《医学免疫学》第二十二章 免疫学检测技术 单元试卷

《医学免疫学》第二十二章免疫学检测技术单元试卷考生信息姓名：______学号：______班级：______考试时间：90分钟总分：100分一、单项选择题(本大题共20小题，每小题1分，共20分。在每小题列出的四个备选项中，只有一个是符合题目要求的。)免疫学检测技术的基础是：A.补体活化反应B.抗原抗体特异性结合反应C.细胞因子与受体结合D.免疫细胞吞噬作用下列哪项不是抗原抗体反应的特点？A.高度特异性B.可逆性结合C.可见性D.需要适宜的酸碱度和电解质利用颗粒性抗原与相应抗体结合，在适量电解质存在下，出现肉眼可见凝集团块的反应，称为：A.沉淀反应B.凝集反应C.中和反应D.补体结合反应用已知抗体检测未知抗原的直接凝集试验是：A.肥达试验B.外斐试验C.ABO血型鉴定D.抗“O”试验用已知的颗粒性抗原检测患者血清中相应抗体的直接凝集试验是：A.肥达试验B.协同凝集试验C.胶乳凝集试验D.免疫比浊法将可溶性抗原或抗体吸附在一种与免疫无关的颗粒载体上，再与相应抗体或抗原进行凝集反应，此方法称为：A.直接凝集反应B.间接凝集反应C.沉淀反应D.免疫标记技术以红细胞作为载体的间接凝集试验称为：A.胶乳凝集试验B.协同凝集试验C.间接血凝试验D.抗球蛋白试验检测血清中梅毒抗体的非特异性试验(如RPR、TRUST)属于：A.直接凝集反应B.沉淀反应C.间接凝集抑制反应D.中和反应可溶性抗原与相应抗体结合，在两者比例合适时，形成肉眼可见的沉淀物，此反应称为：A.凝集反应B.沉淀反应C.补体结合反应D.免疫标记反应在琼脂糖凝胶中进行的沉淀反应，抗原和抗体分别从不同位置向中间扩散，在比例合适处形成白色沉淀线，此方法称为：A.单向免疫扩散B.双向免疫扩散C.免疫电泳D.火箭电泳将双向免疫扩散与电泳技术结合，先将抗原在凝胶中电泳分离，再与抗体进行扩散反应的方法是：A.免疫电泳B.火箭免疫电泳C.免疫比浊法D.免疫印迹法将抗原或抗体用酶、荧光素、放射性核素等标记，再与相应抗体或抗原反应，通过检测标记物来测定待检物的方法，统称为：A.凝集试验B.沉淀试验C.免疫标记技术D.中和试验酶联免疫吸附试验(ELISA)中，最常用的酶是：A.碱性磷酸酶(AP)B.葡萄糖氧化酶C.辣根过氧化物酶(HRP)D.β-半乳糖苷酶用荧光素标记抗体，与待检抗原反应，在荧光显微镜下观察荧光，从而定位或定性抗原的方法是：A.酶免疫技术B.放射免疫技术C.荧光免疫技术D.化学发光免疫技术流式细胞术(FCM)主要用于：A.检测可溶性抗原浓度B.分离和鉴定细胞亚群C.观察组织切片中的抗原D.测定抗体亲和力能够同时对单个细胞进行多参数、快速定量分析及分选的技术是：A.免疫印迹法B.免疫组化C.流式细胞术D.免疫比浊法用于检测细胞免疫功能的皮肤试验是：A.青霉素皮试B.破伤风抗毒素皮试C.结核菌素试验D.血清过敏试验淋巴细胞转化试验中，最常用的非特异性有丝分裂原是：A.抗原B.刀豆蛋白A(ConA)C.抗CD3单克隆抗体D.脂多糖(LPS，主要刺激B细胞)细胞毒性T细胞(CTL)的特异性杀伤功能检测，常用方法是：A.MTT法B.³H-TdR掺入法C.乳酸脱氢酶(LDH)释放法D.流式细胞术检测细胞凋亡能够测定单个抗体形成细胞，并可用于抗体亲和力测定的经典方法是：A.酶联免疫斑点试验(ELISPOT)B.溶血空斑试验C.淋巴细胞转化试验D.细胞毒试验二、多项选择题(本大题共10小题，每小题2分，共20分。在每小题列出的五个备选项中，至少有两个是符合题目要求的，错选、多选、少选或未选均无分。)抗原抗体反应的特点包括：A.高度特异性B.表面可逆结合C.需要合适的比例D.分两个阶段(特异性结合阶段和可见反应阶段)E.受温度、pH、电解质等影响下列哪些试验属于凝集反应？A.肥达试验B.外斐试验C.ABO血型鉴定D.单向免疫扩散试验E.免疫比浊法关于间接凝集反应，正确的描述是：A.将可溶性抗原吸附在载体颗粒上B.提高了反应的灵敏度C.可以检测微量抗原或抗体D.常用的载体有红细胞、胶乳颗粒、活性炭等E.直接凝集反应灵敏度更高下列哪些方法属于免疫标记技术？A.酶联免疫吸附试验(ELISA)B.免疫荧光技术C.放射免疫测定法(RIA)D.化学发光免疫分析(CLIA)E.免疫胶体金技术酶联免疫吸附试验(ELISA)常用的基本类型有：A.直接法B.间接法C.双抗体夹心法D.竞争法E.捕获法免疫组化技术可用于：A.检测组织切片中抗原的定位B.检测细胞培养上清中细胞因子的浓度C.对肿瘤进行病理分型和鉴别诊断D.检测血清中自身抗体的滴度E.研究抗原在组织细胞内的分布下列哪些是检测T细胞功能的试验？A.淋巴细胞转化试验B.混合淋巴细胞反应C.细胞毒性T细胞杀伤试验D.溶血空斑试验E.酶联免疫斑点试验(ELISPOT，检测细胞因子)检测B细胞功能的试验包括：A.抗体形成细胞测定(如溶血空斑试验)B.酶联免疫斑点试验(ELISPOT，检测抗体分泌细胞)C.血清免疫球蛋白定量测定D.淋巴细胞转化试验(用SPA或抗IgM刺激)E.补体结合试验关于免疫印迹法(WesternBlot)，正确的描述是：A.将蛋白质样品先进行SDS电泳分离B.将分离的蛋白质条带转移至固相膜上C.用标记的抗体与膜上的靶蛋白结合D.主要用于检测DNA序列E.常用于病毒抗体(如HIV抗体)的确证试验免疫学检测技术在临床上的主要应用包括：A.感染性疾病的病原学诊断B.免疫相关疾病的诊断与监测C.肿瘤标志物的检测D.血型鉴定与组织配型E.激素、药物等微量物质的检测三、判断题(本大题共10小题，每小题1分，共10分。正确的在括号内打“√”，错误的打“×”。)（）抗原抗体反应具有高度特异性，如白喉抗毒素只能与白喉外毒素结合，不能与破伤风外毒素结合。（）在凝集反应中，抗原是可溶性的；在沉淀反应中，抗原是颗粒性的。（）协同凝集试验中，葡萄球菌A蛋白(SPA)能与IgG的Fc段结合，使IgG的Fab段暴露在外，因此SPA可作为载体，吸附已知IgG抗体，用于检测未知抗原。（）单向免疫扩散试验是一种定性的沉淀试验，可用于抗原的精确浓度测定。（）酶联免疫吸附试验(ELISA)的灵敏度一般低于放射免疫测定法(RIA)，但因其无放射性污染，应用更广泛。（）免疫荧光技术中，直接法是用荧光素标记第一抗体，间接法是用荧光素标记第二抗体(抗抗体)，间接法灵敏度更高。（）流式细胞术仅能对细胞表面的抗原进行检测，无法检测细胞内的抗原或细胞因子。（）淋巴细胞转化试验中，³H-TdR掺入法是通过检测细胞DNA合成情况来反映淋巴细胞的增殖能力。（）酶联免疫斑点试验(ELISPOT)是检测单个抗体形成细胞或细胞因子分泌细胞的一种高灵敏度方法。（）免疫学检测技术只能用于体外检测，无法用于体内的免疫状态评估。四、填空题(本大题共20个空，每空1分，共20分。)抗原抗体反应的两个阶段分别是__________结合阶段和__________反应阶段。凝集反应中的抗原是__________抗原，沉淀反应中的抗原是__________抗原。用已知抗体(如单克隆抗体)包被在载体上，检测待测标本中相应抗原的ELISA方法称为__________法；用已知抗原包被，检测待测血清中相应抗体的ELISA方法称为__________法。在免疫荧光技术中，最常用的荧光素有__________和__________。放射免疫测定法(RIA)的标记物是__________，化学发光免疫分析(CLIA)的标记物是__________。流式细胞术可对细胞进行多参数分析，包括细胞的__________、__________和细胞内成分。免疫印迹法(WesternBlot)结合了__________的高分辨率和__________的高特异性与灵敏度。检测细胞免疫功能的体内试验主要是__________，常用的有结核菌素试验。检测T细胞功能常用的非特异性刺激物(有丝分裂原)是__________(主要刺激T细胞)和__________(主要刺激B细胞)。经典的检测抗体形成细胞的方法是__________试验，其原理是抗体形成细胞分泌的抗体与周围红细胞抗原结合，在补体参与下导致红细胞溶解，形成肉眼可见的__________。五、名词解释(本大题共5小题，每小题3分，共15分。)凝集反应沉淀反应免疫标记技术流式细胞术酶联免疫斑点试验(ELISPOT)六、简答题(本大题共4小题，每小题5分，共20分。)简述抗原抗体反应的基本特点。比较直接凝集反应与间接凝集反应的异同点。简述酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法检测抗原的基本原理和主要步骤。简述免疫荧光技术中直接法与间接法的原理，并比较两者的优缺点。七、论述与分析题(本大题共1小题，共15分。)案例分析题：某医院检验科收到一份临床送检的血清标本，申请项目为“肝炎病毒标志物检测”。为明确患者是否感染乙型肝炎病毒(HBV)及评估其感染状态，检验人员计划进行一系列免疫学检测。为初步筛查患者血清中是否存在乙型肝炎表面抗原(HBsAg)，可首选哪种免疫学检测技术？请说明选择该技术的理由。(3分)简述该方法的基本原理(以双抗体夹心法为例)。(4分)若HBsAg检测为阳性，为进一步判断病毒复制情况及传染性强弱，常需检测乙型肝炎e抗原(HBeAg)和乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)。检测HBeAg和抗-HBc分别可采用ELISA的哪种方法？(2分)为什么检测抗-HBc(如抗-HBcIgM)通常采用捕获法？(2分)如果需要对上述所有阳性结果进行确证试验，排除假阳性的可能，应采用哪种更特异的免疫学技术？(2分)该技术的优点是什么？(2分)《医学免疫学》第二十二章免疫学检测技术单元试卷参考答案一、单项选择题二、多项选择题三、判断题×（流式细胞术可以通过对细胞进行固定和破膜处理，然后对细胞内抗原(如细胞因子、胞内信号蛋白)或核内抗原进行染色和检测。）×(皮肤试验，如结核菌素试验，就是一种体内免疫学检测技术，用于评估机体的细胞免疫状态。)四、填空题五、名词解释免疫标记技术用荧光素、酶、放射性核素、化学发光物质或胶体金等标记物标记抗原或抗体，进行的抗原抗体反应。通过检测标记物的信号(荧光、颜色、放射性、发光等)，对待测物进行定性、定位或定量分析。具有高灵敏度和高特异性的特点。主要包括免疫荧光技术、酶免疫技术、放射免疫技术、化学发光免疫技术和免疫胶体金技术等。流式细胞术一种能对悬浮在液体中的单个细胞或生物颗粒进行快速、多参数(如细胞大小、颗粒度、表面和内部抗原等)定量分析和分选的技术。其原理是将荧光素标记的抗体与细胞表面或内部的抗原结合，使细胞带荧光，在鞘液包裹下单行通过检测区，被激光照射后产生散射光和荧光信号，经计算机分析获得细胞特征信息。酶联免疫斑点试验(ELISPOT)一种在单细胞水平上检测抗体分泌细胞或细胞因子分泌细胞的高灵敏度方法。基本原理是将抗某种细胞因子或免疫球蛋白的抗体包被在固相载体(如PVDF膜)上，加入待检细胞进行培养。细胞分泌的细胞因子或抗体被其周围的包被抗体捕获，洗去细胞后，加入酶标记的二抗和底物进行显色，在分泌细胞的局部形成有色斑点。一个斑点代表一个分泌该物质的细胞。六、简答题简述抗原抗体反应的基本特点。◦特异性：一种抗原通常只能与其刺激产生的相应抗体发生结合，这是免疫检测的基础。特异性由抗原表位和抗体可变区的空间构型互补决定。▪抗原性质：直接凝集反应的抗原是天然的颗粒性抗原(如细菌、红细胞)。间接凝集反应的抗原是人工吸附在载体颗粒(如红细胞、胶乳颗粒)上的可溶性抗原。▪灵敏度：间接凝集反应通过载体放大了反应，灵敏度通常比直接凝集反应高。▪应用：直接凝集反应主要用于细菌鉴定、分型(如玻片法)和血清抗体效价测定(如试管法，肥达试验)。间接凝集反应既可用于检测抗原(反向间接凝集)，也可用于检测抗体，应用范围更广，如类风湿因子检测、HCG检测等。简述酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法检测抗原的基本原理和主要步骤。◦基本原理：利用两种特异性抗体识别同一抗原的不同表位。先将一种特异性抗体(捕获抗体)包被在固相载体上，捕获待测样本中的抗原；再加入酶标记的另一种特异性抗体(检测抗体)与抗原的另一表位结合，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物；加入酶底物后显色，颜色深浅与样本中抗原含量成正比。1.包被：将已知特异性抗体吸附于固相载体(如微孔板)表面，洗涤除去未结合抗体。2.封闭：加入无关蛋白(如牛血清白蛋白)封闭固相上未结合位点，减少非特异性吸附。3.加样：加入待测样本或标准品，温育，使抗原与固相抗体结合。洗涤。4.加酶标抗体：加入酶标记的另一特异性抗体，温育，形成夹心复合物。洗涤。5.加底物显色：加入酶的相应底物，酶催化底物产生有色产物。6.终止与测定：加入终止液终止反应，用酶标仪测定各孔吸光度值。根据标准曲线计算样本中抗原浓度。▪直接法：▪优点：操作简单，时间短，非特异性荧光干扰少。▪缺点：一种标记抗体只能检测一种抗原，灵敏度较低。▪间接法：▪优点：一种荧光标记的二抗可用于多种不同的一抗系统，通用性强；由于多个二抗分子结合一个一抗分子，信号被放大，灵敏度高于直接法。▪缺点：步骤较多，操作较复杂；非特异性荧光可能性高于直接法。七、论述与分析题检测HBsAg的首选技术与原理◦首选技术：酶联免疫吸附试验(ELISA)。临床上化学发光免疫分析法(CLIA)也已广泛应用，但ELISA因其成熟、经济、便于基层开展，常作为首选筛查方法。◦选择理由：①高灵敏度与特异性：可检测出微量HBsAg，满足早期诊断和筛查要求。②操作相对简便：易于标准化和自动化。③适合批量检测：一次可处理大量样本。④结果客观：可用酶标仪进行定量或半定量分析。⑤成本相对较低。1.包被捕获抗体：将抗-HBs(针对HBsAg的抗体)包被在微孔板孔内。2.加样与结合：加入待测患者血清，若血清中含有HBsAg，则与固相上的抗-HBs结合，形成固相抗体-抗原复合物。洗涤去除未结合物质。3.加酶标检测抗体：加入用酶(如HRP)标记的抗-HBs(识别HBsAg的另一表位)。此酶标抗体与已结合的HBsAg结合，形成“固相抗体-HBsAg-酶标抗体”夹心复合物。洗涤。4.加底物显色：加入酶底物(如TMB)，酶催化底物产生蓝色产物。5.终止与判读：加入酸终止反应，蓝色变黄色。用酶标仪测定吸光度(OD值)。OD值与样本中HBsAg的浓度成正比。通过与标