CN116940338B 涂覆有改善皮肤的有效成分和钻石的海绵骨针的制备方法、及包含其的钻石海绵骨针化妆品组合物 （株式会社博恩）

2022.10.18PCT/KR2022/0123762022.08.19WO2023/163298KO2023.08.31涂覆有改善皮肤的有效成分和钻石的海绵该方法制备的海绵骨针及包括其的化妆品组合的海绵骨针化妆品组合物具有优异的经皮渗透2（d）使所述涂覆有二氧化硅的海绵骨针与氨基硅烷和聚赖氨酸发生反应来涂覆氨基；所述第二有效成分是从由胶原蛋白、氨基酸、三肽及四肽组成的群组中选择的至少一所述第一有效成分及第二有效成分是相同或不同3[0009]本发明要解决的技术课题涉及经皮吸收优异的海绵骨针[0010]本发明的另一课题是提供一种含有根据所述方法制备的海绵骨针的化妆品组合术人员可以通过下面的记载内容明确理解其他未4[0017](d)使所述涂覆有二氧化硅的海绵骨针与氨基硅烷和赖氨酸(lysine)发生反应来[0019]根据一方面，所述步骤(d)的氨基硅烷可以是3_氨基丙基三甲氧基硅烷(3_[0034]图5是根据本发明制备方法的包含针状结构的化妆品组合物的皮肤剥离效果评[0035]图6是根据本发明制备方法的包含针状结构的化妆品组合物的眼周皱纹改善效果[0037]图8是显示本发明的包含改性海绵骨针的化妆品组合物在NHDF细胞中的胶原蛋白5[0038]图9是显示本发明的包含改性海绵骨针的化妆品组合物在NHDF细胞中对生成胶原[0039]图10是显示本发明的包含改性海绵骨针的化妆品组合物3及包含正常海绵骨针的[0040]图11是对比本发明的包含改性海绵骨针的化妆品组合物3及含有未涂覆钻石的海[0041]图12是显示本发明的包含改性海绵骨针的化妆品组合物3及含有未涂覆钻石的海[0042]图13是对比本发明的包含改性海绵骨针的化妆品组合物3及含有未涂覆钻石的海[0043]图14是显示本发明的包含改性海绵骨针的化妆品组合物3及含有未涂覆钻石的海[0044]图15是对比本发明的包含改性海绵骨针的化妆品组合物3及含有未涂覆钻石的海孔中包合第一有效成分的步骤；(c)在所述内孔中包合有第一有效成分的海绵骨针的外部涂覆二氧化硅的步骤；(d)使所述涂覆有二氧化硅的海绵骨针与氨基硅烷和赖氨酸(lysine)发生反应来涂覆氨基的步骤；及(e)在所述涂覆有氨基的二氧化硅上涂覆第二有或X型结构。具体地，海绵骨针可以是单轴(Monoaxon)型、三轴(Triaxon)型、四轴(Tetraxon)型或多轴(Polyaxon)型。并且，所述三轴(Triaxon)型又可以是三辐6[0056]所述二氧化硅的具体示例有原硅酸四乙酯(tetraethylorthosilicate)、硅氧烷[0057]所述海绵骨针表面可包含氨基涂层。所述氨基涂层是指含有氨基的物质的涂所述氨基涂层是指在海绵骨针表面涂覆末端包括氨基的物[0063]所述步骤(a)的所述洗涤是为了去除存在于针状主体内孔中的杂质，可以用净化7(tetraethylorthosilicate)发生反应来实现。所述二氧化硅涂覆过程可通过改性针状主件下反应30分钟至2小时，并可以包括使用50至300MPa压力加压1至10分钟的超高压处理。[0066]根据一方面，所述步骤(d)的氨基硅烷可以是3_氨基丙基三甲氧基硅烷(3_aminopropyltrimethoxysilane)，所述步骤(d)的赖氨酸可以是聚_L_赖氨酸(poly_L_[0073]所述化妆品组合物中所含的改善皮肤的有效成分可包括改善与提高皮肤机能的[0076]上述根据发明的一实施例的化妆品组合物还包括在化妆品组合物领域通常使用8[0084]在没有其他定义的情况下，包括技术或者科学术语在内[0088]将从俄罗斯产淡水海绵L(SpongillalacustrisL)中提取的海绵骨针作为针状935％过氧化氢(H2O2)(三川化学公司)中，在60℃下利用超声波清洗机(Sungdong[0091]在100g的所述洗涤过的海绵骨针中添加500ml1NHCL(Sigma_Aldrich公司后反应1小时，再添加500ml1NNaOH(Sigma_Aldrich公司)进行中和。之后添加1000ml的[0092]将10g含有海绵骨针和作为第一有效成分的胶原蛋白的混合液放入塑料袋中真空(Fluorescein_5_isothiocyanate(FITC),赛默飞世尔科技公司)的胶原蛋白(Sigma_[0099]除了改变用于涂覆氨基的溶液组成之外，按照与所述实施例1相同的方式进行制[0101]除了改变用于涂覆氨基的溶液组成之外，按照与所述实施例1相同的方式进行制[0103]除了改变用于涂覆氨基的溶液组成之外，按照与所述实施例1相同的方式进行制飞世尔科技公司)的胶原蛋白(Sigma_Aldrich公过程即可获取仅海绵骨针的外面具有钻石和胶原蛋白的针状[0107]获得仅通过所述实施例1_1至1_3的过程获得的仅涂覆二氧化硅的海绵骨针。之[0109]在1重量份的仅通过所述实施例1_1至1_3的过程获得的仅涂覆二氧化硅的海绵骨针中添加0.01重量份的3_氨基丙基三甲氧基硅烷(3_aminopropyltrimethoxysilane)溶液之后，添加0.01重量％的结合有荧光物质FITC结合的胶原蛋白(Sigma_Aldrich公司)和纳[0110]表1整理出了所述比较例及实施例的海绵骨针的制备条件和所得海绵骨针结构外[0121]使用所述表1中的比较例2及实施例1至4的海绵骨针制备辛酸酯/二癸酸酯进行混合并在60℃温度下加热溶解，加入制备的水性裂解物并以1,实施例1至4)化妆品组合物总重量，再添加2重量并在60℃下以2000rpm的速度搅拌5分骨针所得到的化妆品组合物分别称作组合物1及组合物2，将调配所述实施例4的海绵骨针[0123]为确认所述3_1中获得的组合物1至3的皮肤吸收(渗透)程度进行如下实验。分别切片是通过以下过程获得：将0.25g的所述组合物每10分钟均匀涂抹至猪皮(2×2cm)上并稳定20分钟，再用1X磷酸缓冲盐溶液(PBS)洗涤3次后，放入切削温度化合物(Optimal0.20.522.3[0129]角质剥离率(％)＝(空白的周转时间(Turnovertime)_涂抹试样时的周转时间(Turnovertime))/(空白的周转时间(Turnovertime))*100空白的周转时间(Turnover[0133]为了确认组合物3的皮肤抗衰老效果，根据世明大学化妆品临床研究支持中心的(r_HumanFibroblastGrowthFactor_B，rhFGF_B)、胰岛素(INSULIN)、硫酸庆大霉素(Gentamicinsulfate)、两性霉素(GA1000)成纤维细胞基础培养基(FBM)是从Lonz公司[0139]从Lonz公司(USA)购买人成纤维细胞株的常人类真皮成纤维细胞(NormalHuman[0141]将所述培养的NHDF细胞以2.0×104细胞/孔的浓度接种到24孔板中培养24小时，然后将各实验组的培养基换成无血清成纤维细胞基础培养基(serum_freeFBM)后再培养[0144]将所述NHDF细胞以2.0×104细胞/孔的浓度接种到24孔板中培养24小时，然后将胶原C端肽(PIP)EIA试剂盒测量培养基中释放的原胶原蛋白的量。用VERSAmax酶标仪[0147]将所述NHDF细胞以2.0×104细胞/孔的浓度接种到24孔板中培养24小时，然后换成包含以不同浓度稀释的试样的serum_freeFBM后再培养24小时。培养24小时后，用次以上独立实验的结果，通过独立样本t检验(Independentt_test)在p<0.05的显著性水[0156]对实验进行说明后，对同意参加实验并签署同意书的实验对象进行如下表4所示[0162]皮肤吸收度用3D拉曼显微镜系统Nanofinderg30(TOKYOINSTRUMENTS公司，日上进行三维拉曼扫描，分别在产品使用前和使用后30分钟进行测量。用于测量的激光为用在产品使用前和使用30分钟后的皮肤吸收度变化量乘以5μm来换算，皮肤吸收速度可用[0167]并且，组合物3与包括未涂覆钻石的海绵骨针的对照组的组合物1相比，显示出[0195]实验产品的安全性是综合了所有使用实验产品的实验对象的异常反应和实验期