CN116157401B 杂环类衍生物及其制备方法和用途 （浙江海正药业股份有限公司）

2023.03.23PCT/CN2022/0836152022.03.29WO2022/227987ZH2022.11.03A,2022.09.27A,2022.10.18A,2023.04.14A,2023.10.03A,2023.11.24A,2024.03.15式(I)所示的杂环类衍生物、其制备方法及其可药用的盐，以及它们作为治疗剂，特别是作为22.根据权利要求1所述的化合物或其可药用的盐，其中选自以下基团：5.一种药物组合物，所述的药物组合物含有有效剂量的6.根据权利要求1～4中任何一项所述的化合物或其可药用的盐或根据权利要求5所述37.根据权利要求1～4中任何一项所述的化合物或其可药用的盐或根据权利要求5所述的药物组合物在制备治疗由KRasG12D突变介导的疾病的药物中的用途，其中所述的由4[0002]RAS代表一组紧密相关的单体球状蛋白质(21kDa分子量)，其具有189个氨基酸且具有极低的将GTP水解回到GDP并由此将自身变为关闭状态的固有能力。将RAS转换为关闭[0003]在结构上，RAS蛋白包含负责RAS的酶促活性鸟嘌呤核苷酸结合和水解(GTP氨酸35和甘氨酸60与GTP的γ磷酸所形成的氢键，其使开关I区和开关II区分别维持它较为少见。KRAS突变在美国三大致命癌症类型中普遍存在：胰腺癌(95％)、结肠直肠癌5大肠肿瘤、非小细胞肺癌和胰腺癌等疾病。目前公开为数不多的KRasG12D抑制剂专利申究和应用已取得一定的进展，但是提高的空间仍然巨大，仍有必要继续研究和开发新的5556555556R76R75588R109R102NR9R10或_NR9C(O)R10的取代基所取代；8889R109R102NR9R10或_NR9C(O)R10的取代基所取88R109R102NR9R10或_NR9C(O)R10的取代基所取代；7和n的定义如通式(I)中所述。CH2CH2_或89病人一种药物组合物，所述的药物组合物含有有效剂量的通式(I)或(II)所述的化合物或[0062]本发明还提供了一种通式(I)或(II)所述的化合物或其立体异构体、互变异构体或其可药用的盐，或其药物组合物在制备治疗由KRasG12D突变介导的疾病的药物中的用[0065]本发明还提供了一种通式(I)或(II)所述的化合物或其立体异构体、互变异构体而产生单一剂型的活性成分的量通常指的是能够产生治疗效果具有5至7元单环或7至10元双或三环，其可以包含1，2或直接相连接的原子的多环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具“桥杂环基”的非限制性实施例包括但不限于：2一氮杂二环[2.2.1]庚基 C6的烷氧基为优。。2苯基。领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取5556R789R102NR9R10或_NR9C(O)R10的取代基所取代；8889R109R102NR9R10或_NR9C(O)R10的取代基所取88R109R102NR9R10或_NR9C(O)R10的取代基所取代；异构体和阻转异构体(atropisomer)和几何(构象)异构体及它们的混合物，如外消旋体混[0127]“可药用的盐”是指上述化合物能保持原有生物活性并且适合于医药用途的某些[0128]“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上可药用的盐或[0131]本发明通式(I)所述的化合物或其立体异构体、互变异构体或其可药用的盐的制[0133]通式(IA)化合物和通式(IB)化合物在钯催化剂及碱性试剂的作用下进行SuzukiR4[0139]以下结合实施例用于进一步描述本发明，但这些实施例并非限制着本发明的范[0141]实施例给出了式(I)所表示的代表性化合物的制备及相关结构鉴定数据。必须说明，下述实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。1HNMR图谱是用Bruker仪器[0143]薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm~7aS)2fluorotetrahydro1Hpyrrolizin7a(5H)yl)methoxy)pyrido[4，3d]pyrimidin7yl)5fluoronaph[0164]将(1R，5S)8(2，78氟2(((2R，7aS)2氟四氢1H吡咯嗪7a(5H)基)甲氧基)吡啶并[4，3d]嘧啶4(methoxymethoxy)naphthalen一1yl)2(((2R，7aS)2fluorotetrahydro1Hpyrrolizin7a(5H)yl)烷3羧酸叔丁酯1f(168.79mg，508.14μmol)、磷酸钾(231.14mg，1.09mmol)和cataCXiumAPd一G37aS)2fluorotetrahydro1Hpyrrolizin7a(5H)yl)methoxy)pyrido[4，3d]pyrimidin7yl)5fluoronaph减压浓缩，得到的残留物通过制备液相分离纯化(分离柱AKZONOBELKromasil；250×7a(5H)_基)甲氧基)吡啶并[4，3_d]嘧啶_7_基)_5_氟萘_2_醇17aS)_2_fluorotetrahydro_1H_pyrrolizin_7a(5H)_yl)methoxy)pyrido[4，3_d]pyrimidin_7_yl)_5_ethynyl_6_fluoronapht[0182]tert_butyl(1R，5S)_8_(8_fluoro_7_(7_fluoro_3_(methoxymethoxy)_8_中，氩气保护，加热到110℃反应2小时。反应结束后，加入水(10mL)，以乙酸乙酯萃取[0187]tertbutyl(1R，5S)8(7(8ethynyl7fluoro3(methoxymethoxy)naphthalen一1yl)8fluoro2(((2R，7aS)2fluorotetrahydro1Hpyrrolizin7a环[3.2.1]辛烷3羧酸叔丁酯7aS)2fluorotetrahydro1Hpyrrolizin7a(5H)yl)methoxy)pyrido[4，3d]pyrimidin7yl)5ethynyl6fluoronapht7aS)2fluorotetrahydro1Hpyrrolizin7a(5H)yl)methoxy)pyrido[4，3d]胺[0202]tertbutyl(1R，5S)8(7(2((tert一butoxycarbonyl)amino)5，7pyrrolizin7a(5H)yl)methoxy)pyrido[4，3d]pyrimidin4yl)3，8diazabicyclo[3.2.1]octane3carboxylate到产物(1R，5S)8(7(2((叔丁氧羰基)氨基)5，7二氟苯并[d]噻唑4基)8氟27aS)2fluorotetrahydro1Hpyrrolizin7a(5H)yl)methoxy)pyrido[4，3d]胺8基)8氟2(((2R，7aS)2氟四氢1H吡咯嗪7a(5H)基)甲氧基)吡啶并[0213]以下方法用于测定本发明化合物对AGS细胞中p一ERK1/2抑制活性。本方法使用细胞上清，使用冰浴的PBS清洗细胞，之后每孔加入50μl的1×cellphospho/totalproteinlysisbuffer(Advancedphospho_ERK1/2试剂盒组分)进行裂解，96孔板置于冰[0215]本发明优选化合物对AGS细胞中p_ERK1/2活性具有明显的抑制作用，优选化合物[0217]以下方法用于测定本发明化合物对AsPC_1(转移胰腺腺癌)细胞增殖的影响。AsPC_1细胞(含有KRASG12D突变)购于中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心，培培养基中。细胞活力通过CellTiter_GloLuminescentCellViabilityAssay试剂盒1000nM_0.015nM。将处于对数生长期的细胞以800个细胞每孔的密度接种至96孔细胞培养仪上使用Luminescence模式读取样品各孔发光值。通过与对照组(0.3％DMSO)的数值进行[0219]本发明优选化合物对AsPC_1细胞增殖具有明显的抑制作用，优选化合[0221]以下方法用于测定本发明化合物在体外条件下阻断KRASG12D：RAF1蛋白相互作用的能力。本方法使用Cisbio公司的KRAS_G12C/SOS1BINDINGASSAYKITS试剂盒[0222]将实验流程简述如下：使用diluentbuffer(货号62DLBDDF)配置Tag1_RAF1和Tag2_KRAS_G12D蛋白为5X的工作液浓度备用。受试化合物溶解于DMSO中制备为10mM贮存浓度为10000nM_0.1nM)，随后加入4uLTag1_RAF15X的工作液和4uLTag2_KRAS_G12D5X通过GraphPadPrism5软件以受试化合物浓度