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CCSB05T/QHNX青海省农学会发布甘蓝型春油菜小孢子培养及加倍技术规范3T/QHNX059—养基地。a)用有效氯成分4.5%~5.5%的消毒液(84液),表面消毒15min,然后用无菌水清洗3次，每b)用75%的酒精表面消毒1min,再用升汞消毒8~10min,最后用无菌水清洗3次，每次5min。B5-13、B5、MS培养基，应采用高温高压灭菌，121℃,103.4kPa,20min。1)将表面清洗消毒后的花蕾放置于离心管中，加入30mL~40mLB5-13分离洗脱培养基，用玻璃棒研磨使花粉散出。2)将花粉悬浮液倒入过滤器(小漏斗和300目尼龙纱网组成),滤入50ml离心管。3)800~1000rpm/min,离心4min,弃上清液，再加入30mL~40mLB5-13洗脱液，重复洗脱至少2次。用封口膜封口。2)32℃黑暗热激培养48h,然后静置在25℃恒温条件下进行暗培养。将发育至5mm~10mm的子叶型胚放置在4℃条件下，处培养基配方见表A.1

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