素材：基因工程中的基因鉴定技术

基因工程中的基因鉴定技术

基因鉴定技术是一项生物学检测技术，如DNA分子

杂交技术、电泳技术等。随着科技的发展，检测技术也

在不断发展。

所谓“DNA指纹”，就是把D,A作为像指纹那样的

独特特征来识别不同的人。由于DNA是遗传物质，因此

通过对DNA鉴定还可以判断两个人之间的亲缘关系。用

限制酶切割样品DNA后，并通过电泳等技术把切割后的

DNA片段按大小分开。

紫外灯下观察电泳结果

那么，鉴定目的基因是否成功导入和鉴定遗传物质是

否成功重组为什么需要进行PCR扩增？DNA鉴定技术中的电

泳技术的原理和噪作过程是怎样有？

典题举隅

试题1：（2015年10月浙江选考试题）科研人员拟将

已知的花色基因（目的基因）转入矮牵牛的核基因组中，

培育新花色的矮牵牛。请回答：

（5）取出试管苗，在适宜的光照、温度和80%以上

的等条件下进行炼苗。提取叶片组织的

DNA,采用PCR技术目的基因，鉴定目的

基因是否成功导入。

答案：湿度扩增

试题2：（2016年10月浙江选考试题）某小组欲进行

烟草原生质休分离与培养的研究，请回答：

（3）为了对烟草的某些性状进行改良，分离得到两种

烟草的原生质体，通过方法将它们的

遗传物质组合在一起，经培养获得具有新性状的再生植

株，提取再生植株的DNA,采用扩增

相关基因，来鉴定遗传物质是否成功重组。

答案：原生质体融合PCR

PCR扩熠和电泳技术

基因鉴定时一定要先经过PCR技术，直接进行鉴定是不行的。

基因鉴定的原理其中的一种方法是DNA分子杂交，这种分子

杂交是在缓冲液中进行的，由于DNA分子杂交时，两个分子相遇

的机会不是很大，所以就需要众多的带有目的基因的DNA与待测

的DNA分子，而PCR技术就是将目的基因进行扩增的一种技术手

段，所以在进行基因鉴定时并不是直接进行鉴定的，而是先进行

PCR技术将目的基因扩增再进行鉴定。同样的，如果用电泳技术

分离来鉴定也需要大量的扩增的目的基因或重组DNA分子。

鉴定技术一聚丙烯酰胺凝胶电泳技术

电泳技术的原理：

在确定的条件下，带电粒子在单位电场强度作用下，单位时

间内移动的距离（即迁移率）为常数，是该带电粒子的物化特征

性常数。

0.5-l.Omm,待脱凝固后，取出梳子，加入适量电极缓冲液使板

胶浸没在缓冲液下1mm处。

（3）样品制备与加样：溶解于TBE或THE内的样品应含指示染

料（0.02596澳酚蓝或桔黄橙）、蔗糖（10%-15%）或甘油（5%-10%）,

每齿孔可加样5-10ugo

（4）电泳：一般电压为5-15V/cm0对大分子的分离可用电压

5V/cmo电泳过程最好在低温条件下进行。

（5）样品回收：电泳结束后在紫外灯下观察样品的分离情况，

对需要的DNA分子或特殊片段可从电泳后的凝胶中以不同的方

法进行回收，如电泳洗脱法：在紫外灯下切取含核酸区带的凝胶,

将其装入透析袋（内含适量新鲜电泳缓冲液），扎紧透析袋后,

平放在水平型电泳槽两电极之间的浅层缓冲液中，100V电泳2-3

小时，然后正负电极交换，反向电泳2分钟，使透析袋上的DNA

释放出来。吸出含DNA的溶液，进行酚抽提、乙醇沉淀等步骤即

可完成样品的回收。

电泳装置

试题解析

试题1：用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时,

得到以下电泳图谱。其中1号为DNA标准样液(Marker),10

号为蒸储水,PCR时加入的模板DNA如图所示。据此作出的分析，

不合理的是()

A.PCR产物的分子大小在250-500bp之间

B.3号样品为不含目的基因的载体DNA

C.9号样品对应植株不是所需的转基因植株

D.10号确定反应体系等对结果没有干扰

解析：

PCR技术的基本操作和应用。PCR过程中，可以通过设计特

定的引物来扩增特定的DNA片段，4〜9号是转基因植株，理论

上应包含目的基因，结合2号野生型和10号蒸僧水组的结果，

推测包含目的基因的片段大小应为250〜500bp,A正确；3号PCR

结果包含250〜500bp片段，应包含目的基因，B