CN116087371B 一种快速分析血浆中多种氨基酸的液相色谱串联质谱的方法 （中国科学院生物物理研究所）

一种快速分析血浆中多种氨基酸的液相色本发明公开了一种快速分析血浆中多种氨2按照摩尔浓度计算，用移液器分别将一定体积的单个氨基酸储备液加入到离心管中，再用纯净水将1000umol/L的标准品溶液分别稀释至700umol/L和400u将100uL待测血浆或氨基酸标准曲线工作液与100uL的氨基酸内标混合液以及800uL乙S3、液相色谱和串联质谱的实验：使用高效液相色谱在用液相色谱串联质谱法进行氨基酸定量的流程中,使用了氨基酸的稳定同位素作为样本中各个氨基酸的浓度通过标准曲线的拟合方2.根据权利要求1所述的一种快速分析血浆中多种氨基酸的液相色谱串联质谱的方3.根据权利要求2所述的一种快速分析血浆中多种氨基酸的液相色谱串联质谱的方4.根据权利要求1所述的一种快速分析血浆中多种氨基酸的液相色谱串联质谱的方以梯度的方式按0.6mL/min的流速通5.根据权利要求1所述的一种快速分析血浆中多种氨基酸的液相色谱串联质谱的方6.根据权利要求5所述的一种快速分析血浆中多种氨基酸的液相色谱串联质谱的方34速分析血浆中多种氨基酸的液相色谱串联质白质分子的基本组成单位和维持内稳态重要的物质基础。其生理功能涉及人体生长发育、5[0010]将26种氨基酸标准品粉末分别准确称重，加入到纯净水中，充分混匀，制备成释至100,70,40,10,7,4,1,0.7,0.4umol/L(STD10_STD1)；即可完成标准曲线工作液[0015]将100uL待测血浆或氨基酸标准曲线工作液与100uL的氨基酸内标混合液(氨基酸内标使用的是氨基酸的稳定同位素化合物，每一种氨基酸内标的浓度为50umol/L)以及[0018]在用液相色谱串联质谱法进行氨基酸定量复溶两个样本前处理步骤，可以使得离心后的上清液直接进入液相色谱串联质谱进行分6候使用了100uL的血浆，但是由于在进行液相色谱串联质谱检测时仅需要10uL的离心后上[0028]本方法对26种氨基酸中的同分异构体，比如亮氨酸和异亮氨酸(分子量均为146.1)以及天冬氨酸(分子量为133.17[0046]将26种氨基酸标准品粉末分别准确称重，加入到纯净水中，充分混匀，制备成释至100,70,40,10,7,4,1,0.7,0.4umol/L(STD10_STD1)；即可完成标准曲线工作液[0051]将100uL待测血浆或氨基酸标准曲线工作液与100uL的氨基酸内标混合液(氨基酸内标使用的是氨基酸的稳定同位素化合物，每一种氨基酸内标的浓度为50umol/L)以及[0054]在用液相色谱串联质谱法进行氨基酸定量STD13)按照每个浓度水品的工作液平行处理3个重复样本的方式进行前处理，然后进入液浓度的样本血浆中分别加入低和高浓度的氨基酸标准品混合液，制备出2个浓度的加标样表明这26种氨基酸在2浓度范围的批内和批间的加标回收率均在85％_115％之间，方法的8标准曲线工作液的最高浓度混合液，然后用水将此标准品溶液分别稀释至700umol/L和9用50uL血浆+50uL氨基酸内标混合溶液+400uL乙腈；10uL血浆+10uL氨基酸内标混合溶液+[0071]另外常用的两种血浆沉淀剂为乙腈和甲醇，本发明优选了乙腈作为血浆的沉淀[0072]本方法对26种氨基酸中的同分异构体，比如亮氨酸和异亮氨酸(分子量均为146.1)以及天冬氨酸(分子量为133.1