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文档简介
第2章细胞工程第2节动物细胞工程
第1课时动物细胞培养21.结合动物细胞的代谢和增殖特点,说明动物细胞培养的条件。2.采用建模的方法,阐明动物细胞培养的过程。学习目标动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合动物细胞工程技术动物细胞工程(基础)组织一、动物细胞培养的概念
从动物体中取出相关的
,将它分散成
,然后在适当的培养条件下,让这些细胞
的技术。组织单个细胞生长和增殖细胞生长和增殖适宜条件动物体取出单个细胞分散组织要求:原因:动物胚胎或幼龄动物组织分化程度低,增殖能力强,容易培养原理:细胞增殖结果:获得细胞。(注意:不能获得完整动物个体)营养条件其他条件动物细胞培养所需的基本条件<>糖类、氨基酸、无机盐、维生素等无菌、无毒的环境适宜温度、pH、渗透压适宜的气体环境思考阅读教材44页完成自主学习相关内容二、动物细胞培养的条件(1)成分:
。
(2)培养基:
培养动物细胞一般用液体培养基,也叫
。1、营养含
等天然成分的合成培养基;血清培养液2、无菌、无毒的环境(1)无菌:(2)无毒:
,以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。①对培养液和所有培养用具进行
处理;②在
进行操作;③添加适量
(防止杂菌污染)。灭菌抗生素定期更换培养液糖类、氨基酸、无机盐、维生素等
无菌环境下二、动物细胞培养的条件(1)适宜的温度:多以
为宜;(2)适宜的pH:
;(3)适宜的渗透压的目的:
。3、温度、pH和渗透压36.5±0.5℃7.2—7.4维持细胞正常的形态和功能4、气体环境(1)气体组成及作用:O2CO2细胞代谢所必需维持培养液的pH(2)具体操作:用培养皿或松盖培养瓶,在含有_______________和__________的混合气体的
.95%空气5%CO2CO2培养箱二、动物细胞培养的条件
D巩固练习选项提供物质作用A抗生素主要防止动物细胞在培养过程中被病毒感染B血清补充合成培养基中缺乏的物质C氧气满足细胞代谢的需要D二氧化碳维持培养液的酸碱度2.下列有关动物细胞培养时所提供的物质及其作用的描述不正确的是(
)A巩固练习1.写出动物细胞培养的基本流程。2.培养前为什么要将动物组织分散成单个细胞?3.用什么方法将组织分散成单个细胞?常用胰蛋白酶分散细胞,这说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?4.体外培养动物细胞有哪些类型?5.培养一段时间,什么原因导致分裂受阻?怎样解决?6.什么是细胞贴壁、接触抑制,原代培养和传代培养?7.传代培养前如何收集细胞?阅读教材44-45页“动物细胞培养的过程”,思考下列问题:三、动物细胞培养的过程传代培养放入CO2培养箱中培养三、动物细胞培养过程取动物组织制成细胞悬液转入培养液进行原代培养放入CO2培养箱中培养进行分瓶取动物组织分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代培养取动物组织分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代培养用机械的方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理分散成单个细胞便于从培养液中获得营养,排出代谢废物,利于继续培养。细胞间的组要成分是蛋白质.2.培养前为什么要将动物组织分散成单个细胞?3、可用什么方法将组织分散成单个细胞?常用胰蛋白酶分散细胞,这说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?分瓶不可以用胃蛋白酶,pH不适宜制细胞悬液培养取动物组织分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代培养加培养液4、体外培养动物细胞有哪些类型?①悬浮生长类:能够悬浮在培养液中生长增殖。②贴壁生长类:需要贴附于某些基质表面才能生长增殖(细胞贴壁),大多数细胞属于此类。细胞分裂受阻悬浮生长贴壁生长原因原
因密度过大、有害代谢物积累营养物质缺乏等接触抑制转入培养皿或培养瓶中5.培养一段时间,什么原因导致分裂受阻?怎样解决?传代培养密度过大、有害代谢物积累和营养物质缺乏等,贴壁生长增殖还会出现接触抑制现象。解决办法分瓶判断依据:是否分瓶!原代培养、传代培养如何区分?7、传代培养前如何收集细胞?①悬浮培养的细胞:②贴壁细胞:直接用离心法收集取动物组织分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代培养细胞贴壁:某些细胞需要贴附于某些基质表面(如培养瓶瓶壁)才能增殖。接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞停止分裂增殖的现象原代培养:指动物组织经处理后的初次培养传代培养:分瓶后的细胞培养。用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁上脱离下来,再用离心法收集收集细胞分瓶与社会联系:与传统畜牧业养殖相比,细胞培养肉工厂化生产有什么优点?植物组织培养动物细胞培养原理培养基结果过程相同点新的植株新的细胞①培养过程中细胞都进行有丝分裂,不涉及减数分裂;②均需无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件。外植体愈伤组织根、芽幼苗完整植株移栽成活取动物组织制成细胞悬液进行分瓶进行植物细胞的全能性细胞增殖固体培养基液体培养基植物细胞组织培养与动物细胞培养的比较原代培养传代培养脱分化再分化(2024浙江高考真题)某动物细胞培养过程中,细胞贴壁生长至接触抑制时,需分装培养,实验操作过程如图。下列叙述错误的是()A.①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离B.②加培养液的目的是促进细胞增殖C.③分装时需调整到合适的细胞密度D.整个过程需要在无菌、无毒条件下进行B高考链接3.科学家在实验室中已经可以成功培育出膀胱,并能顺利移植到患者体内,这种技术为那些急需器官移植的患者带来福音。具体培育过程如下图所示,请据图回答下列问题:巩固练习(2)b过程中,细胞逐渐布满由胶原质制成的“支架”,说明这些细胞具有__________________的特点。原代培养得到的细胞数目如果不能达到要求,还需要对细胞进行________培养。(3)新器官与老器官的“重组”________(填“是”或“不是”)基因重组;“新膀胱”移植后,________(填“会”或“不会”)成为抗原。(1)a过程属于细胞工程中的
技术。该过程之前,需要用
处理以分散成单个细胞;为满足细胞生长增殖的需要,培养细胞的培养液中除含有葡萄糖、氨基酸、无机盐等已知成分外,还需加入
等天然成分;该过程还需适宜的气体环境,其中提供5%的CO2的作用是____________________________________。动物细胞培养胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)血清维持培养液的pH贴壁生长不是不会传代动物细胞培养动物细胞培养的概念和原理动物细胞培养的条件动物细胞培养的过程原理:细胞的增殖从动物体中取出相关组织,将他分散成单个细胞,在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术(1)营养条件(2)无菌、无毒的环境(3)温度、pH和渗透压(4)气体环境取动物组织单个细胞细胞悬液原代培养传代培养小结五1.动物细胞培养技术可以用于生产人类细胞,治疗和预防一些疾病,例如癌症、心脏病、帕金森氏症等。下列有关动物细胞培养技术的叙述,错误的是(
)A.动物细胞培养过程中需要严格控制培养条件B.细胞培养过程需要在含有95%空气和5%CO2的气体条件下进行C.定期更换培养液,可防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害D.通过细胞培养获得健康皮肤的过程说明动物
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