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文档简介
第2节
动物细胞工程动物体细胞核移植技术和克隆动物第2章细胞工程运用植物体细胞杂交技术,可以跨越不同种植物之间生殖隔离的屏障,培育出新的作物类型。有没有技术能让不同种动物的体细胞进行杂交,培育出集不同细胞的优势于一身的动物细胞呢?马的动物细胞A天鹅的动物细胞B飞马?需要什么技术?动物细胞融合技术1.概念:指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。2.原理:细胞膜具有一定的流动性3.结果:形成杂交细胞4.诱导方法:与植物原生质体融合的方法相同物理法电融合法等化学法聚乙二醇(PEG)融合法生物法灭活病毒诱导法动物细胞融合特有细胞核的融合→具有原来两个或多个细胞的遗传信息。6.
意义:突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。至今,种间、属间、科间、甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得了成功。5.融合实质及完成的标志:动物细胞融合技术病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合1.“灭活病毒”中灭活的具体含义是什么?2.灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么?细胞核的融合融合完成的标志:某种病毒紫外线灭活丧失感染活性(不感染细胞)保留抗原结构(诱导细胞融合)中国古代的奇思妙想“(悟空)拔一把毫毛,丢在口中嚼碎,望空喷去,叫一声‘变!’,即变作三二百个小猴,周围攒簇(cù)。”这是《西游记》中的一段描述,展示了中华先贤的想象力。问题探讨克隆猴:“中中”和“华华”2、毫毛来自体细胞,我们能用体细胞“变”出一群猴吗?1、动物通常如何繁殖?通过精卵结合形成受精卵发育成新个体(有性生殖)如何才能激发动物细胞表达其全能性1.概念:将动物一个细胞的细胞核,移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。2.原理:动物细胞核的全能性3.生殖方式:无性生殖动物细胞核移植技术卵母细胞动物体细胞去核取核移入重组细胞新胚胎克隆动物发育发育用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。体细胞或者胚胎细胞的细胞核→保持优良性状4.种类:胚胎细胞核移植:体细胞核移植:细胞分化程度低,表现全能性容易细胞分化程度高,表现全能性十分困难动物细胞核移植技术动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植在体细胞核移植中,非人灵长类动物体细胞核移植非常困难:①供体的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其分化前的功能状态,这导致了胚胎发育率低。具有许多与人类相似的生物学特征的灵长类动物②对非人灵长类动物胚胎进行操作的技术尚不完善。我国科学家经过多年努力,攻克了这些障碍,终于成功获得了世界上首例体细胞克隆猴。动物细胞核移植的过程1997年,美国的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛,年产奶量为30.8t,创造了世界奶牛产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛,年平均产奶量一般为十几吨,而我国奶牛产奶量年平均水平仅为3~4t。思考:能否依据“多莉羊”的培育过程,进行优质奶牛的快速繁育?无性生殖→保持优良性状二体细胞核移植的过程自主学习:阅读P53图2-18,思考下列问题1.选择卵母细胞作为核移植受体细胞的原因?采集的卵母细胞应培养至
;
卵母细胞去核的方法?“去核”去的是什么?2.注入去核的卵母细胞的是整个供体细胞还是供体细胞的细胞核?为什么?3.诱导融合的方法?融合的结果?4.什么是重构胚?激活重构胚的方法?用这些方法处理重构胚的目的?5.该过程用到哪些技术手段?
动物细胞核移植的过程二体细胞核移植的过程从屠宰场收集牛卵巢,采集卵母细胞(左边照片为研究人员正在使用设备从牛的卵巢采集卵母细胞),在体外培养到MⅡ期去核:显微操作法实际上是去除纺锤体-染色体复合物注意将细胞核和第一极体一并吸出1)为何选MⅡ期的卵母细胞?原因:①其细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质;②卵母细胞体积大,易操作;③卵母细胞营养物质丰富。2)卵母细胞为什么要“去核”?原因:保证核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自供体细胞。动物细胞核移植的过程二体细胞核移植的过程从屠宰场收集牛卵巢,采集卵母细胞(左边照片为研究人员正在使用设备从牛的卵巢采集卵母细胞),在体外培养到MⅡ期去核:显微操作法实际上是去除纺锤体-染色体复合物注意将细胞核和第一极体一并吸出高产奶牛(供体)从供体高产奶牛身体的某一部位(如耳)上取体细胞,进行培养供体细胞2)卵母细胞为什么要“去核”?原因:保证核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自供体细胞。动物细胞核移植的过程从屠宰场收集牛卵巢,采集卵母细胞(左边照片为研究人员正在使用设备从牛的卵巢采集卵母细胞),在体外培养到MⅡ期去核:显微操作法实际上是去除纺锤体-染色体复合物注意将细胞核和第一极体一并吸出高产奶牛(供体)从供体高产奶牛身体的某一部位(如耳)上取体细胞,进行培养供体细胞将供体细胞注入去核的卵母细胞。3)将整个供体细胞注入卵母细胞中有何优点?优点:①对卵母细胞损伤较小;②保证供体细胞的细胞核不被破坏,操作方便。从屠宰场收集牛卵巢,采集卵母细胞(左边照片为研究人员正在使用设备从牛的卵巢采集卵母细胞),在体外培养到MⅡ期去核:显微操作法实际上是去除纺锤体-染色体复合物注意将细胞核和第一极体一并吸出高产奶牛(供体)从供体高产奶牛身体的某一部位(如耳)上取体细胞,进行培养供体细胞将供体细胞注入去核的卵母细胞。3)将整个供体细胞注入卵母细胞中有何优点?优点:①对卵母细胞损伤较小;②保证供体细胞的细胞核不被破坏,操作方便。通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞,形成重构胚。从屠宰场收集牛卵巢,采集卵母细胞(左边照片为研究人员正在使用设备从牛的卵巢采集卵母细胞),在体外培养到MⅡ期去核:显微操作法实际上是去除纺锤体-染色体复合物注意将细胞核和第一极体一并吸出高产奶牛(供体)从供体高产奶牛身体的某一部位(如耳)上取体细胞,进行培养供体细胞将供体细胞注入去核的卵母细胞。3)将整个供体细胞注入卵母细胞中有何优点?优点:①对卵母细胞损伤较小;②保证供体细胞的细胞核不被破坏,操作方便。通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞,形成重构胚。早期胚胎用物理或化学方法(如电刺激、Ca2+
载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活重构胚,使其完成细胞分裂和发育进程从屠宰场收集牛卵巢,采集卵母细胞(左边照片为研究人员正在使用设备从牛的卵巢采集卵母细胞),在体外培养到MⅡ期去核:显微操作法实际上是去除纺锤体-染色体复合物注意将细胞核和第一极体一并吸出高产奶牛(供体)从供体高产奶牛身体的某一部位(如耳)上取体细胞,进行培养供体细胞将供体细胞注入去核的卵母细胞。3)将整个供体细胞注入卵母细胞中有何优点?优点:①对卵母细胞损伤较小;②保证供体细胞的细胞核不被破坏,操作方便。通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞,形成重构胚。早期胚胎用物理或化学方法(如电刺激、Ca2+
载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活重构胚,使其完成细胞分裂和发育进程胚胎移植将胚胎移入受体(代孕)母牛体内生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛4)从遗传物质的角度来分析,克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?克隆动物细胞核的遗传物质来自供体动物,但细胞质中的遗传物质同时来自供体细胞和受体卵母细胞;克隆牛从屠宰场收集牛卵巢,采集卵母细胞(左边照片为研究人员正在使用设备从牛的卵巢采集卵母细胞),在体外培养到MⅡ期去核:显微操作法实际上是去除纺锤体-染色体复合物注意将细胞核和第一极体一并吸出高产奶牛(供体)从供体高产奶牛身体的某一部位(如耳)上取体细胞,进行培养供体细胞将供体细胞注入去核的卵母细胞。3)将整个供体细胞注入卵母细胞中有何优点?优点:①对卵母细胞损伤较小;②保证供体细胞的细胞核不被破坏,操作方便。通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞,形成重构胚。早期胚胎用物理或化学方法(如电刺激、Ca2+
载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活重构胚,使其完成细胞分裂和发育进程胚胎移植(第3节讲)将胚胎移入受体(代孕)母牛体内生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛克隆牛4)从遗传物质的角度来分析,克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?克隆动物细胞核的遗传物质来自供体动物,但细胞质中的遗传物质同时来自供体细胞和受体卵母细胞;采集卵母细胞,在体外培养到MⅡ期从供体高产奶牛身上取体细胞显微操作去核对体细胞进行培养去核的卵母细胞供体细胞电融合法将供体细胞注入去核的卵母细胞重构胚用物理或化学方法激活重构胚,使其完成
细胞分裂和发育早期胚胎将胚胎移入受体(代孕)母牛体内生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛早期胚胎培养动物细胞培养胚胎移植动物细胞融合动物细胞核移植技术6.供体细胞注入卵母细胞的优点__________________7.诱导融合的方法____________________8.融合的结果______________________________9.重构胚概念_________________________________________动物细胞核移植的过程1.采集的卵母细胞应培养至_____________________2.选择MⅡ期卵母细胞的原因①____________________________________②_________________________③_________________________3.卵母细胞去核的方法_________________4.“去核”去的是什么?________________________5.去核的原因_____________________________________MⅡ期(减数分裂Ⅱ中期)卵母细胞内卵黄多,营养物质丰富细胞体积大,易于操作显微操作(去核)法纺锤体-染色体复合物含有促进细胞核表现全能性的物质使核移植得到的胚胎或动物核内遗传物质全部来自供体对供体细胞损伤较小电融合法供体核进入卵母细胞,形成重构胚人工重新构建的胚胎,具有发育成完整个体的能力体细胞核移植技术的应用前景(1)在畜牧生产中:加速家畜遗传改良进程、促进优良畜群繁育2018年,中国西北农林科技大学成功克隆荷斯坦奶牛“妞妞”,其核供体为年产奶量超10吨的精英母牛。后续批量克隆的奶牛群体乳蛋白含量提升12%,繁殖效率提高30%。转基因体细胞体细胞核移植技术的应用前景(2)在医药卫生领域:①通过建立转基因体细胞系,再利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物可以作为生物反应器,生产许多珍贵的医用蛋白;乳腺生物反应器如果科学家获得了一个药用蛋白基因,如何生产大量药用蛋白?体细胞核移植技术的应用前景(2)在医药卫生领域:②在治疗人类疾病时,转基因克隆动物的细胞、组织或器官可以用于异种移植。③以患者作为供体培育的人核移植胚胎干细胞,经过诱导分化能形成相应的细胞、组织或器官,将它们移植给患者时可以避免发生免疫排斥反应。(治疗性克隆)病人取核去核卵母细胞重构胚胎各种细胞组织或器官诱导取出体细胞核移植移植成纤维细胞取出转入相关因子各种细胞组织或器官iPS细胞取出胚胎干细胞诱导移植治疗性克隆iPS细胞治疗细胞发生转化体细胞核移植技术与诱导iPS细胞体细胞核移植技术的应用前景
①研究克隆动物可以使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程;②克隆一批遗传背景相同的动物,可以通过它们之间的对比来分析致病基因;③克隆特定疾病模型的动物,还能为研究该疾病的致病机制和开发相应的药物
提供帮助。(3)在科研领域:北方白犀牛是全球最濒危的哺乳动物之一,截至2024年,仅剩两只雌性个体(纳金和法图),且均为不孕老龄,物种已处于功能性灭绝边缘。为挽救这一物种,科学家尝试通过体细胞核移植技术(克隆)结合基因编辑进行干预。该技术有望增加濒危物种的存活数量。白鳍豚金丝猴体细胞核移植技术的应用前景(4)在保护濒危物种方面北方白犀牛相关资料:培育克隆羊多莉时,共获得了277个融合的细胞,早期发育成功的胚胎却只有29个,移植后成功怀孕的母羊仅有1只,成功率只有0.36%。培育体细胞克隆猴时,用了127个卵母细胞,获得109个核移植胚胎,移植给21只代孕母猴,只有6只成功怀孕,最后只诞生了2只健康的小猴,成功率为1.57%。多莉在2003年2月15日,因肺部感染而死亡,寿命只有7岁,而普通羊的平均寿命是12岁。体细胞核移植技术存在的问题韦尔穆特与克隆羊多莉克隆羊多莉真身标本(1)成功率低:克隆胚胎移植成功率非常低,各个技术环节有待进一步改进。需要与发育生物学、细胞生物学和分子遗传学等学科更深层次的理论研究相结合;许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷,如体型过大、异常肥胖、发育困难、脏器缺陷、免疫缺陷等。(3)理论研究较为滞后:(2)健康问题:“多莉”存活不足7年,远低于平均寿命体细胞核移植技术存在的问题动物细胞核移植技术[思考]为何不称为“克隆技术”而是“核移植技术”?克隆技术:是一个很广的概念,凡指新形成的事、物与亲本一致的现象均可称为“克隆”。在生物学上,克隆是无性繁殖,具体地说,是指一个共同的祖先,通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的分子、细胞或个体。一般指DNA分子扩增,还包括单克隆抗体技术。由一个细胞分裂所形成的细胞群体。指基因型完全相同的个体或群体。分子水平:细胞水平:个体水平:思考:下列克隆分别用什么技术?动物克隆——
动物细胞克隆——植物克隆——
DNA克隆——动物细胞培养技术动物体细胞核移植技术植物组织培养技术PCR技术第2节
动物细胞工程单克隆抗体第2章细胞工程二单克隆抗体及其应用抗原检测试纸新冠病毒(抗原)抗体问:抗体是什么细胞产生?主要分布在哪吗?机体感染病原体后,体内会形成相应的B淋巴细胞,这些细胞能分泌抗体,抗体识别并特异性结合病原体,从而抑制病原体的增殖等。血清(抗体主要分布部位)…….由血清中提取的抗体是由不同浆细胞产生的多种抗体的混合物,可达百万种以上。…….每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体抗体1抗原1B细胞1刺激抗体2抗体3抗体4抗原2抗原3抗原4B细胞2B细胞3B细胞4刺激刺激刺激产量低、特异性差需要获得获得大量的B细胞1问题:若我们只需要大量抗体1,有什么办法吗?早期获得抗体的方法及缺陷(2)缺陷:纯度低、向动物体内反复注射某种抗原(1)方法:每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体单一B淋巴细胞单一B淋巴细胞群选择克隆产生大量纯度高特异性强的抗体单克隆抗体克隆单一的B淋巴细胞,形成B淋巴细胞群,由细胞群产生大量的纯度高的抗体一个正常的B淋巴细胞不可能无限增殖的。怎样才能使B细胞在产生抗体的同时,具备无限增殖能力呢?大量制备单一抗体的思路:二单克隆抗体及其应用B细胞1抗体1产生能产生抗体1,但不能大量增殖骨髓瘤细胞(癌细胞)能无限增殖,但不能产生抗体单克隆抗体二单克隆抗体及其应用B细胞1骨髓瘤细胞杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生专一性抗体单克隆抗体二单克隆抗体及其应用单克隆抗体一个B淋巴细胞细胞群抗体克隆动物细胞融合杂交细胞动物细胞培养单克隆抗体骨髓瘤细胞
(能无限增殖)一种B淋巴细胞(只分泌一种特异性抗体)杂交瘤细胞既能迅速大量增殖,又能产生专一抗体极富创造性的实验方案:单克隆抗体单克隆抗体的制备注射特定抗原从患骨髓瘤的小鼠体内取骨髓瘤细胞的培养多种已免疫的B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合小鼠的脾脏中获取多种杂交细胞获得产生特定抗体的B淋巴细胞阶段一:动物细胞融合二单克隆抗体及其应用用特定的抗原对小鼠进行免疫,并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。抗原1从小鼠脾脏中获取B淋巴细胞B细胞1B细胞2B细胞3B细胞4……等多种B细胞
培养骨髓瘤细胞诱导融合融合后会出现哪些不同细胞?B细胞1骨髓瘤细胞杂交瘤细胞1B细胞2B细胞3B细胞4骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞2杂交瘤细胞3杂交瘤细胞4……等多种杂交瘤细胞B细胞1B细胞1B细胞2B细胞2B细胞3B细胞4……等多种B细胞间融合骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞二单克隆抗体及其应用二单克隆抗体及其应用两两融合的细胞B细胞2B细胞3B细胞4骨髓瘤细胞B细胞1……等多种未融合的细胞如何筛选?思考:只考虑两两融合,B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经诱导融合后,培养基中共出现几类细胞?其中融合的细胞有几类?阶段二:筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞(多种)第一次筛选B细胞自身融合未融合的B淋巴细胞骨髓瘤细胞自身融合未融合的骨髓瘤细胞B1-瘤B2-瘤B3-瘤单克隆抗体的制备二单克隆抗体及其应用第一次筛选:HAT培养基未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡只有融合的杂交瘤细胞才能生长阶段二:筛选杂交瘤细胞二单克隆抗体及其应用两两融合的细胞B细胞2B细胞3B细胞4骨髓瘤细胞B细胞1……等多种未融合的细胞未融合的亲本细胞融合的具有同种核的细胞融合的杂交瘤细胞阶段二:筛选杂交瘤细胞阶段二:筛选杂交瘤细胞(第一次筛选)单克隆抗体的制备【资料4】细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基喋呤阻断。
筛选出杂交瘤细胞方法?培养基中加入氨基喋呤(HAT选择培养基)B淋巴细胞合成DNAS途径D途径不能无限分裂增殖骨髓瘤细胞合成DNAD途径能无限增殖B淋巴细胞及同型融合细胞不能无限增殖,死亡骨髓瘤细胞及同型融合细胞不能合成DNA,死亡杂交瘤细胞能无限增殖,生长B1-瘤B2-瘤B3-瘤…….阶段三:筛选分泌专一抗体的杂交瘤细胞(第二次筛选)方法:用培养液
稀释培养杂交瘤细胞(多种)每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞抗原—抗体杂交抗原—抗体特异性结合原理:抗体检测呈
阳性的杂交瘤细胞
多孔细胞培养板阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞,挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释,一般需进行3~4次,直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。单克隆抗体制备过程中两次筛选的比较项目第一次筛选第二次筛选筛选原因目的
筛选方法
筛选出杂交瘤细胞筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,所以经选择培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞用特定的选择培养基(HAT培养基)筛选:未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞才能生长。克隆培养、抗体检测:用多孔细胞培养板培养,在每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞的情况下进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选得到足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。诱导融合后得到的细胞中,除杂交瘤细胞之外,还有未融合的亲本细胞,也有融合的具有同种核的细胞阶段四:动物细胞培养抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞体外培养体内培养(注射到小鼠腹腔内)单克隆抗体从细胞培养液中提取从小鼠腹水中提取优点:可大规模培养,大量生产缺点:需要人为控制培养条件,成本相对较高优点:易于控制培养条件,成本较低缺点:规模小,产量少——获得大量单克隆抗体单克隆抗体的制备培养杂交瘤细胞的方法有哪些?从哪里收集产物?方法的优缺点?单克隆抗体第二次筛选杂交细胞杂交瘤细胞体外或体内培养第一次筛选骨髓瘤细胞
诱导融合分泌特异抗体的杂交瘤细胞杂交瘤细胞群提取已免疫的B淋巴细胞动物细胞融合技术动物细胞培养技术既能大量繁殖又能产生抗体注射抗原单克隆抗体制备的过程中,应用到的技术手段单克隆抗体的制备细胞膜的流动性细胞增殖小结:单克隆抗体的应用1诊断试剂怀孕后,人体内的激素会发生较大改变,如绒毛膜促性腺激素的含量会大大增加,可否利用激素含量的变化来检测是否怀孕?如何检测?原理是什么?制备抗人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体来检测其尿液判断是否怀孕原理:抗原和抗体能够特异性结合优势:在妊娠第8天就可以作出诊断,这比原来的诊断方法提前了10d左右,可以避免孕妇在不知道妊娠的情况下因服用药物而对胎儿造成不利影响。该方法检测的准确率在90%以上。单克隆抗体的应用2运载药物——“生物导弹”--靶向运输药物治疗疾病讨论:1.ADC的抗体和药物各具有什么作用?抗体主要发挥靶向运输作用,即通过特异性结合靶细胞表面的抗原,将连接的药物输送到靶细胞。药物发挥治疗效应,如杀伤靶细胞。单克隆抗体的应用
抗体—药物偶联物(antibody-drugconjugate,ADC)通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合,实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物(如细胞毒素)三部分组成,它的作用机制如下图所示。讨论:2.除了细胞毒素外,还有哪些物质理论上可以作为ADC偶联的药物?可以用放射性同位素标记单克隆抗体进行靶向放疗;一些作用于细胞信号转导通路的药物可以通过阻断肿瘤细胞的信号通路来抑制其生长,理论上也可以将这些药物与单克隆抗体结合进行治疗。单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用讨论:3.单克隆抗体诊断试剂盒和ADC在临床应用上各具有什么优势?
单克隆抗体诊断试剂盒中的单克隆抗体只与特定的抗原发生反应,因此检测的特异性和灵敏度大大提高;生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可以传代培养、冷冻保存和复苏利用,有利于控制产品的质量和标准化生产诊断试剂盒。ADC能够协同发挥抗体特异性识别的靶向作用和细胞毒素对肿瘤细胞的杀伤作用,因此它在临床上具有靶点清楚、毒副作用小等优点。单克隆抗体的应用2运载药物抗体—药物偶联物(ADC)的局限性:(1)成本高(2)抗体与药物的连接可能分开,导致药物作用于健康细胞(3)脱靶效应:药物不仅结合到目标靶点,还意外结合到其他非预期的分子上,导致副作用或其他不良反应。——“生物导弹”--靶向运输药物治疗疾病甲胎蛋白(AFP)是一种特异性较强的肿瘤标志物,用甲胎蛋白作为______免疫小鼠,制备____________________,并与含有放射性同位素的标记物连接,单克隆抗体携带放射性标记物通过血液可到达全身几乎所有组织。由于肿瘤细胞表面的______会和单克隆抗体特异性的结合,所以放射性同位素标记物就不断积累在______上。通过一定的显影技术就可以发现肿瘤所在。抗原抗AFP单克隆抗体AFP肿瘤2诊断试剂单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用3作为药物治疗疾病单克隆抗体单独使用,也可直接用于治疗疾病如果被毒蛇咬伤,如何快速治疗?抗毒血清的主要作用成分是相应的抗体单克隆抗体制备过程相关知识点检测(1)该过程中应用到的技术_______________________________________(2)原理_______________________________________(3)注射特定抗原的目的_____________________________________________(4)诱导融合的方法______________________________________动物细胞特有的诱导融合方法为_______________________(5)第一次筛选的目的______________________
第一次如何筛选___________________________
筛选原理____________________________________________________(6)杂交瘤细
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