Elispot技术全景解读原理操作要点及行业应用_第1页
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文档简介

ELISpotCONTENT123

ELISpotELISpotELISpot4ELISpot01ELISpotELISpot/Enzyme-Linked

ImmunoSpot

Assay,

ELISpotELISpot

PVDFPVDFELISpot

ReaderELISAELISpotELISAELISpotELISpot

ELISA96PVDF

96ELISpot•••••FluoroSpot•••Don

MasonBSedgwichCzerkinskyELISpot01030502044

/60ELISpotELISpot02ELISpotELISpotELISpot

Tanti-IgG/biotinIgGBiotinIgGanti-IgGIgGanti-IgGanti-IgG/biotinIgG

ELISpotTotal

IgG

ELISpotELISpot

BELISpotALPSABiotinSASASA“”-

-ELISpot1ELISpot24ELISpotELISpot50-150μmELISpotHRPTMBALPBCIP/NBTHRPAEC••ELISpotAID

iSpot

Reader/ELISPOTELISpotELISpotSFC

(Spots

Forming

cell)APC(μg/ml)/PHA2-205,000-400,000/well100,000/well16-36h/18hConA4-40Ionomycin0.5-1PMA50-100T

cell

epitope1-1050,000-600,0000/well200,000/well16-24h/18hpeptide4-40200,000-600,0000/well300,000/well24-36h/30hprotein10-100300,000-600,0000/well400,000/well24-36h/30hELISpotmouseIL-2ELISpot2x105/ELISpot2≥

2+

2

SD≥

+

2NIH+

3

SD≥

+

3Cut-offSFC≥10

≥2FDA/EMANumber

ofSpots4377SFC201883-+++--++1.••••2.5x105/1x105/0.5x105/ELISpot

-2.PVDF•••••PVDFELISpot3.•DNA/•10min•PBS

5200μL•PBSELISpot4.305•PBS•ELISpotELISpot03ELISpotELISpotHIVELISpotELISpot

TELISpotHIVELISpotT51PBMCs71μg-60μgIFN-γ1CD4+ELISpot29

1-50μgCD8+TELISpotELISpotCAR-TT

ex

vivo

ELISpot CAR-T

+

Vax

TLeyuan

Ma,

AlexanderHostetler,

Duncan

M.

Morgan,

et

al.

Vaccine-boosted

CAR

T

crosstalk

with

host

immunity

to

rejecttumors

with

antigen

heterogeneity

[J]

Cell,

July

20,

2023.04ELISpotPre-coated

microplate1plate

(96

tests)Detection

Antibody1

vialStreptavidin-ALP1

vialBCIP/NTB-plus

Dilution1

bottleBCIP/NTB-plus

Solution

A1

bottleBCIP/NTB-plus

Solution

B1

bottlepositive

stimulation

reagent1

vialMouse

IFN-γ

(ALP)

ELISpot

KitEK50709AMouse

IL-2

(ALP)

ELISpot

KitEK51061AMouse

IL-4

(ALP)

ELISpot

KitEK51084AMouse

TNF-α

(ALP)

ELISpot

KitEK50349AHuman

IL-2

(ALP)

ELISpot

KitEK11848AHuman

IL-4

(ALP)

ELISpot

KitEK11846AHuman

IFN-γ

(ALP)

ELISpot

KitEK11725AELISpotMouse

IFN-γ

ELISpot

KitSino

BiologicalCompetitor

MELISpotMouse

IFN-γSino

Biological

cat

EK50709AInternational

brandsELISpot33357313392353360386333292423530224382417292430PBS01+PBS02+PBS03ELISpotELISpotELISpot/Human

or

mous

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