CN119386194A 用于形成聚复合物的方法 （安瑞特基因有限公司）

201980079914.22019.12.30聚复合物在基因治疗应用中用作安全且无毒的2(b)使所述第一液体流中的所述聚合物与所述第二液体流中的所述核酸组分接触，以2.如权利要求1所述的方法，其中所述分离包括在液体通道中输送所述聚复合物持续3.如前述权利要求中任一项所述的方法，4.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第7.如前述权利要求中任一项所述的方法，3[0001]本申请是申请日为2019年12月30日、申请号为201980079914.2(国际申请号为[0003]本申请要求于2018年12月28日提交的美国临时申请62/786,制介质的组成和聚合物与核酸组分的比率的几个因素会影响聚复合物的转染效率和生物[0011](b)使所述第一液体流中的所述聚合物与所述第二液体流中的所述核酸组分接4566三甲基双环[3.1.1]庚基以及它们的环2酮、异噻唑烷1,1二氧化物、4,5二氢1H咪唑基、4,5二氢噁唑、环氧乙烷基7芳基可指示环烷基通过键或通过与芳基稠合并且共享两个或更多个共同原子而连接到芳团。如果没有另外说明，则在所述基团的任选取代中使用的合适取代基包括但不限于氧16烷基16烷氧基1_CH2OC(O)C1_C6烷8通过NatureTechnology获得专[0052]本公开提供用于制造聚复合物的方法，其中所述方法包括将聚合物和核酸组分[0053]用于制备聚复合物的常规过程为将合适聚合物的溶液与合适DNA(或RNA)的溶液混合作准备。所得混合物通常通过静电相互作用在DNA(或RNA)和聚合物之间形成络合物。述的方法提供通过在受控条件下接触选定体积和浓度的DNA和聚合物溶液从而可控制地形成此类聚复合物，从而使所得的聚复合物具有相对狭窄且定义明确的聚复合物特性分布9法来丢弃特性超出定义的制造规格的聚复合物，和/或选择并分离满足定义的制造规格的[0058](b)使所述第一液体流中的所述聚合物与所述第二液体流中的所述核酸组分接率流过流量调节装置，所述速率提供具有适合于经皮给药或注射的尺寸和电荷的聚复合[0067]在一些实施方案中，所述方法在约500毫巴到约2巴的压力下进行，包括约500毫[0072]以下实施方案提供使含聚合物的第一液体流和含核酸的第二液体流接触的方法喷嘴将受控量的核酸组分在由传感器(例如照相机)通过控制系统确定的指定时间和位置注入到油/液体通道中，第二喷嘴将含聚合物的第一液体流注入到含核酸的第二液体流中两个微流体流(例如含聚合物的第一液体流和含核酸的第二液体流)合在一起形成聚复合含聚合物的第一液体流和含核酸的第二液体流在从各自的喷嘴或微流体流中排出之后会案中，将含聚合物的第一液体流和含核酸的第二液体流分别进料到两个同心取向的管中，些实施方案中，将含聚合物的第一液体流和含核酸的第二液体流在管情况下进料到管中，[0082]在一些实施方案中，第一液体流和第二液体流的体积各自独立地为约1μL到约合聚合物和核酸组分之后形成时)持续足以使聚复合物稳1,糖醇三硬脂酸酯)或Tween20(聚[0098]在一些实施方案中，添加添加剂至在水相中的最终浓度为10mg/mL到50mg/mL之除折射率不符合规格的聚复合物。聚复合物的折射率与适当形成的聚复合物的期望属性[0108]b)收集确定量的液体聚复合物的等分样品并且冷冻所述等分样品以用于治疗用[0115]在一些实施方案中，首先高度支化的聚(b_氨基酯)[例如，那些在Biomacromolecules2016，17，3640_3647；[0130]Z是1到30个碳原子的线性或分支碳链、1到30个原子的含杂原子的线性或分支碳其中x为1到1000；C6亚砜[0132]A为1到30个碳原子的线性或分支碳链、2到30个原子的含杂原子的线性或分支碳1C6醚1C6砜16亚砜1C6仲酰16烷基216烷基16烷2116烷基1_C616醚16硫醚16砜16亚砜1116烷基16烷氧基16醚16硫醚16砜16亚其中x为1到1000。1C6醚16硫醚16砜16亚砜11_C6烷C6烷基1C6醚1C6硫醚1C6砜1C6亚砜1C6烷[0144]在一些实施方案中，Z是1到30个碳原子的线性或分支碳链或1到30个原子的含杂[0147]以及在一些W人并且R2为"入并且开的聚合物具有在约5kDa与50kDa之间的MW。在一些实施方案中，本公开的聚合物具有约[0193]在一些实施方案中，聚合物和核酸组分以约0.1:1到合物和核酸组分以约20:1到约80:1(w/w)的比率存在于聚聚复合物的粒度小于约300nm。在一些实施方案中，稳定的聚复合物的粒度为约50nm、约的是约10mV和40mV的ζ电势。[0202]在一些实施方案中，核酸组分是RNAi诱导分子。RNAi诱导分子可选自由siRNA、功能失调。在一些实施方案中，基因选自由以下各项组成的组：COL7A1、LAMB3、ADA、解症、网状色素性皮肤病、内格里_弗朗切斯基_贾达索恩(Naegeli_Franceschetti_病。[0215]在一些实施方案中，步骤(b)的一种或多种药学上可接受的赋形剂包含冷冻保护[0218]实例1.[0219]合成示例性超支化PAE(HPAE)聚合物：将0.28克三羟甲基丙烷三丙烯酸酯毫升DMSO中，并在90℃下反应。一旦分子量在5000Da到7000Da的范围内，则加入溶解在[0226](b)使所述第一液体流中的所述聚合物与所述第二液体流中的所述核酸组分接[0228]2.如实施方案1所述的方法，其中所述[0241]15.如实施方案14所述的方法，其中所述油选自由以下各项组成的组：(a)[0244]18.如实施方案17所述的方法，其中所述聚山梨酯添[0246]20.如前述实施方案中任一项中任[0247]21.如实施方案20所述的方法[0248]22.如实施方案2至21中任一项所述的方法，其[0254]26.如前述实施方案中任一项所述[0259]31.如前述实施方案0.1:1到约200:1(w/w)的比[0262]34.如前述实施方案中任一项所述的[0263]35.如实施方案34所述的方法，其中所述稳定的[0270]42.如实施方案41所述的方法，其中所[0271]43.如实施方案42所述的方法，其中[0273]45.如实施方案44所述的方法，其中所述基因是C[0274]46.如实施方案45所述的方法，其