DB37T-青贮饲料质量检测与评价技术规范　第2部分：青贮玉米中可吸收淀粉含量的测定

ICS FORMTEXT65.120FORMTEXTB46FORMTEXT     DBFORMTEXT37DBFORMTEXT37/TFORMTEXTXXXXX—FORMTEXTXXXXFORMTEXT     FORMTEXT青贮饲料质量检测与评价技术规范第2部分：青贮玉米中可吸收淀粉含量的测定FORMTEXTTechnicalspecificationforsilagequalitytestingandevaluation—Part2：DeterminationofabsorbablestarchinwholeplantcornsilageFORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX发布FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX实施FORMTEXT山东省市场监督管理局   发布DB37/TXXXXX—XXXX前  言DB37/TXXXX—2019《青贮饲料质量检测与评价技术规范》分为4个部分：——第1部分：全株玉米制作青贮饲料机械揉搓质量评价技术规范；——第2部分：青贮玉米中可吸收淀粉含量的测定；——第3部分：多功能饲草粉碎机作业质量技术规范；——第4部分：青贮饲料霉菌毒素检测技术规程。本部分为DB37/TXXXX—2019的第2部分。本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本部分由山东省畜牧兽医局提出并组织实施。本部分由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本部分起草单位：山东省畜牧总站、山东五征高北农牧机械有限公司、德州农慧农牧专业合作联合社、东营市畜牧兽医工作站、山东芳华农业机械有限公司。本部分起草人：翟桂玉、刘栋、姜慧新、王兆凤、张文娟、仲崇岳、曹阳、纪中良、王志坚、郭爱华、刘刚、张磊、王玉霞。青贮饲料质量检测与评价技术规范第2部分：青贮玉米中可吸收淀粉含量的测定范围本标准规定了青贮玉米中可吸收淀粉含量的测定方法。本标准适用于所有青贮玉米可吸收淀粉含量的测定。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T728禾本科牧草干草质量分级NY/T2129饲草产品抽样技术规程术语与定义下列术语与定义适用于本文件。可吸收淀粉absorbablestarch健康动物胃肠中能够吸收的淀粉及其降解产物的总称。原理样品经前处理后，先在沸水浴中经耐高温α-淀粉酶水解，使可消化淀粉转化成葡萄糖，离心，得上清液，用葡萄糖试剂盒测定葡萄糖含量（FS），沉淀加入一定浓度的氢氧化钾使之溶解，经葡萄糖淀粉酶作用将其转化成葡萄糖，用葡萄糖试剂盒测定葡萄糖含量(SS)，将获得的两个葡萄糖含量（FS+SS）相加，再乘以0.9即换算成可吸收淀粉含量。仪器设备离心机。电热恒温水浴锅。酸度计。分光光度计。电子分析天平（感量0.0001g）。容量瓶（100mL、1000mL）。试剂与溶液除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。乙醚。耐高温α-淀粉酶（120000U/mL）。2mol/L氢氧化钾溶液。磷酸盐缓冲液（pH5.8），分别称取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g，加适量水使其溶解，定容至1000mL。醋酸盐缓冲液(pH4.4)，分别量取0.2mol/L醋酸溶液30.5mL及0.2mol/L醋酸钠溶液19.5mL混匀。葡萄糖淀粉酶（100000U/mL）。2mol/L盐酸溶液。葡萄糖试剂盒。检测方法样品前处理样品的干燥抽取青贮玉米样品，并进行烘干处理，烘干样品过40目筛磨碎备用。样品脱脂称取烘干磨碎样品2g～5g（精确到0.001g），置于放有慢速滤纸的漏斗中，用30mL乙醚分三次洗去样品中脂肪，弃去乙醚。可吸收淀粉含量测定可吸收淀粉提取及转化上清液部分取0.5g试样放入50mL离心管，加入10mL(pH5.8)磷酸盐缓冲溶液和1mL耐高温α-淀粉酶，沸水浴30min，冷却至室温，离心(5000r/min，20min)获得上清液；加入10mL蒸馏水，洗涤沉淀，离心获得上清液(该步骤至少重复一次)。洗涤沉淀物部分将7.2.1.1获得的洗涤离心沉淀物，加入6mL2mol/L氢氧化钾溶解沉淀，室温下振荡30min，促进沉淀溶解，以2mol/L盐酸调pH至中性，加入5mL醋酸盐缓冲液(pH4.4)和1mL葡萄糖淀粉酶。60℃水浴45min。离心(5000r/min，20min)，收集上清液，再用10mL蒸馏水洗涤沉淀(该步骤重复两次)，离心(5000r/min，20min)，获得上清液。上清液的处理分别将7.2.1.1和7.2.1.2所收集的上清液，定容至100mL容量瓶中。葡萄糖含量的测定。根据葡萄糖试剂盒以及使用说明书，用分光光度计测定样品中葡萄糖的含量，以蒸馏水为空白管，以试剂盒自带标准液为标准管，把试剂与工作液按一定比例混合，置37℃水浴15min，以空白管调零，在505nm波长下读取各管吸光度值。测定结果计算计算公式葡萄糖（X）含量计算公式： (SEQ标准自动公式\*ARABIC1)式中：X——葡萄糖含量，mg/L；A1——样品管吸光度；A2——标准管吸光度；C1——标准管中葡萄糖的浓度，mmol/L。可吸收淀粉（DS）含量计算公式： (SEQ标准自动公式\*ARABIC2)式中：DS——可吸收淀粉含量，%；C2——第一次处理上清液（FS）样品中葡萄糖的浓度，mg/L；C3——第二次处理上清液（SS）样品中葡萄糖的浓度，mg/L