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4115DB4115/T078—2020息半夏组织培养及育苗技术规程2020-12-30发布2021-03-30实施信阳市市场监督管理局发布I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化1GB/T603化学试剂试验方法中所用2设施。用水执行分析实验室用水规格和试验方法标准(所用水应符合GB/T6682三级水的要求)。配制好的母液分别贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期。母液贮藏温度2℃~10℃,贮藏时间所需蔗糖的浓度是20g/L,琼脂粉的浓度是5.5g/L。成苗培养阶段，加入0.25%符合HG/T3491规定的活性炭，减少组织培养的褐化和玻璃化，同时有配方为1/2MS+2,4-D(1mg/L)+6-BA(0.5mg/L),按照培养基配制程序配制。配方为MS+6-BA(1mg/L)+NAA(0.1mg/L),按照培养基配制程配方为MS+6-BA(1mg/L)+NAA(0.2mg/L),按照培养基配制程4.2.4pH值保持组培室清洁卫生。接种室与培养室每隔3个月密闭门窗用高锰酸钾一甲醛(3:5)熏蒸10h~后用75%乙醇擦拭双手和培养容器外表面。整个接种工作在近火焰处进行。接种完成后迅速封口。接种工具采用热压灭菌或其他方式灭菌，接种时在超净工作台内取出。使用的消毒液要每周更换。4将清洗干净的息半夏块茎剥去表皮（小心保护好芽尖），用流动饮用水冲洗30min后，在超净工作4.5.7叶片培养将试管苗浓绿厚大的叶片切成0.5cm×0.5cm的切片，叶面朝上接种于叶片培养基，培养周期50d~4.5.8叶柄培养将试管苗生长健壮的叶柄切成0.5cm～1cm长的段，接种于叶柄培养基，培养周期45d~55d。将剪掉叶片和叶柄的无菌小块茎转接到成苗培养基上，培养周期25d～30d。4.5.10从生芽和愈伤组织培养将叶片与叶柄培养形成的丛生芽和愈伤组织转接至成苗培养基上，培养周期25d～30d。5炼苗移栽操作规范675%的遮阳网遮阳，在温度25℃左右，相对湿度8使用温控设施，动态监控温度变化，整个生长期间保持温度25℃左右，遮阳用1:1:100的波尔多液和40%多菌灵可湿性粉剂300倍液交替喷防3～5次。及时拔除病株烧毁，并用10%的石灰水对病穴消毒，发病初期用50%多菌灵或70发现病株及时拔除，用95%恶霉灵可湿性粉剂4000～50

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