑性狼疮细胞检查二、白细胞分类计数经染色后外周血中常见各种成熟白细胞形态如下:方法细胞大小,形态细胞核形态,染色质结构细胞质,颗粒性状掌握二、白细胞分类计数⑴胞体:10~15μm,圆形。⑵胞核:分2~5叶,以3叶核为主(40-50%)⑶核染色质:粗糙,深紫红色。⑷胞浆:粉红色,颗粒量多、细小、均匀、

紫红色。(一)外周血正常白细胞形态1.中性分叶核粒细胞参考区间50-70%二、白细胞分类计数二、白细胞分类计数⑴胞体:10~15μm,圆形。⑵胞核:弯曲呈杆状、带状、“S”或“E”形、腊肠样。⑶核染色质:粗糙,深紫红色。⑷胞浆:粉红色,颗粒量多、细小、均匀、紫红色。2.中性杆状核粒细胞参考区间1-5%二、白细胞分类计数二、白细胞分类计数标准:a.核径最窄处小于最宽处1/3为分叶核b.核径最窄处大于最宽处1/3为杆状核二、白细胞分类计数杆状核粒细胞的核形中性分叶核粒细胞的核形二、白细胞分类计数二、嗜酸性粒细胞(1)胞体:13~15μm,圆形。(2)胞核:多分为两叶。(3)核染色质:粗糙,深紫红色。(4)胞浆:着色不清,橘黄/红色颗粒、粗大、整齐排列、均匀充满胞质。参考区间0.5-5%二、白细胞分类计数三、嗜碱性粒细胞(1)胞体:10~12μm,圆形。(2)胞核:因颗粒遮盖而胞核不清晰。(3)核染色质:粗糙,深紫红色。(4)胞浆:着色不清,紫黑色颗粒、量少、大小不均、排列杂乱、可盖于核上。参考区间0-1%二、白细胞分类计数四、淋巴细胞⑴胞体:6~15μm,圆形或椭圆形。⑵胞核:圆形、椭圆形、肾形。⑶核染色质:深紫红色,粗糙成块,核外缘光滑。⑷胞浆:透明、淡蓝色、多无颗粒,大淋巴细胞可有少量粗大、不均匀紫红色颗粒。大淋巴细胞小淋巴细胞参考区间20-40%二、白细胞分类计数五.单核细胞⑴胞体:12~20μm,圆形、椭圆形或不规则形。⑵胞核:肾形、山字形、马蹄形、扭曲折叠不规则形。⑶核染色质:疏松网状,淡紫红色,有膨胀和立体起伏感。⑷胞浆:半透明、灰蓝色或灰红色。颗粒细小、尘土样紫红色。参考区间3-8%二、白细胞分类计数鉴别难点掌握二、白细胞分类计数掌握中性粒细胞的核形标志着它的发育阶段。正常以3~4叶为主。病理情况下,中性粒细胞的核象可发生变化,即出现核左移或核右移。1.中性粒细胞的核象变化---与细胞的成熟程度相关(二)外周血异常白细胞形态10:14:42三、白细胞形态三、白细胞形态在严重传染病、各种化脓性感染、败血症、恶性肿瘤、中毒、大面积烧伤等病理情况下,中性粒细胞可发生下列形态改变

大小不均中毒颗粒空泡杜勒体

核变性

2.中性粒细胞的毒性变化10:14:42三、白细胞形态即中性粒细胞体积大小悬殊。可能是在内毒素等因素作用下骨髓内幼稚中性粒细胞不规则分裂的化脓性感染。(1)大小不均三、白细胞形态中性粒细胞胞质中出现的粗大、大小不等、分布不均匀的紫黑色或深紫褐色颗粒,称中毒颗粒。可能因特殊颗粒生成受阻或发生颗粒变性所致。常见于严重化脓性感染及大面积烧伤等。(2)中毒颗粒三、白细胞形态(2)中毒颗粒多颗粒中性粒细胞少颗粒中性粒细胞三、白细胞形态

中性粒细胞胞质内出现一个或数个空泡。一般认为空泡是细胞受损后胞质发生脂肪变性或颗粒缺失的结果。最常见于严重感染,特别是败血症时。(3)空泡变性空泡

三、白细胞形态

是中性粒细胞胞质毒性变化而保留的局部嗜碱性区域。呈圆形、梨形或云雾状,天蓝色或灰蓝色,直径1~2μm,

是胞质局部不成熟的表现。(4)杜勒体杜勒体三、白细胞形态(5)退行性变核肿胀核固缩核碎裂常见于细胞衰老后,严重感染时该类细胞增多。三、白细胞形态(5)退行性变三、白细胞形态中性粒细胞退行性变中性粒细胞其他异常形态三、白细胞形态分叶过多的中性粒细胞常见于巨幼细胞贫血或应用抗代谢药物治疗后。

分叶过多的中性粒细胞:中性粒细胞核分叶超过5叶以上棒状小体(Auer小体)三、白细胞形态中性粒细胞其他异常形态白细胞胞质中出现的紫红色细杆状物质,1个或数个,长约1~6um,称为棒状小体,出现数个棒状小体,呈束状排列(柴束状)的白细胞称为faggot细胞(柴捆细胞)棒状小体柴捆细胞急性粒细胞白血病(多见)急性单核细胞白血病(少见)急性淋巴细胞白血病则无三、白细胞形态Pelger-Hüet畸形

Chediak-Higashi畸形

三、白细胞形态中性粒细胞其他异常形态在病毒或过敏原等因素刺激下,外周血淋巴细胞增生并发生形态上的改变,称异型淋巴细胞。淋巴细胞的形态异常Ⅰ型(空泡型)

Ⅱ型(不规则型)Ⅲ型(幼稚型)(1)异型淋巴细胞(反应性淋巴细胞)三、白细胞形态即在淋巴细胞的主核旁边另有一个游离的小核。常见于接受较大剂量的电离辐射之后或其他理化因子、抗癌药物等对细胞造成损伤时,常作为致畸、致突变的客观指标之一。(2)卫星核淋巴细胞卫星核三、白细胞形态三、白细胞形态123嗜酸性粒细胞中性杆状核粒细胞单核细胞三、白细胞形态嗜碱性粒细胞中性分叶核粒细胞淋巴细胞123三、白细胞形态嗜酸性粒细胞单核细胞3淋巴细胞321三、白细胞形态嗜碱性粒细胞中毒颗粒21三、白细胞形态分叶过多粒细胞大小不均少颗粒中性粒细胞321三、白细胞形态棒状小体杜勒小体退行性变123三、白细胞形态II型反应性淋巴细胞1空泡变性2卫星核3(1)前期白细胞在LE因子作用下肿胀,溶解成前期LE细胞,胞质崩解,核成云雾状游离均匀体。(2)花簇期有吞噬功能的中性粒细胞围绕于均匀体,形成花形细胞簇。(3)吞噬期中性粒细胞完全吞噬均匀体。2、LE细胞的形态特征游离均匀体花形细胞簇LE细胞五、红斑性狼疮细胞检查五、红斑性狼疮细胞检查第二章

血液一般检验第二节

红细胞检验一、红细胞计数二、血红蛋白测定三、红细胞形态检验

四、血细胞比容测定五、红细胞平均指数六、网织红细胞计数七、嗜碱性点彩红细胞计数八、红细胞沉降率测定

概述红细胞的来源概述红细胞的发育过程造血干细胞红系祖细胞原始红细胞早幼红细胞中幼红细胞

晚幼红细胞网织红细胞成熟红细胞网织红细胞成熟48小时,红细胞存活120天EPO脱核概述红细胞的形态与功能形态:双凹圆盘状;直径:6~9μm,平均7.2μm;厚度:边缘部分约2μm,中央约1μm侧面观呈哑铃形。血涂片经瑞特染色后,细胞呈粉红色,中央着色较浅,有明显的中央浅染区,浅染区的直径约占红细胞直径的1/3~2/5概述红细胞的形态与功能概述红细胞皱缩,边缘呈锯齿状在高渗溶液中:红细胞肿涨甚至破裂,血红蛋白逸出后形成影细胞。在低渗溶液中:概述红细胞的形态与功能红细胞的主要成分:1.血红蛋白和水(64%~70%)2.其余成分为蛋白质、磷脂无机盐和酶。功能:运输O2和CO2调节酸碱平衡免疫粘附掌握一、红细胞计数红细胞计数(RBC)即测定单位体积外周血液中红细胞的数量。(一)显微镜计数法1、原理用红细胞稀释液(等渗)稀释一定量的全血,充入计数板,在显微镜下计数一定容积内的红细胞数,经换算求出每升血液中的红细胞数量。XX个/LNx1012个/L一、红细胞计数2、试剂—红细胞稀释液成分功能氯化钠调节渗透压硫酸钠提高比重,防止细胞粘连氯化高汞防腐剂蒸馏水缺点:遇高球蛋白血症患者,由于蛋白质沉淀而使红细胞易凝集。(1)Hayem稀释液---推荐使用一、红细胞计数成分功能枸橼酸钠抗凝、维持渗透压36%甲醛液防腐并固定红细胞氯化钠维持渗透压蒸馏水(2)枸橼酸盐-甲醛稀释液(3)生理盐水或1%甲醛生理盐水

急诊时如无红细胞稀释液可用此液代替。该稀释液配制简单,可使红细胞在稀释后较长时间形态不发生改变并且不凝集,故应用较广。2、试剂—红细胞稀释液一、红细胞计数一、计数方法大方格中方格小方格每个大方格体积=1X1x0.1=0.1mm3=0.1μL计数池白四角,红中央一、红细胞计数3.简要操作取稀释液2.0ml→加入全血10u→混匀→充池→静置→高倍镜计数中央大方格内4角和正中(5个中方格内)的红细胞数→计算。一、红细胞计数3.简要操作中央大方格内4角和正中(5个中方格内)红细胞数/L=NX5X10X106

X200X5=大方格(5个中方格X5)X10X106=0.1uL-1uL-1L稀释倍数=200红细胞数/L≈NX1010

=N/100X1012

掌握一、红细胞计数1、取稀释液1.99ml,加血10ul,计数中央大格内五个中方格红细胞为500个,请报告结果?

答案:

RBC=500×5×10×200×106

=5.00×1012/L一、红细胞计数2、取稀释液2.0ml,加血20ul,计数中央大格内10个中方格红细胞为800个,请报告结果?

答案:RBC=800/10×25×10×(2000+20)/20×106=2.02×1012/L一、红细胞计数3、红细胞计数与白细胞计数方法上有哪些不同?(1)红细胞稀释液是等渗溶液而白细胞稀释液是低渗溶液。(2)红细胞稀释液不破坏细胞。(3)稀释倍数不同。(4)选用计数池区域不同。(5)计数域误差大小不同。思考一、红细胞计数(二)方法学评价方法优点缺点显微镜计数法传统方法,设备简单,成本低;为参考方法,用于血细胞分析仪异常检查结果的复核费时、重复性较差,结果的准确性取决于操作者的技术水平血细胞分析仪法操作简便,效率高,易于标准化,重复性好,适合于大批量标本筛查、健康人群体检成本高,环境条件要求较高,准确性取决于仪器的性能及工作状态一、红细胞计数(三)质量保证1.红细胞在室温和4~8℃可稳定3天,37℃可稳定36小时,以后逐渐减少。2.血液加入稀释液后和充池前需充分混匀;计数时光线不能太强。3.当白细胞>100×109/L时,可对红细胞计数结果产生影响。处理方法是将计数所得的红细胞数减去计数所得的白细胞数;或者在高倍镜下注意识别,计数时勿将白细胞计入。在高倍镜下,白细胞体积通常比红细胞体积略大,中央无凹陷,细胞核隐约可见,无黄绿色折光。4.技术误差和固有误差见白细胞计数。一、红细胞计数(四)参考区间1.显微镜计数法:成年男性(4.0~5.5)×1012/L,成年女性(3.5~5.0)×1012/L;新生儿:(6.0~7.0)×1012/L2.红细胞计数医学决定水平:

>6.8×1012/L,应采取相应的治疗措施;<3.5×1012/L,可诊断为贫血;<1.5×1012/L,可考虑输血。2012 成人女性的红细胞参考值(4.0~5.0)×10^12/L(3.5~5.0)×10^12/L(3.0~5.0)×10^12/L120~160g/L ABCD提交110~150g/LE单选题1分Hayem红细胞稀释液中硫酸钠的主要作用是固定细胞形态A防腐作用B防止细胞粘附C调节细胞渗透压D以上都是E提交单选题1分二、血红蛋白测定(一)血红蛋白(Hb或HGB)的分子结构

由珠蛋白和亚铁血红素组成,每个珠蛋白分子有4条肽链(α、β、γ、δ),每条肽链结合一个亚铁血红素分子,形成具有四级空间结构的四聚体。其分子量为64458

珠蛋白

亚铁血红素

HbA:α2β2,>90%HbA2:α2δ2,约2%~3%HbF:α2γ2,<1%原卟啉铁(Fe2+)掌握二、血红蛋白测定血红蛋白的四级结构卟啉环包着一个亚铁离子组成一个亚铁血红素,每条多肽链含一个亚铁血红素,每个血红蛋白分子有四个珠蛋白肽链二、血红蛋白测定Hb呼吸载体氧合血红蛋白(HbO2)还原血红蛋白(Hbred)碳氧血红蛋白(HbCO)高铁血红蛋白(Hi)硫化血红蛋白(SHb)氰化高铁血红蛋白(HiCN)生理条件下,99%血红蛋白的铁呈Fe2+Fe2+Fe3+

铁呈Fe2+的血红蛋白与氧结合外周血最主要如果血红素第6个配位键被CO、S等占据,形成各种血红蛋白衍生物二、血红蛋白测定氧合血红蛋白(HbO2)---鲜红色还原血红蛋白(Hbred)---暗红色碳氧血红蛋白(HbCO)---樱红色高铁血红蛋白或(Hi或MHb)---红褐色硫化血红蛋白(SHb)---病理氰化高铁血红蛋白(HiCN)---棕红色(二)血红蛋白的种类在正常情况下,外周血中的血红蛋白主要有:二、血红蛋白测定(三)血红蛋白测定方法指测定血液中各种血红蛋白的总浓度,用g/L表示。1、Hb测定2、Hb测定方法推荐使用比色法中的氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN法)作为参考方法掌握二、血红蛋白测定HiCN测定法1.原理

表面活性剂溶解红细胞膜(溶血)释放血红蛋白,血红蛋白被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白(Hi)(氧化),在一定的pH值下,Hi与氰离子(CN-)结合生成稳定棕红色氰化高铁血红蛋白(HiCN)(结合);HiCN在540nm处有一吸收峰,测定其吸光度HiCN在540nm处的吸光度与浓度成正比,根据测得吸光度可求得血红蛋白浓(g/L)(计算)。二、血红蛋白测定HiCN测定法1.原理RBC表面活性剂

HbK3Fe(CN)6

HiCN-HiCN540nm比色吸光度A计算

Hb(g/L)除SHb(溶血)(氧化)(结合)(计算)二、血红蛋白测定试剂Hb转化快,5分钟可完成二、血红蛋白测定HiCN测定法2.操作加转化液:5ml↓

采血:20μl↓

静置:混匀后放置5min(Hb转化为HiCN的过程)↓

比色:λ=540nm,比色杯1.000cm,转化液为空白,↓测吸光度A值同时作标准曲线二、血红蛋白测定HiCN测定法3.直接计算结果

在实际工作中,通常没有符合标准的分光光度计。所得吸光度A不是偏高就是偏低,因此不能用分光光度法直接引用消光系数计算。只能使用K值法或标准曲线法。HiCN最大吸收波峰为540nm,波谷为504nm。在特定条件法,HiCN毫摩尔消光系数为44L/(mmol·cm)。y=ax二、血红蛋白测定A:0.350,Hb=?140g/LHiCN测定法4.标准曲线计算法y=ax+b二、血红蛋白测定HiCN测定法HiCN转化液:不能贮存在塑料瓶,应保存在棕色有塞玻璃瓶中。废液处理:加入次氯酸钠使CN-氧化成CO2和N2

除毒严禁加入酸性溶液,氰化钾遇酸生成氢氰酸(剧毒)二、血红蛋白测定(三)其他血红蛋白测定方法目前,自动血液分析仪已多使用不含氰化钾的血红蛋白测定方法十二烷基硫酸钠法(SDS-Hb)(替代次选)碱羟血红蛋白法(AHD575)叠氮高铁血红蛋白法(HiN3)溴代十六烷基三甲胺法(CTAB)二、血红蛋白测定(三)其他血红蛋白测定方法目前,自动血液分析仪已多使用不含氰化钾的血红蛋白测定方法十二烷基硫酸钠法(SDS-Hb)(替代次选)SDS作为一种阴离子表面活性剂,具有轻度氧化作用亚铁血红素被氧化成稳定的棕红色高铁血红素样复合物(SDS-Hb),最大吸收峰在538nm二、血红蛋白测定(四)方法学评价测定方法优点缺点HiCN测定法参考方法,操作简单,反应速度快,可检测SHb之外的所有Hb,HiCN参考品可长期保存,便于质控KCN试剂有剧毒,高白细胞、高球蛋白血症标本可致浑浊,对HbCO的反应慢,不能测定SHbSDS-Hb测定法次选方法,操作简单,呈色稳定,试剂无毒,结果准确,重复性好SDS质量差异大,消光系数未定,SDS易破坏白细胞,不适于同时进行白细胞计数的血液分析仪AHD575测定法试剂简易,无毒,呈色稳定,准确性与精密度较高;可用氰化血红素作校准品575nm波长比色,不便于自动检测,HbF不能转化HiN3测定法反应迅速,呈色稳定,准确度、精密度较高试剂有毒性(为HiCN的1/7),HbCO转化慢(20分钟)CTAB测定法溶血性强且不破坏白细胞,适于血液分析仪检测精密度、准确度略低二、血红蛋白测定(五)参考区间成年女性:115~150g/L新

儿:170~200g/L成年男性:130~175g/L二、血红蛋白测定(六)临床意义红细胞与血红蛋白的增减不一定成比例,如大细胞性贫血患者的RBC往往较Hb减少显著;而小细胞性贫血患者则相反。RBC、Hb或Hct低于参考区间的下限,即为贫血主要用于贫血的诊断和贫血程度的分级极重度重度中度轻度正常<30g/L(31-60)g/L(61-90)g/L(91-120)g/L>120g/L

306090110

120Hb(g/L)贫血的分级二、血红蛋白测定标准:成年男性RBC>6.0×1012/L,Hb>170g/L

成年女性RBC>5.5×1012/L,Hb>160g/L1、红细胞和血红蛋白增高1)年龄与性别的变化2)精神因素:红细胞及血红蛋白↑3)剧烈的体育运动和劳动:红细胞及血红蛋白↑4)气压因素:气压低则红细胞及血红蛋白↑5)男性一般高于女性(雄性激素多)(1)生理变化二、血红蛋白测定①相对增高

因脱水血液浓缩所致。如严重腹泻、大面积烧伤等②绝对增高----指血浆容量不变,红细胞和血红蛋白的绝对值增加。

组织缺氧骨髓幼红细胞有丝分裂

RBCEPO刺激肾(2)病理性增高COPD继发性增多原发性增多机体并不缺氧----真性红细胞增多症二、血红蛋白测定2、红细胞和血红蛋白减少●妊娠中晚期:血容量增加,血液稀释●6个月至2岁:血容量增加速度大于RBC与Hb的生成、生长发育快,造血原料相对不足。●有些老年人:摄取、利用营养和造血功能减退(1)生理性减少

红细胞的丢失、破坏,造血原料不足,骨髓造血功能障碍等原因(2)病理性减少确定有无贫血的最佳指标为MCV、MCH、MCHCARBCHbB网织红细胞计数CRDWD血沉E提交单选题1分引起RBC和Hb代偿性增高的疾病肺气肿A反复腹泻B大面积烧伤C真红D妊娠期E提交单选题1分正常血红蛋白的组成是铁蛋白A珠蛋白B血红素C原卟啉D珠蛋白和亚铁血红素E提交单选题1分1、取稀释液1.99ml,加血10ul,计数中央大格内10个中方格红细胞为500个,请报告结果?

答案:

RBC=500×2.5×10×200×106

=5.00×1012/L2.取血40ul加入稀释液0.36ml,镜下计数了8个大方格共有白细胞320个,求其白细胞计数结果?答案:WBC=320/8×10×10×106

=4×109/L三、红细胞形态形态:双凹圆盘状;直径:6~9μm,平均7.2μm;厚度:边缘部分约2μm,中央约1μm侧面观呈哑铃形。三、红细胞形态血涂片经瑞特染色后,细胞呈粉红色,中央着色较浅,有明显的中央浅染区,浅染区的直径约占红细胞直径的1/3~2/5三、红细胞形态

大小异常红细胞异常形态

染色异常

结构异常

形态异常正常形态红细胞三、红细胞形态1.大小异常大红细胞大小不等小红细胞巨红细胞(二)异常红细胞形态直径小于6μm直径大于10μm直径大于15μm指同一血涂片中红细胞大小悬殊,直径相差在1倍以上三、红细胞形态中央浅染区?浅染

?深染?思考三、红细胞形态1.大小异常-小红细胞▲正常人偶见▲出现较多中央浅染区扩大的小红细胞,提示血红蛋白合成减少,多见于缺铁性贫血(IDA)。----浅染中央浅染区扩大的小红细胞三、红细胞形态▲慢性炎症引起的继发性贫血---为单纯小红细胞,无中央浅染区扩大单纯小红细胞1.大小异常-小红细胞三、红细胞形态▲遗传性球形红细胞增多症----深染,中央浅染区消失中央浅染区消失1.大小异常-小红细胞三、红细胞形态▲溶血性贫血(由于不全成熟的红细胞增多)▲巨幼红细胞性贫血(是由于叶酸或维生素B12缺乏,DNA合成障碍)见于:1.大小异常-大红细胞三、红细胞形态1.大小异常-巨红细胞见于巨幼细胞贫血,细胞中心浅染区消失(深染)三、红细胞形态1.大小异常-大小不均指同一血涂片中红细胞大小悬殊,直径相差在1倍以上见于严重的增生性贫血及巨幼细胞性贫血三、红细胞形态1.正常红细胞2.小红细胞3.大红细胞4.巨红细胞三、红细胞形态2.

染色异常低色素性红细胞---染色过浅高色素性红细胞---染色过深嗜多色性红细胞细胞着色不一(二)异常红细胞形态三、红细胞形态低色素性红细胞---染色过浅血红蛋白含量低,中央浅染区明显扩大,甚至呈环状。常见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、铁粒幼细胞贫血。三、红细胞形态高色素性红细胞---染色过深红细胞中央浅染区消失,着色较深,整个红细胞均染成红色。常见于巨幼细胞性贫血和遗传性球形红细胞增多症。三、红细胞形态嗜多色性红细胞红细胞经瑞特染色后部分或全部呈红蓝混合色,灰红或灰蓝色(由于胞浆中含有多少不等的嗜碱性物质RNA而被染成灰蓝色)。见于增生性贫血,急性溶血性贫血时尤为多见。三、红细胞形态细胞着色不一(双相红细胞)

同一血涂片中,各红细胞的Hb含量相差较多,着色深浅不一。常见于铁粒幼细胞贫血。三、红细胞形态低色素性红细胞高色素性红细胞嗜多色性红细胞提问三、红细胞形态3.

形态异常(二)异常红细胞形态椭圆形红细胞靶形红细胞球形红细胞口形红细胞棘形红细胞缗钱状排列裂片红细胞红细胞形态不整镰刀形红细胞泪滴形红细胞三、红细胞形态球形红细胞球形红细胞直径<6.5μm,厚度>2μm,呈小圆球形,无中央淡染区。血片中此类细胞达25%时有诊断参考价值,常见于遗传性球形细胞增多症,自身免疫性溶血性贫血、异常血红蛋白病等。膜蛋白和骨架蛋白结构异常三、红细胞形态椭圆形红细胞呈长椭圆形,甚至呈长柱形,长度大于宽度的3倍~4倍。正常人偶见,但最多不超过15%。常见于遗传性椭圆形红细胞增多症,可达25%~75%,巨幼细胞贫血和恶性贫血时也常见。膜基因异常三、红细胞形态靶形红细胞

红细胞中心、边缘深染,形状如射击之靶。是由于Hb含量不足而且分布不均。见于低色素性贫血,尤其是珠蛋白生成障碍性贫血。三、红细胞形态口形红细胞

红细胞中央淡染区呈裂口状狭孔。正常人<4%,增高见于遗传性口形红细胞增多症,急性乙醇中毒和弥散性血管内凝血(DIC)时也可见少量口形红细胞。红细胞膜异常三、红细胞形态泪滴形红细胞

红细胞形态似泪滴样或梨状,正常人外周血少见,增多主要见于骨髓纤维化。三、红细胞形态裂片红细胞是红细胞碎片或不完整的红细胞,大小不一,形态各异,可有尖角和直边,盔形、新月形,正常<2%,增多见于弥散性血管内凝血。三、红细胞形态镰刀形红细胞红细胞狭长似镰刀主要见于HbS病。缺氧时,形成长形或尖形的结晶体,使细胞膜发生变形异常血红蛋白三、红细胞形态棘形红细胞红细胞表面带有长短不一的针刺状或尖刺状突起(2-20个),其间距不规则,突起的长度和宽度也不一致。见于遗传性血浆β-脂蛋白缺乏症。三、红细胞形态也称短棘形红细胞或皱缩红细胞,细胞边缘有10-30个相当规则的短而钝或尖的突起。主要见于肝肾疾病,丙酮酸缺乏症等。锯齿红细胞三、红细胞形态区分棘形红细胞锯齿红细胞三、红细胞形态红细胞形态不整指红细胞形态发生各种明显改变的情况而言。可见泪滴状、梨形、棍棒形、盔形、三角形、新月形等。三、红细胞形态裂片RBC靶形RBC镰刀形RBC三、红细胞形态椭圆形RBC球形RBC口形RBC三、红细胞形态棘形RBC锯齿形RBC泪滴形RBC三、红细胞形态4.结构异常染色质小体(豪-乔小体)嗜碱性点彩红细胞卡波环有核红细胞三、红细胞形态豪-乔(焦)小体(Howell-Jollybody):又称染色质小体,位于成熟或幼稚红细胞胞质内的紫红色小体,直径1~2μm,1至数个不等,为核碎裂或溶解后的残余物。最常见于巨幼细胞性贫血,也见于溶血性贫血及脾切除术后。豪-乔小体三、红细胞形态卡-波环(Cabotring):存在于成熟或幼稚红细胞胞质内,呈紫红色线圈状“O”或“8”字形结构,可能是纺锤体的残余物或脂蛋白变性所致。常与染色质小体并存,见于溶贫、巨幼贫、白血病及铅中毒等。卡波环三、红细胞形态也称点彩红细胞:指在瑞氏染色涂片中,红细胞胞质内出现形态大小不一、数量不等的灰蓝色点状物。在铅、铋、锌、汞等重金属中毒时增多,为铅中毒诊断的筛查指标。重症巨幼细胞性贫血和骨髓纤维化等亦可见增多。嗜碱性点彩红细胞三、红细胞形态有核红细胞(NRBC):即幼稚红细胞。存在于骨髓中,1周内新生儿外周血涂片可见少量,成人外周血中出现有核红细胞属病理现象,常见于各种溶血性贫血、白血病、红白血病等。有核红细胞三、红细胞形态嗜碱性点彩RBC豪-乔小体卡波环三、红细胞形态5.不规则分布红细胞缗钱状形成红细胞聚集三、红细胞形态

多个红细胞相互聚集重叠,连接成串,形似缗钱。主要见于多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症等。红细胞缗钱状三、红细胞形态由于冷凝集素增多或免疫性因素,导致RBC出现聚集、凝集成堆或成团现象,引起MCV假性升高,RBC计数假性减少。红细胞聚集三、红细胞形态总结

异常红细胞大小异常

小红细胞、大红细胞、巨红细胞、红细胞大小不均染色异常低色素性、高色素性、嗜多色性红细胞、双相红细胞形态异常球形红细胞、椭圆形红细胞、靶形红细胞、口形红细胞、泪滴形红细胞、裂片红细胞、镰刀形红细胞、棘形红细胞、锯齿形红细胞、红细胞形态不整结构异常豪-乔小体、卡波环、嗜碱性点彩红细胞、有核红细胞不规则分布红细胞缗钱状形成、红细胞聚集四、血细胞比容测定血细胞比容的概述血细胞比容测定方法血细胞比容方法学评价血细胞比容质量保证血细胞比容参考区间血细胞比容临床意义四、血细胞比容测定HCT的高低主要与红细胞数量、大小有关,主要用于贫血和红细胞增多的诊断,反映血液稀释和血液浓缩变化联合RBC、Hb计算红细胞平均值1、概念血细胞比容(Hct/PCV),是指一定体积(1L)的全血中(抗凝血)红细胞所占容积的相对比例(小数或百分数)2、应用四、血细胞比容测定温氏法微量法

血细胞分析仪法折射仪法黏度法比重测定法放射性核素法(一)检验方法推荐方法参考方法临床常用方法离心法HCT=RBCxMCV四、血细胞比容测定(二)方法学评价方法优点缺点温氏法应用广泛,无需特殊仪器难以完全排除残留血浆(可达2%~3%),测定值比真实值略高,标本用量多,耗时长。微量法WHO推荐的常规方法,CLSI推荐的参考标准。标本用量少,相对离心力高,结果准确、快速、重复性好仍有残留血浆,但较温氏法少。需微量高速离心机微量离心计算法可常规用于HCT测定的校准。HCT=(离心HCT值-0.0119)/0.9736需用参考方法测定全血Hb和压积红细胞Hb,HCT=全血Hb/压积红细胞Hb血液分析仪法无需单独采血,检查快速,精密度高,无血浆残留引起的误差准确性不及微量离心法,需定期校正仪器放射性核素法ICSH曾推荐为参考方法,准确性最高方法繁琐、特殊,不适用于临床常规检查四、血细胞比容测定抗凝剂:肝素或EDTA(三)质量保证平视读数四、血细胞比容测定(四)参考区间成年人男性0.40~0.50女性0.35~0.45儿童0.33~0.42新生儿0.47~0.67红细胞所占容积的相对比例四、血细胞比容测定(五)临床意义1.增高①各种原因引起的血液浓缩;②原发性或继发性红细胞增多症;③新生儿2.降低①各种原因引起的血液稀释;②各种原因引起的贫血HCT只能反映红细胞浓度,不能说明红细胞的总数。HCT减少程度不一定与RBC一致;

如失血或者输血。2015

关于细胞比容的叙述错误的是与红细胞大小有关有助于贫血的鉴別诊断有助于贫血诊断与红细胞数量无关ABCD提交可作为补液计算的依据E单选题1分三、红细胞形态裂片RBC靶形RBC镰刀形RBC三、红细胞形态椭圆形RBC球形RBC口形RBC三、红细胞形态棘形RBC锯齿形RBC泪滴形RBC五、红细胞平均指数概述计算方法参考区间临床意义五、红细胞平均指数五、红细胞平均指数红细胞平均体积(MCV)红细胞平均血红蛋白含量(MCH)红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)红细胞平均指数为贫血的形态学分类和鉴别诊断提供重要线索RBCHbHCT参数计算五、红细胞平均指数红细胞平均体积(MCV)每个红细胞体积平均值五、红细胞平均指数红细胞平均血红蛋白含量(MCH)每个红细胞中的血红蛋白平均值五、红细胞平均指数红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)全部红细胞的血红蛋白浓度五、红细胞平均指数(二)检验方法手工法血细胞分析仪法五、红细胞平均指数如果RBC=4.0×1012/L,Hb=124g/L,Hct=0.42那么MCV=?MCH=?MCHC=?105fl31pg295.2g/L手工法:红细胞平均指数的计算五、红细胞平均指数MCV由血液分析仪直接测定细胞信号获得①MCH=Hb/RBC②MCHC=Hb/(RBC×MCV)=Hb/HCT③HCT=RBC×MCV仪器法:红细胞平均指数的计算

五、红细胞平均指数(三)参考区间人群MCV(fl)MCH(pg)MCHC(g/L)成人82~10027~34316~3541~3岁79~10425~32280~350新生儿86~12027~36250~370五、红细胞平均指数(四)临床意义贫血形态学分类MCVMCHMCHC临床意义正常细胞性贫血正常正常正常急性失血、急性溶血、再生障碍性贫血、白血病等大细胞性贫血增高增高正常巨幼细胞性贫血单纯小细胞性贫血降低降低正常慢性炎症、尿毒症等小细胞低色素性贫血降低降低降低缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、慢性失血等五、红细胞平均指数红细胞(RBC)3.6x1012/L,红细胞比容(HCT)0.392,求MCV(红细胞平均体积)并判断是否正常。MCV=HCT/RBCMCV=0.392/3.6x1012=0.108x10-12(L)=0.108x103(fL)=108(fL)不正常五、红细胞平均指数★己知一成年患者的红细胞为3.16×1012/L;血红蛋白为70.0g/L;红细胞比容为0.227L/L,该患者是否有贫血?如果贫血是哪种类型贫血?答案:MCV=0.227×1015/3.16×1012=71.8fLMCH=70.0×1012/3.16×1012=22.2pgMCHC=70.0/0.227=308.4g/L小细胞低色素性贫血六、网织红细胞计数六、网织红细胞计数六、网织红细胞计数网织红细胞(Ret)是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞,其胞质中尚残留部分嗜碱性物质(核糖体和核糖核酸),可被某些染料活体染色后呈蓝色或紫色的网状或颗粒状结构,故名为网织红细胞。活体染色:是指细胞未经固定,在保持细胞生物活性的情况下加染料进行染色的方法。ICSH将网织红细胞分成I~IV型。I型(丝球型)Ⅱ型(网型)III型(破网型)Ⅳ型(点粒型)(一)定义新亚甲蓝

煌焦油蓝六、网织红细胞计数(二)分型及形态特征Ⅰ型:丝球型,无核红细胞中央的嗜碱性物质交织成密集的丝团状。Ⅱ型:网型,无核红细胞中央的丝团状结构开始松散,呈疏松网眼状结构排列。六、网织红细胞计数Ⅲ型:破网型,网织状结构开始减少,形成残破不全的网状。Ⅳ型:点粒型,只有少数蓝色点状颗粒(两个以上),或极小的网状残余,散布于胞质一侧。六、网织红细胞计数网织红细胞分型I型丝球型Ⅱ型网型Ⅲ型破网型IV型颗粒型六、网织红细胞计数经瑞特染色复染的网织红细胞形态六、网织红细胞计数煌焦油蓝染色的网织红细胞六、网织红细胞计数(一)检验方法1.显微镜计数法2.血细胞分析仪法试管法玻片法(不用)六、网织红细胞计数试管法1.原理:网织红细胞内带负电荷的RNA磷酸基,与新亚甲蓝、灿烂甲酚蓝(煌焦油蓝)等碱性染料带正电荷的有色反应基团结合,使RNA胶体间的负电荷减少而发生凝缩,形成蓝色的点状、线状或网状结构,显微镜下计数可得网织红细胞的相对值(%)和绝对值(×109/L)(Ret#=RBC×Ret%)。2.试剂:10g/L煌焦油蓝或新亚甲蓝染液六、网织红细胞计数加试剂:2滴↓外周血:2滴↓染色:混匀,37℃15~20min↓

制薄血片:取1滴制片,干燥后镜检↓计数↓计算3.操作血液与染液的比1:1计数1000个红细胞中所见到的网织红细胞数,计算百分比。六、网织红细胞计数Miller窥盘法BAMiller窥盘为圆形玻片,玻片上刻有两个正方形格子,计数时用小方格A计数红细胞,用大方格B(包含A)计数网织红细胞,大方格B(包含A)面积为小方格A的9倍。ICSH及我国卫计委临床检验中心推荐使用Miller窥盘进行网织红细胞计数。六、网织红细胞计数B格2个Ret,A格5个RBC六、网织红细胞计数计算位置A格内红细胞数(RBC)B格内网织红细胞数(Ret)112121023140412051206121713081409

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