2025年微生物检验基础知识培训试题及答案

2025年微生物检验基础知识培训试题及答案一、判断题（共15题，每题1分，共15分。对的填“√”，错的填“×”）1.依据2024版《临床微生物检验标本采集与转运指南》，合格痰标本的判定标准为鳞状上皮细胞<10个/低倍视野、白细胞>25个/低倍视野。2.我国病原微生物实验室生物安全等级共分为4级，开展高致病性禽流感病毒分离培养活动需在BSL-3级实验室进行。3.革兰染色的操作顺序为结晶紫初染、卢戈碘液媒染、95%乙醇脱色、石炭酸复红复染。4.溶血性链球菌在血平板上形成的α溶血环为完全透明的无色溶血环，提示菌落周围红细胞完全溶解。5.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的核心耐药机制为携带mecA基因编码的青霉素结合蛋白PBP2a，对β-内酰胺类药物普遍耐药。6.中段尿细菌定量培养，菌落计数≥10^4CFU/ml即可确诊为尿路感染。7.2025年国家疾控局要求医疗机构重点监测的5类耐药菌为：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）、耐万古霉素肠球菌（VRE）、碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌（CRE）、碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌（CRAB）、碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌（CRPA）。8.所有真菌培养的最适孵育温度均为35℃±1℃。9.霍乱弧菌可发酵蔗糖，在TCBS选择性培养基上形成黄色菌落。10.梅毒螺旋体可在普通人工琼脂培养基上生长繁殖。11.微生物实验室常规使用的室内质控菌株至少每月传代1次即可，无传代次数限制。12.依据2024版《食品微生物检验沙门氏菌检验》国家标准，沙门氏菌检验的预增菌液为缓冲蛋白胨水，孵育温度为36℃±1℃，孵育时间为8~18h。13.新型隐球菌的核心鉴定特征为菌体外存在宽厚荚膜，墨汁负染镜下可见明显透亮荚膜圈。14.厌氧培养使用的庖肉培养基上层需覆盖液体石蜡，作用为隔绝空气，维持厌氧环境。15.新冠病毒核酸检测属于微生物检验范畴，其扩增反应区的生物安全等级需达到BSL-3级。二、单项选择题（共20题，每题2分，共40分。每题只有1个正确答案）1.依据2024版《临床微生物检验标本采集与转运指南》，成人每套血培养的标准采血量为（）A.5~10mlB.10~20mlC.20~30mlD.30~40ml2.下列细菌中属于革兰阴性双球菌的是（）A.金黄色葡萄球菌B.肺炎链球菌C.淋病奈瑟菌D.破伤风梭菌3.BSL-2级微生物实验室常规开展细菌培养、药敏试验需配备的生物安全柜型号为（）A.Ⅰ级生物安全柜B.Ⅱ级A2型生物安全柜C.Ⅱ级B2型生物安全柜D.Ⅲ级生物安全柜4.下列培养基中属于肠道致病菌选择性培养基的是（）A.血琼脂平板B.巧克力琼脂平板C.SS琼脂平板D.营养琼脂平板5.依据CLSI2024版药敏试验标准，苯唑西林纸片扩散法检测金黄色葡萄球菌，抑菌圈直径小于以下哪个阈值判定为耐药（）A.≤10mmB.≤12mmC.≤15mmD.≤17mm6.结核分枝杆菌罗氏固体培养的最适孵育温度为（）A.28℃B.35℃C.37℃D.42℃7.下列缩写中代表碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌的是（）A.CRPAB.CRABC.CRED.VRE8.常温下采集的中段尿标本，需在采集后多长时间内送至实验室（）A.1hB.2hC.3hD.4h9.革兰染色操作中，卢戈碘液的作用是（）A.初染B.媒染C.脱色D.复染10.下列真菌中属于双相真菌的是（）A.白色念珠菌B.新型隐球菌C.组织胞浆菌D.烟曲霉11.2025年国家要求医疗机构微生物实验室检出重点监测耐药菌后，上报医院感染管理部门的时限为（）A.2hB.12hC.24hD.48h12.霍乱弧菌的最适生长pH范围为（）A.6.0~6.8B.7.2~7.6C.8.2~9.0D.9.2~10.013.细菌的主要繁殖方式为（）A.有丝分裂B.二分裂C.孢子生殖D.复制14.下列标本采集后需保温送检、不得冷藏的是（）A.尿液B.痰液C.脑脊液D.粪便15.消毒的定义是（）A.杀灭环境中所有微生物，包括细菌芽孢B.杀灭环境中所有病原微生物，不包括细菌芽孢C.杀灭环境中所有细菌繁殖体D.杀灭环境中所有真菌孢子16.下列试验中用于鉴别肺炎链球菌和甲型溶血性链球菌的是（）A.触酶试验B.胆汁溶菌试验C.氧化酶试验D.凝固酶试验17.耐万古霉素肠球菌的缩写为VRE，是指肠球菌对以下哪种药物耐药（）A.青霉素B.氨苄西林C.万古霉素D.利奈唑胺18.念珠菌属真菌常规药敏试验的标准孵育时间为（）A.24hB.48hC.72hD.96h19.下列细菌中属于专性厌氧菌的是（）A.大肠埃希菌B.铜绿假单胞菌C.破伤风梭菌D.伤寒沙门菌20.微生物实验室室内质控菌株的传代次数不得超过（）A.3代B.5代C.7代D.10代三、多项选择题（共10题，每题2分，共20分。每题有2个及以上正确答案，多选、少选、错选均不得分）1.下列属于国家要求重点监测的医院感染相关耐药菌的有（）A.MRSAB.VREC.CRED.CRABE.CRPA2.下列属于血培养采血指征的有（）A.体温≥38.5℃B.体温<36℃C.寒战D.外周血白细胞计数>10×10^9/LE.感染性休克3.下列细菌中属于革兰阳性菌的有（）A.金黄色葡萄球菌B.肺炎链球菌C.大肠埃希菌D.破伤风梭菌E.铜绿假单胞菌4.微生物实验室BSL-2级的必备生物安全防护装备包括（）A.生物安全柜B.一次性防护服C.无菌手套D.医用外科口罩/医用防护口罩E.护目镜/面屏5.下列关于微生物标本采集的通用要求，说法正确的有（）A.尽可能在抗菌药物使用前采集标本B.采集过程避免正常菌群污染C.标本容器需经灭菌处理，无菌状态D.标本标签需标注患者信息、采集部位、采集时间E.所有标本采集后需4℃冷藏送检6.肠杆菌科细菌的共同生化特征包括（）A.革兰阴性杆菌B.氧化酶试验阴性C.发酵葡萄糖产酸或产酸产气D.触酶试验阳性E.硝酸盐还原试验阳性7.下列属于细菌生化反应试验的有（）A.糖发酵试验B.靛基质试验C.甲基红试验D.VP试验E.枸橼酸盐利用试验8.下列属于结核分枝杆菌微生物检验项目的有（）A.痰涂片抗酸染色镜检B.罗氏固体培养C.实时荧光定量PCR核酸检测D.XpertMTB/RIF快速耐药检测E.分枝杆菌药敏试验9.下列关于微生物检验质量控制的说法，正确的有（）A.细菌染色、药敏试验、培养基性能验证等室内质控需每日开展B.室间质评每年至少参加1次即可C.室内质控菌株需溯源至ATCC或国家菌种保藏中心标准菌株D.每批次配制或采购的商品化培养基使用前需开展无菌试验和性能验证E.每批次药敏试验需同步开展阳性、阴性质控菌株检测10.下列关于厌氧菌检验的要求，说法正确的有（）A.标本采集后严格避免接触空气B.标本需在采集后30min内送至实验室C.可采用针筒排尽空气后密封送检D.痰标本可常规用于厌氧菌培养E.可采用厌氧袋、厌氧罐、厌氧工作站开展厌氧培养四、简答题（共2题，每题7分，共14分）1.依据2024版《临床微生物检验标本采集与转运指南》，简述血培养标本的采集规范。2.简述革兰染色的操作步骤及结果判读标准。五、案例分析题（共1题，11分）患者男性，68岁，因“重症肺炎、感染性休克”入住ICU，入院后予美罗培南、万古霉素经验性抗感染治疗5天，体温仍波动在38.5~39.5℃，临床留取3套血培养、2份痰标本送检微生物检验。痰标本涂片镜检示鳞状上皮细胞<8个/低倍视野，白细胞>30个/低倍视野，可见大量革兰阴性杆菌；3套血培养均于48h报阳，涂片示革兰阴性杆菌。请回答以下问题：1.该痰标本是否合格？判定依据是什么？（3分）2.结合患者病史，考虑最可能检出的耐药菌类型是什么？需开展哪些核心检验项目明确诊断？（4分）3.检出该类耐药菌后，需采取哪些核心院感防控措施？（4分）一、判断题答案1.√2.√3.√4.×5.√6.×7.√8.×9.√10.×11.×12.√13.√14.√15.×解析：第4题α溶血为草绿色不完全溶血环，β溶血为完全透明溶血环；第6题中段尿定量培养≥10^5CFU/ml提示尿路感染，导尿标本≥10^4CFU/ml可诊断；第8题皮肤癣菌最适培养温度为28℃，深部真菌为35℃；第10题梅毒螺旋体为专性寄生菌，需在活细胞内培养，无法在普通人工培养基生长；第11题质控菌株传代不得超过5代，4℃斜面保存需每2周传代1次；第15题新冠病毒核酸扩增区生物安全等级为BSL-2级即可。二、单项选择题答案1.B2.C3.B4.C5.A6.B7.C8.B9.B10.C11.C12.C13.B14.C15.B16.B17.C18.B19.C20.B三、多项选择题答案1.ABCDE2.ABCDE3.ABD4.ABCDE5.ABCD6.ABCDE7.ABCDE8.ABCDE9.ACDE10.ABCE解析：第5题脑脊液、怀疑脑膜炎奈瑟菌/肺炎链球菌感染的血液标本需保温送检，不得冷藏；第9题室间质评每年至少参加2次，每半年1次；第10题痰标本含大量口腔正常厌氧菌群，污染后无法区分致病菌，不可用于厌氧菌培养。四、简答题参考答案1.血培养标本采集规范（7分，每答出1点得1分）：（1）采血时机：尽可能在抗菌药物使用前采集，寒战或发热初起时为最佳采血时间；（2）采集套数：成人每次采集2~3套（每套包含1个需氧瓶+1个厌氧瓶），儿童每次采集1~2套（优先采集需氧瓶，怀疑厌氧菌感染时加做厌氧瓶）；（3）采血量：成人每套总采血量为10~20ml，每瓶接种5~10ml；儿童按体重计算采血量，每瓶接种1~5ml，总采血量不超过患者总循环血量的1%；（4）采血部位：优先采集外周静脉血，避免从静脉留置管、动脉置管采血，怀疑导管相关血流感染时可同时采集导管血和外周血对照；（5）皮肤消毒：采用三步消毒法：75%乙醇擦拭穿刺部位30s，1%~2%碘酊作用30s，75%乙醇脱碘，完全待干后采血；（6）标本转运：采集后2h内送至实验室，室温保存，不得冷藏，延迟送检不得超过12h；（7）标本标识：每个血培养瓶需标注患者姓名、住院号、采集时间、采集部位、采血人信息。2.革兰染色操作及结果判读（7分）：（1）操作步骤（4分）：①涂片制备：取洁净载玻片，滴加无菌生理盐水，挑取待检标本或菌落均匀涂布成薄涂片，自然干燥后经火焰3次快速通过固定；②初染：滴加结晶紫染液覆盖涂片，染色1min，流水冲洗甩干；③媒染：滴加卢戈碘液覆盖涂片，作用1min，流水冲洗甩干；④脱色：滴加95%乙醇，倾斜载玻片晃动至无紫色液体洗脱，时长约30s，立即流水冲洗甩干；⑤复染：滴加石炭酸复红染液覆盖涂片，染色30s，流水冲洗甩干，晾干后油镜镜检。（2）结果判读（3分）：①革兰阳性菌：菌体呈紫色，常见为葡萄球菌、链球菌、芽孢杆菌等（1分）；②革兰阴性菌：菌体呈红色，常见为肠杆菌科、非发酵菌、奈瑟菌属等（1分）；③质量控制：每批次染色需同步用金黄色葡萄球菌（革兰阳性）、大肠埃希菌（革兰阴性）作为质控菌株，结果符合要求才可判定标本结果（1分）。五、案例分析题参考答案1.该痰标本为合格标本（1分）。判定依据：2024版《临床微生物检验标本采集与转运指南》明确，合格痰标本的判定标准为鳞状上皮细胞<10个/低倍视野、同时白细胞>25个/低倍视野，该患者痰标本符合上述要求，排除口腔唾液污染，可用于后续培养检验（2分）。2.最可能检出的耐药菌为碳青霉烯类耐药革兰阴性杆菌，优先考虑CRE，也可包括CRAB、CRPA（1分）。需开展的核心检验项目：①接种血平板、麦康凯平板等进行分离培养，通过生化试验或质谱仪明确菌种鉴定（1分）；②开展亚胺培南、美罗培南、厄他培南等碳青霉烯类药物的药敏试验，明确耐药表型（1分）；③开展碳青霉烯酶基因（blaKPC、blaNDM、blaOXA-48等）检测，明确耐药机制，指导后续抗感