多种纳米银涂层瓷砖抑菌性能的测定

目录摘要 1关键词 11前言 21.1纳米级结构材料 21.2纳米抗菌材料 21.3纳米银 21.4抗菌瓷砖 31.5抑菌性能 31.6大肠杆菌 31.7金黄色葡萄球菌 31.8研究意义 42材料与方法 42.1材料 42.1.1主要药品与试剂 42.1.2试验菌株 42.1.3试验仪器 42.2实验前期准备 52.3菌种的复苏与复壮 52.3.1制备琼脂斜面培养基 52.3.2菌种的复苏 62.3.3菌种的复壮 62.4抗菌涂层瓷砖测试实验 62.4.1制备测试菌液 62.4.2准备测试样品 62.4.3接种细菌 62.4.4菌液的洗脱 62.4.5活菌数计算 72.4.6抗菌活性值计算 72.5纳米银涂层瓷砖的处理情况 73结果 83.16种纳米银涂层瓷砖对菌株洗脱原液的抑菌效果 83.26种纳米银涂层瓷砖对10-1浓度稀释菌液的抑菌效果 93.36种纳米银涂层瓷砖对10-2浓度稀释菌液的抑菌效果 103.46种纳米银涂层瓷砖抑菌测试结果计算 114讨论 125结论 13参考文献 13致谢 16学生：杨梦然指导老师：郑晓峰(湖南农业大学动物医学院，长沙410128)摘要：近年来，随着生活水平的提高，人们对卫生环境的重视程度增加了，使得公众对抗菌材料的需求也增加了。陶瓷材料作为人类生活必需品,它的抗菌功能引起了人们的广泛关注。在抗菌陶瓷产品中，银抗菌材料是陶瓷领域最受欢迎的产品。为了测定不同纳米银涂层瓷砖的抑菌性能，建立一套纳米银涂层瓷砖抑菌性能的测试体系，以期筛选出具有抑菌性能的纳米银涂层瓷砖，并为今后针对建筑陶瓷材料抗菌性能的评估作业提供方法学基础。本次试验选取金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作为测试菌种，对6种纳米银涂层瓷砖进行抑菌性能的测定。结果证明，其中5种纳米银涂层瓷砖对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有抑制效果。关键词：纳米银涂层瓷砖、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、抑菌性能。Student:Meng-RanYangTutor:Xiao-FengZheng(CollegeofVeterinaryMedicine,HunanAgriculturalUniversity,Changsha410128,China)Abstract:Withtheimprovementoflivingstandards,peoplehavepaidmoreandmoreattentiontothesanitationinrecentyears,promptingmoreandmoredemandforantibacterialmaterials.Constructionceramicmaterialsarenecessitiesofhumanlife.Itsantibacterialfunctionhasattractedmuchinterest.Ofalltheantimicrobialceramicproducts,nano-silverantibacterialmaterialsisoneofthemostpopularproductsappliedtothefieldofceramic.Inordertomeasurebacteriostaticpropertiesofdifferentnano-silvercoatedceramictiles,establishasetofbacteriostatictestsystemandscreennano-silvercoatedceramictileswhichhaveantibacterialproperties.Andthenitcanprovideamethodologicalbasisfortheevaluationofantibacterialpropertiesofbuildingceramicmaterialsinthefuture.Inthisexperiment,staphylococcusaureusandescherichiacoliwereselectedastheteststrainstomeasureantibacterialpropertiesofsixnano-silvercoatedceramictiles.Theexperimentprovedthatfiveofthenano-silvercoatedceramictilespresentanantibacterialperformanceagainststaphylococcusaureusandescherichiacoli.Keywords:nano-silvercoatedceramictiles,staphylococcusaureus,escherichiacoli,antibacterialactivities.1前言1.1纳米级结构材料纳米级结构材料是一种超精细材料又名纳米材料，在三维空间里，其大小不超过100nm[1]。自70年代出现纳米粒子以来，它已有40多年的历史，但在1985年代之后才真正成为研究热点。纳米材料是由纳米精细粒子，纳米块状材料以及纳米合成材料构成的，因其特殊的理化性质，例如表面效应、小尺寸效应、量子尺寸效应以及宏观量子隧道效应等，使得其在医疗、化工、建筑等多个领域具有广阔的应用前景[2]。随着科技的发展，纳米材料在日常生活中运用更加广泛，在家电、包装、陶制、服饰、建筑等领域的市场占有率不断增高[3-8]。1.2纳米抗菌材料纳米抗菌材料是在纳米技术出现后通过某种方法或技术将某种纳米抗菌剂进行加工使其具有抗菌功能的材料，它主要通过气相法、液相法、固相法；干法、湿法；物理法、综合法等方法制备而成。银系抗菌剂、纳米二氧化钛、纳米氧化锌是目前应用最为广泛的纳米抗菌材料[9]。如今，纳米抗菌材料制备技术作为近几年来新崛起的高新技术，在日常的纤维服装、家用电器、卫生陶瓷制品、食品包装以及建筑用的钢板、涂料等领城被越来越广泛的应用[10]。其简便的操作，较强的抗菌性能以及持久的灭菌性使它在抗菌领域有很好的发展前景。1.3纳米银纳米银是以纳米为单位的金属银单质或离子，其作为一种新型纳米材料，能持续释放各种银离子，对细菌有抑制和杀灭作用，相比其他金属离子不存在安全隐患[11-13]。纳米银粒子直径小，反应活性高，易与无机阴离子结合从而抑制细菌生长。目前，纳米银材料已广泛用于抑菌保鲜、建筑、医疗、环境等领域[14-15]。纳米银的抑菌机理主要包括：破坏细胞膜，影响菌体内环境，损伤细菌DNA，产生活性氧自由基等[16-21]。1.4抗菌瓷砖随着生活水平的提高，人们的健康意识日益增强，人们对抗菌纤维、抗菌塑料、抗菌陶瓷的研究更加深入，居住环境中用到的抗菌陶瓷更是深受广大群众的青睐[22]。目前，抗菌瓷砖的制备主要通过往釉料中加入抗菌剂然后烧制而成，在众多抗菌剂中，银系抗菌剂使用最广，其抗菌性能及抗菌耐久性也更强，因此银系抗菌瓷砖具有广阔的应用前景[23]。1.5抑菌性能抑菌性能是衡量抗菌制品性能的重要指标，如今常用的测试灭菌性能的方法有：奎因法、浸渍法、平板培养法等。实验过程中的受试菌种主要为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌。对于抑菌性能的评价，国内外尚无统一的评判标准，学者们主要通过观察材料的抗菌效果(MIC、MBC)、抗菌范围、持续性、耐侯性和耐热性、安全性、是否影响基体材料性能等来评判抗菌材料的抑菌性能[24]。1.6大肠杆菌大肠杆菌，又被称为大肠埃希氏菌，是革兰氏阴性菌的代表菌,由于该菌经常出现在粪便污染的地方，因此被作为水源和食品粪便污染的指示菌[25]。绝大多数的大肠杆菌是人和动物的肠道兼性厌氧寄居菌群，在正常情况下一般不具有致病能力[26]。但当机体免疫力降低、肠道长期缺乏刺激时，大肠杆菌可能会转移至肠道以外的胆囊、尿道、膀胱、阑尾等地，造成相应部位的感染或全身散播性感染,因此大部分大肠杆菌通常被看作机会致病菌[27]。大肠杆菌是最常见的临床病原体之一，也是食品卫生和流行病学领域的重要研究课题。如今，抗生素仍然是治疗大肠杆菌引起的临床感染的主要药物。由于抗生素的滥用，导致大量耐药菌株出现，因此高耐药性，多重耐药性和交叉耐药性等现象频繁出现。1.7金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌又称"嗜肉菌"，隶属于葡萄球菌属，最早于1880年从病人溃疡的脓疮中发现，是革兰氏阳性菌的代表菌,其作为一种普遍存在于环境中的细菌，常见于人体皮肤表面及上呼吸道黏膜，约有20%的人群长期携带着金黄色葡萄球菌[28]。金黄色葡萄球菌是人类化脓性感染中最常见的感染，可引起全身感染，例如局部化脓性感染、肺炎、伪膜性肠炎，心包炎、细菌感染、脓毒败血症等。据报道，金黄色葡萄球菌引起的感染仅次于大肠杆菌，位于第二位[29]。自从1928年青霉素被发现以来，抗生素用于治疗感染的时代就确立了，较好地控制了由金黄色葡萄球菌引起的感染。但是，随着抗生素的传播，金黄色葡萄球菌开始对抗生素产生了耐药性，1940年临床上出现了耐青霉素金黄色葡萄球菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌等多重耐药菌，由此使得金黄色葡萄球菌成为名副其实的超级细菌[30]。1.8研究意义纳米抗菌材料是在纳米技术的基础上将抗菌剂制备成具有抗菌性能的材料。纳米材料的不一样导致抗菌效果也不一样，主要表现在材料中抗菌剂的接触面积以及存活率有区别。其抗菌机理及效果也不同[31]。因此纳米材料抑菌性能的测定对细菌、病毒等的杀灭起着至关重要的作用。目前对抑菌性能的评价主要包括国际标准，日本标准和美国标准等。本项目拟根据日本标准JIS-Z-2018：2010，建立一套纳米银涂层瓷砖抑菌性能的测试体系，评估不同建筑用纳米涂层瓷砖的抑菌性能，拓宽纳米材料抑菌性能评估的方法论，为高效快速且可靠地检测纳米材料的抑菌性能提供方法学基础。2材料与方法2.1材料2.1.1主要药品与试剂营养琼脂培养基青岛高科园海博生物技术公司吐温-80青岛高科园海博生物技术公司氯化钠国药集团化学试剂有限公司营养肉汤培养基北京索莱宝科技有限公司无水乙醇安徽安特食品股份有限公司2.1.2试验菌株大肠杆菌湖南省兽药工程技术研究中心金黄色葡萄球菌湖南省兽药工程技术研究中心2.1.3试验仪器SW-CJ-2FD双人单面净化工作台江苏通净净化设备有限公司DHG-9030A型电热恒温鼓风干燥箱上海精宏实验设备有限公司微量可调移液器德国艾本德（Eppendorf）股份有限公司LDZX-50KB立式压力蒸汽灭菌器上海申安医疗器械厂LRH-250-S型恒温恒湿培养箱广东省医疗器械厂台式恒温振荡器上海浦东物理光学仪器厂BA22O电子天平日本岛津制作所海尔冰箱青岛海尔股份有限公司2.2实验前期准备配置磷酸缓冲液：用分析天平称取磷酸二氢钾34.0g，转移入烧瓶，接着用量杯称取500ml的纯水倒入烧瓶中，充分混匀。用PH试纸测试PH值，并通过盐酸和氢氧化钠溶液调整PH值至6.8-7.2之间。上述操作完成后，再加入纯水定容至1000ml。高压蒸汽灭菌备用，不可使用超过一个月的磷酸缓冲液培养基。细菌悬浊液用营养肉汤[1/500NB]的配制：选取配置好的营养肉汤培养基倒入烧瓶，用超纯水以500：1的比例稀释。用PH试纸测试PH值，并通过盐酸和氢氧化钠溶液调整PH值至6.8-7.2之间，高压蒸汽灭菌后，置于5-10℃的低温环境下保存。灭菌洗脱液的配制：配置0.85%NaCl的生理盐水，加入0.2%吐温-80，便于洗脱。用PH试纸测试PH值，并通过盐酸和氢氧化钠溶液调整PH值至6.8-7.2之间，121℃灭菌30min，置于5℃~10℃下保存。覆盖膜的准备：准备若干张尺寸大小为40mm×40mm聚乙烯薄膜，厚度约0.05m~0.10mm。用70%乙醇浸泡10min，无菌水冲洗后于超净台中自然风干。试样瓷砖灭菌：用70%的酒精对试样瓷砖清洗，将处理过的试样表面釉层向上，坯体部分浸泡在无菌水中24h，保证试样吸水充分，实验时取出试样用灭菌干纱布将试样表面的多余水分擦去，放入灭菌平皿中备用。2.3菌种的复苏与复壮2.3.1制备琼脂斜面培养基用试验天平称取32g营养琼脂，再量取1000ml的纯水，将二者充分混合，利用高压锅蒸汽灭菌。待灭菌后，用量杯量取6-10ml的营养琼脂，将它注入试管中，然后保持干燥，以15°的角度倾斜，静置一定时间待灭菌后的营养琼脂变成固体。2.3.2菌种的复苏在超净工作台上，火焰对试管口和接种环进行消毒，蘸取一环菌液划线接种放入上述实验灭菌后的营养琼脂里，在试管口堵住棉絮，使它处于全封闭状态，在37℃的环境下培养一天。2.3.3菌种的复壮在超净工作台上，火焰对试管口和接种环进行消毒，用接种环碰触带有菌种的斜面培养基中的冷凝水冷却，用接种环从带有菌种的斜面培养基表面刮取部分菌种并在新的斜面培养基上涂开，划线涂抹成条状，对试管口用火焰进行再次消毒，塞住棉塞保持原状。用过的接种环要进行再次消毒，转接的菌种在37℃培养24小时。重复一次，取第三代菌株作为测试菌株。2.4抗菌涂层瓷砖测试实验2.4.1制备测试菌液用接种环挑取培养好的第三代测试细菌，均匀分散到少量的1/500NB（营养肉汤）中，参考相关文献[32],通过合适的方法使稀释液的细菌数量2.5x105~10x105个/ml，使用这种菌液作为测试液。2.4.2准备测试样品把6种样品切割成标准尺寸50mmx50mm（厚度为10mm以内）的正方形，每种准备两片，作为实验组；将无抗菌加工的测试片切成与抗菌加工测试片相同大小，准备2片作为空白对照组。2.4.3接种细菌将7组共14块瓷砖分别放入无菌平皿中，实验测试面（即抗菌加工面）朝上，实验测试面即为实施抗菌加工的制品表面。分别吸取0.3ml两个菌株的测试液，并滴入各个平皿中的测试片表面，用灭菌镊子在接种菌液上方覆上无菌薄膜，轻压覆盖膜使菌液平铺到膜的各个边缘，膜下无气泡，菌液均匀接触样品，37℃培养24小时。2.4.4菌液的洗脱用无菌镊子将薄膜和测试片放入无菌袋中，注意不要将菌液洒漏，加入10ml的洗脱液，并用手或振荡器充分洗涤薄膜和瓷砖。取1ml洗脱液置于含9ml灭菌PBS试管中，充分混合，再从这个测试管中吸取1ml测试液到另外一个装有9mlPBS的试管中充分混合，重复，稀释成10倍系列，共三组，即原液，10-1，10-2稀释液。2.4.5活菌数计算稀释洗脱液各取1ml与15-20mlNA（预热到48℃）充分混合，在缓慢倾倒至平皿中，平皿加上盖子，放置于室温，凝固后将培养皿倒置，在37℃培养48小时。计算各组的细菌菌落数，根据下列公式计算活菌数：N＝（C×D×V）/A其中N：每个测试片每cm2的活菌数；C：菌落数；（平皿中读取的菌数）D：稀释倍数，V：用于洗脱的培养基溶液的体积（ml）；A:薄膜覆盖的面积（cm2）保留二个有效数字记录活菌数，第三位数字采用四舍五入。菌落数C<1的情况下，以C为1对V、A、D的活菌数进行计算。比如V为10ml，A为16cm2，D为1的情况，用“<0.63”表示。2.4.6抗菌活性值计算根据JIS-Z-2801:2010标准，抗菌活性值大于2.0,可判定具有抗菌效果，抗菌活性值计算公式如下，保留小数一位，第二位小数用四舍五入。R=Ut-AtR:抗菌活性值Ut:无抗菌加工试验片接种后放置24h得到的活菌数对数值At:抗菌加工试验片接种后放置24h得到的活菌数对数值2.5纳米银涂层瓷砖的处理情况两组瓷砖进行抛光处理后，1#瓷砖组打两次含300ppm纳米银的A蜡；2#瓷砖第一次打含500ppm纳米银的A蜡，第二次打含100ppm纳米银的A蜡，起到填孔防污的作用。再进行不同方式的B蜡处理，具体处理情况见下表1。表1实验涂层瓷砖处理情况Table1Treatmentsofexperimentalcoatingceramictile组别瓷砖数/块处理情况1#2300*300ppm纳米银+A蜡，没上B蜡1#+B2300*300ppm纳米银+A蜡，上了油性B蜡，滑石粉去蜡1#+水B2300*300ppm纳米银+A蜡，上了水性B蜡+100ppm纳米银，滑石粉去蜡2#2500*100ppm纳米银+A蜡，没上B蜡2#+B2500*100ppm纳米银+A蜡，上了油性B蜡，滑石粉去蜡2#+水B2500*100ppm纳米银+A蜡，上了水性B蜡+100ppm纳米银，滑石粉去蜡K2空白样3结果3.16种纳米银涂层瓷砖对菌株洗脱原液的抑菌效果培养皿在37℃下培养48小时后结果如图1所示，空白涂层的平皿中有较多菌落生长，在6种纳米银涂层瓷砖中，1#，1#+B，1#+水B，2#，2#+B平皿中有较少菌落甚至无菌落生长，2#+水B平皿中金黄色葡萄球菌生长较多，大肠杆菌未生长。实验证明1#，1#+B，1#+水B，2#，2#+B对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌原液均有抑制效果，2#+水B对大肠杆菌原液有抑制效果，对金黄色葡萄球菌原液基本无抑制效果。金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌大肠杆菌空白K1＃1＃+B1＃+水B2#+水B2#+B2#空白2#+水B2#+B2#空白K金黄色葡萄球菌大肠杆菌原液（洗脱液）金黄色葡萄球菌大肠杆菌图1纳米银涂层瓷砖对菌株洗脱原液的抑菌效果图Figure.1Bacteriostaticeffectsofnano-silvercoatingceramictileonbacterialelutionsolution3.26种纳米银涂层瓷砖对10-1浓度稀释菌液的抑菌效果金黄色葡萄球菌大肠杆菌空白K1＃1＃+B1＃+水B培养皿在37℃下培养48小时后结果如图2所示，当菌液被稀释10倍时，空白涂层的平皿中两种菌落生长均较多，在6种纳米银涂层瓷砖中，1#，1#+B，1#+水B，2#，2#+B平皿中无菌落生长，2#+水B平皿中金黄色葡萄球菌生长较多，大肠杆菌未生长。实验证明1#，1#+B，1#+水B，2#，2#+B对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌10-1金黄色葡萄球菌大肠杆菌空白K1＃1＃+B1＃+水B2#+水B2#+B2#空白K2#+水B2#+B2#空白K金黄色葡萄球菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌大肠杆菌10-1稀释液图2纳米银涂层瓷砖对10-1浓度稀释菌液的抑菌效果图Figure.2Bacteriostaticeffectsofnano-silvercoatingceramictileon10-1dilutedbacterialsolution3.36种纳米银涂层瓷砖对10-2浓度稀释菌液的抑菌效果金黄色葡萄球菌大肠杆菌空白K1＃1＃+B1＃+水B培养皿在37℃下培养48小时后结果如图3所示，当菌液被稀释100倍时，空白涂层的平皿中两种菌落生长均较多，在6种纳米银涂层瓷砖中，1#，1#+B，1#+水B，2#，2#+B，2#+水B平皿中无菌落生长。实验证明1#，1#+B，1#+水B，2#，2#+B对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌10-2金黄色葡萄球菌大肠杆菌空白K1＃1＃+B1＃+水B2#+水B2#+B2#空白K2#+水B2#+B2#空白K金黄色葡萄球菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌大肠杆菌10-2稀释液图3纳米银涂层瓷砖对10-2浓度稀释菌液的抑菌效果图Figure.3Bacteriostaticeffectsofnano-silvercoatingceramictileon10-2dilutedbacterialsolution3.46种纳米银涂层瓷砖抑菌测试结果计算培养皿在37℃下培养48小时后计算活菌数及抗菌活性值，结果如表2，表3所示，在6种纳米银涂层瓷砖中，测得1#，1#+B，1#+水B，2#，2#+B两种细菌的抗菌活性值＞2，结果表明1#，1#+B，1#+水B，2#，2#+B涂层瓷砖对大肠杆菌，金黄色葡萄球均有抑制作用；2#+水B测得大肠杆菌的抗菌活性值＞2，测得金黄色葡萄球菌的抗菌活性值为0，结果表明2#+水B涂层瓷砖只对大肠杆菌有抑制作用，对金黄色葡萄球菌无抑制作用。表2六种抗菌涂层瓷砖对金黄色葡萄球菌的抑菌结果Table2Bacteriostaticresultsofsixantibacterialcoatingceramictilesagainststaphylococcusaureus组别活菌数抗菌活性值K5000/1#1.253.61#+B1.253.61#+水B1.883.42#1.253.62#+B＜0.633.92#+水B48750表3六种抗菌涂层瓷砖对大肠杆菌的抑菌结果Table3BacteriostaticresultsofsixantibacterialcoatingceramictilesagainstE.coli组别活菌数抗菌活性值K6750/1#＜0.634.01#+B0.634.01#+水B2.53.42#1.883.62#+B0.634.02#+水B1.253.7 4讨论试验结果显示，当用菌株原液及其稀释液处理多种纳米银涂层瓷砖并在37℃下培养48小时后，只有2#+水B（500*100ppm纳米银+A蜡，上了水性B蜡+100ppm纳米银，滑石粉去蜡）纳米银涂层瓷砖在被金黄色葡萄球菌处理后仍有菌落生长，其余平皿中有少量甚至无菌落生长。经计算发现，只有2#+水B对金黄色葡萄球菌的抗菌活性值为0，其余的抗菌活性值均>2。说明本次试验所选用的1#(300*300ppm纳米银+A蜡，没上B蜡)，1#+B(300*300ppm纳米银+A蜡，上了油性B蜡，滑石粉去蜡)，1#+水B(300*300ppm纳米银+A蜡，上了水性B蜡+100ppm纳米银，滑石粉去蜡)，2#(500*100ppm纳米银+A蜡，没上B蜡)，2#+B(500*100ppm纳米银+A蜡，上了油性B蜡，滑石粉去蜡)纳米银涂层瓷砖对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抑制效果，2#+水B涂层瓷砖只对革兰氏阴性菌有抑制作用，对革兰氏阳性菌无抑制作用。这些纳米涂层瓷砖的抑菌性能并无太大差异，其抑菌机理不够明确，抗菌耐久性还不清楚，尚有待进一步研究。目前，人们主张低碳环保，拒绝铺张浪费。在2016年的时候，国家以健康中国为我国战略，在建设健康中国的这条路上，坎坷不断，但社会企业仍然不服输，不断推进更加新鲜的产品，人们大部分都是觉醒的，他们团结一致，是市场资金的主要来源，给予了社会企业不断发展的动力。其中，令人专注的就是各种灭菌材料，它也是构成健康中国的主要部分，是促进中国迅速发展的隐形力量。根据毛羽晖等人的研究，将AgNO3掺入釉料中烧结制备抗菌釉并测定其抗菌耐久性[33]。此种研究方法相较于纳米银涂层瓷砖价格更低廉，操作更便捷，抗菌耐久性更好，且纳米银涂层瓷砖将不会对釉面质量及颜色产生影响,其抗菌性能也更好，不会受烧制过程中的高温影响。纳米银涂层瓷砖具有广袤的应用前景，它能够减少微生物的生长与传播，是保障健康环境的重要纳米材料，十分有必要进一步深入的展开研究。5结论1#，1#+B，1#+水B，2#，2#+B涂层瓷砖对大肠杆菌，金黄色葡萄球菌均有抑制作用；2#+水B涂层瓷砖只对大肠杆菌有缓解作用，对金黄色葡萄球菌没有缓解作用。其中2#+B对金黄色葡萄球菌的缓解效果最好，1#对大肠杆菌的缓解效果最好。参考文献梁一晗.浅谈纳米材料在口腔医学中的应用[J].世界最新医学信息文摘,2017,17(03):180.孔彬彬,于同立,郝鲁江.纳米材料抑菌作用及机理的研究[J].山东轻工业学院,2009年6月.TS959.9.LIANGGD,BAOSP,TJONGSC.Microstructureandpropertiesofpolypropylenecompositesfilledwithsilverandcarbonnanotubenanoparticlespreparedbymelt-compounding[J].MatSciEngB-Solid,2007,142(2/3):55-61.KORAA,RASTOGIL.Enhancementofantibacterialactivityofcappedsilvernanoparticlesincombinationwithantibiotics,onmodelgram-negativeandgram-positivebacteria[J].BioinorgChemAppl,2013:871097.于国玲,李晓黎,常建英,谢欣,马瑞见,别玉超,张继芳,王学克,李顺霞,丁志华.石墨烯纳米材料在涂料中的应用研究进展[J].涂层与防护,2020,41(03):37-40.向东喜,郑丛龙.纳米银抗病毒作用的研究进展[J].大连医科大学学报第31卷第6期,2009年12月.刘鑫,任艳,周子军,吴跃进,张从合,宋远辉.纳米银抗菌机理及应用研究进展[J].安徽农业大学学报,2017,44（4）:702-708.何伟,王翔,高莹,梁军才,于亭亭,范志宁.新型纳米银/聚氨酯胆道支架表面抗菌涂层的体外抑菌试验[J].中国组织工程研究与临床康复第15卷第3期，2011-01-15出版.徐瑞锟.纳米抗菌材料的研究进展[J].2013年4月第四十二卷第四期:371-374.胡云睿,奚廷斐.纳米银及其复合抗菌材料的研究[J].2013,12.翟纬坤,王轩,王源升,徐朝阳.聚乙烯醇/纳米银薄膜的制备及其对黄骨鱼保鲜效果的研究[J].包装工程,2020,41(09):44-50.刘天红,王颖,唐欢欢,于晓清,李红艳,纪蕾,李晓,赵旭东.两种纳米材料抑菌效果及对虾的保鲜效果研究[J].2020年3月第11卷第五期:1483-1486.叶伟杰,陈楷航,蔡少龄,陈利科,钟同苏,王小英.纳米银的合成及其抗菌应用研究进展[J].材料工程,2017,45(09):22-30.王云华,黄宁,于增国,周广运,郑永唐,郑丛龙.纳米银体外抗HIV活性的研究[J].现代预防医学2009年第36卷第21期.WangZX,ChenCY,WangY,LiFXZ,HuangJ,LuoZW,RaoSS,TanYJ,LiuYW,YinH,WangYY,HeZH,XiaK,WuB,HuXK,LuoMJ,LiuHM,ChenTH,HongCG,CaoJ,LiuZZ,LongZ,GanPP,SituWY,FanR,YuanLQ,XieH.Ångstrom-ScaleSilverParticlesasaPromisingAgentforLow-ToxicityBroad-SpectrumPotentAnticancerTherapy[J].FULLPAPER,2019:1808556(1-15).胡烈海,朱新根,余双,江从元,许恒毅.纳米银抗菌应用的研究进展[J].中国抗生素杂志，2019-11-20:1-6.曹雪玲,陆书来,张东杰,等.纳米银作为抗菌剂的抗菌性能研究[J].吉林化工学院学报,2017,34(11):30-34.PrabhuS,PouloseEK.Silvernanoparticles:mechanismofantimicrobialaction,synthesis,medicalapplications,andtoxicityeffects[J].IntNanLett,2012,2(1):32.MatsumuraY,YoshikataK,KunisakiSI,etal.Modeofbactericidalactionofsilverzeoliteanditscomparisonwiththatofsilvernitrate[J].ApplEnvironMicrob,2003,69(7):4278-4281.QingY,ChengL,LiR,etal.Potentialantibacterialmechanismofsilvernanoparticlesandtheoptimizationoforthopedicimplantsbyadvancedmodificationtechnologies[J].IntJNanomed,2018,13: