2025年病理检验技术试题及答案

2025年病理检验技术试题及答案一、单项选择题（每题1分，共20分）1.病理常规标本固定的首选固定液是A.95%乙醇B.10%中性缓冲福尔马林C.丙酮D.4%多聚甲醛2.病理常规石蜡切片的标准厚度为A.1-2μmB.3-5μmC.8-10μmD.15-20μm3.HE染色中，特异性使细胞核着色的染料是A.伊红B.苏木素C.甲苯胺蓝D.甲基绿4.石蜡切片脱蜡过程中首选的有机溶剂是A.无水乙醇B.二甲苯C.异丙醇D.丙酮5.免疫组化染色前，最常用的抗原修复方法是A.酶消化修复B.热抗原修复C.盐酸水解修复D.胰蛋白酶消化6.细针穿刺细胞学标本湿固定的首选固定液是A.10%福尔马林B.无水乙醇C.95%乙醇D.丙酮7.按照我国《病理科建设与管理指南》要求，常规病理诊断后剩余组织标本的保存期限为A.5年B.15年C.30年D.永久保存8.下列关于石蜡包埋组织块摆放的说法，错误的是A.囊壁组织需垂直于包埋面摆放B.皮肤组织需将表皮层朝向包埋面C.穿刺组织需平行排列贴于包埋面D.含钙化灶的组织可随意摆放9.PAS特殊染色主要用于检测的物质是A.胶原纤维B.糖原、黏液及真菌细胞壁C.脂质D.含铁血黄素10.免疫组化染色中，阻断内源性过氧化物酶的常用试剂是A.3%过氧化氢甲醇溶液B.10%盐酸乙醇C.柠檬酸缓冲液D.牛血清白蛋白11.福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织提取的核酸降解程度，与下列哪项因素相关性最高A.组织大小B.固定时间C.蜡块保存温度D.石蜡熔点12.冷冻切片技术的核心优势是A.组织形态清晰度优于石蜡切片B.制备速度快，适合术中快速诊断C.可长期保存用于后续分子检测D.染色对比度高于HE常规染色13.HE染色中“分化”步骤的核心目的是A.使细胞核着色更深B.脱去组织中结合不牢固的苏木素，避免胞浆非特异性着色C.使伊红着色更均匀D.增加组织透明度14.病理技术室接触人体标本的操作区，生物安全防护等级为A.一级B.二级C.三级D.四级15.下列特殊染色方法中，用于显示网状纤维的是A.Masson三色染色B.普鲁士蓝染色C.Gomori银染色D.VG染色16.免疫组化染色中设置阴性对照的核心目的是A.验证染色流程是否正常B.排除非特异性染色干扰，确认结果特异性C.提高阳性信号强度D.缩短染色时间17.下列哪项不属于石蜡切片出现褶皱的常见原因A.切片刀锋利度不足B.蜡块冷冻过度硬度太高C.展片水温低于45℃D.切片角度设置为15°18.细胞学标本离心制备涂片时，标准转速为A.500-1000转/分B.1500-2000转/分C.3000-4000转/分D.5000转/分以上19.下列哪种标本最适合用于流式细胞术免疫表型检测A.10%福尔马林固定的淋巴结组织B.新鲜淋巴结穿刺组织C.石蜡切片D.自然干燥的细胞学涂片20.病理检验室内质量控制的开展频率为A.每批次实验同步开展B.每周开展1次C.每月开展1次D.每季度开展1次二、多项选择题（每题2分，共20分，多选、少选、错选均不得分）1.病理标本固定的核心目的包括A.防止组织细胞自溶、腐败B.保存细胞内抗原、核酸等物质的结构完整性C.使组织硬化，便于后续取材操作D.增加组织的染色亲和力E.使细胞体积增大，便于观察2.HE染色作为常规病理染色的核心优势包括A.操作简便、成本低廉B.细胞形态对比度高，结构显示清晰C.可长期保存切片D.能直接显示特定蛋白的表达水平E.适合各类组织标本的常规诊断3.免疫组化染色中出现非特异性背景着色的常见原因包括A.内源性过氧化物酶/生物素未完全阻断B.一抗浓度过高或孵育时间过长C.洗涤不充分，未结合的抗体残留D.组织固定不良出现坏死区域E.抗原修复过度4.下列属于病理特殊染色范畴的是A.抗酸杆菌染色B.PAS染色C.HE染色D.网状纤维染色E.Masson三色染色5.临床常用的分子病理检测技术包括A.聚合酶链反应（PCR）B.荧光原位杂交（FISH）C.二代测序（NGS）D.免疫组化染色E.Sanger测序6.病理技术室处理阳性感染标本时，需配备的个人防护用品包括A.医用外科口罩B.一次性乳胶手套C.护目镜/面屏D.防水防护服E.工作帽7.冷冻切片技术的适用场景包括A.术中快速判断肿瘤良恶性B.术中快速确认手术切缘是否有肿瘤残留C.术中判断淋巴结是否存在转移癌D.用于后续免疫组化及分子检测的常规制片E.脂肪组织的形态观察8.下列属于病理细胞学检测标本范畴的是A.痰液涂片B.胸腹腔积液离心涂片C.甲状腺细针穿刺涂片D.宫颈液基细胞学涂片E.胃镜活检组织9.石蜡包埋的常规操作步骤包括A.梯度乙醇脱水B.二甲苯透明C.石蜡浸润D.包埋框内冷却成型E.10%福尔马林固定10.病理检验前质量控制的内容包括A.标本的正确采集B.标本的及时、规范固定C.标本的唯一标识D.标本的安全运输E.染色流程的标准化三、判断题（每题1分，共10分，正确填√，错误填×）1.所有病理标本都必须使用10%中性缓冲福尔马林固定。2.HE染色中伊红染色时间越长，染色效果越好。3.免疫组化染色出现阳性信号即可判定目标蛋白表达阳性。4.病理废弃标本属于医疗废物，需按照感染性废物规范处置，不得混入普通生活垃圾。5.冷冻切片的诊断准确率高于常规石蜡切片。6.抗原修复的温度越高、时间越长，免疫组化染色效果越好。7.脱落细胞学检查可以完全替代组织病理活检。8.为加快脱水速度，可将新鲜组织直接放入无水乙醇中脱水。9.FISH技术可用于检测基因的扩增、缺失、易位等结构变异。10.病理技术室操作区每日需开展紫外线消毒，每次消毒时间不少于30分钟。四、名词解释（每题4分，共20分）1.10%中性缓冲福尔马林2.抗原修复3.冷冻切片4.液基细胞学检测5.室间质量评价五、简答题（每题5分，共20分）1.简述病理常规标本固定的核心要求。2.简述HE染色的基本原理。3.简述免疫组化染色的标准操作流程。4.简述分子病理检测对FFPE组织标本的质量要求。六、案例分析题（共10分）患者女，48岁，因乳腺肿物入院行肿物切除术，临床申请常规病理诊断+免疫组化检测ER、PR、HER2，同时申请FISH检测HER2基因扩增。病理技术人员当日处理标本时因工作量较大，未切开肿物直接将整份标本放入10%福尔马林容器中固定，12小时后取材，常规制片后HE染色显示肿物中央区域细胞结构模糊、核质不清；免疫组化HER2染色出现弥漫性背景着色，结果判读为不确定，需重复检测。请回答以下问题：1.本次实验中出现组织固定不良、免疫组化背景着色的主要原因是什么？（4分）2.应如何优化操作避免此类问题再次发生？（3分）3.简述该病例中ER、PR、HER2免疫组化及FISH检测的临床意义。（3分）参考答案及解析一、单项选择题1.答案：B。解析：10%中性缓冲福尔马林（实际为4%甲醛溶液，pH7.2-7.4）固定效果稳定，可同时保存组织形态、抗原及核酸结构，是常规标本固定的首选。2.答案：B。解析：3-5μm的切片可保证单层细胞排列，形态清晰，是常规石蜡切片的标准厚度；特殊标本如肾穿刺、淋巴结可切2-3μm，骨组织可切8-10μm。3.答案：B。解析：苏木素为碱性染料，可与细胞核内带负电的核酸结合，使核染为蓝紫色；伊红为酸性染料，使胞浆染为粉红色。4.答案：B。解析：二甲苯可溶解石蜡，是脱蜡的首选试剂，后续经梯度乙醇脱去二甲苯后即可进行染色。5.答案：B。解析：热抗原修复（柠檬酸缓冲液高压/微波加热）操作简便、修复效果稳定，是90%以上免疫组化项目的首选抗原修复方式。6.答案：C。解析：95%乙醇固定可保持细胞形态完整，避免细胞皱缩，是细胞学标本湿固定的首选。7.答案：C。解析：我国《病理科建设与管理指南》明确要求，常规病理剩余组织标本保存期限不少于30年。8.答案：D。解析：含钙化灶的组织需将钙化灶朝向包埋面，避免切片时损坏刀刃，同时保证钙化区域可被完整切出。9.答案：B。解析：PAS染色可使糖原、黏液、真菌细胞壁中的多糖类物质染为紫红色，常用于真菌感染、肾小球疾病、黏液性肿瘤的辅助诊断。10.答案：A。解析：3%过氧化氢甲醇溶液可灭活组织内的内源性过氧化物酶，避免后续DAB显色时出现非特异性背景。11.答案：B。解析：固定时间超过72小时会导致核酸交联断裂，降解程度显著升高，是影响FFPE组织核酸质量的核心因素。12.答案：B。解析：冷冻切片从标本接收到出具制片结果仅需15-30分钟，是术中快速病理诊断的核心技术，但其形态清晰度低于石蜡切片。13.答案：B。解析：分化步骤使用1%盐酸乙醇，可脱去与组织非特异性结合的苏木素，使细胞核着色清晰、胞浆无色，保证HE染色的对比度。14.答案：B。解析：病理技术室接触的标本可能携带致病微生物，属于生物安全二级防护区域。15.答案：C。解析：Gomori银染色可使网状纤维染为黑色，用于判断肿瘤的来源及浸润程度；Masson三色、VG染色用于显示胶原纤维，普鲁士蓝染色用于显示含铁血黄素。16.答案：B。解析：阴性对照使用已知目标蛋白表达阴性的组织同步染色，若阴性对照无阳性信号，可排除实验流程导致的非特异性染色，保证结果可靠性。17.答案：D。解析：石蜡切片的标准切片角度为10-15°，不会导致切片褶皱；刀钝、蜡块过硬、展片水温过低是褶皱的常见原因。18.答案：B。解析：1500-2000转/分离心5分钟即可使细胞充分沉降，同时避免细胞破碎变形。19.答案：B。解析：流式细胞术需检测活细胞或新鲜细胞的膜抗原，固定后组织的抗原表位被破坏，无法用于检测。20.答案：A。解析：室内质控需与每批次患者标本同步检测，及时发现批次实验的误差，保证结果准确性。二、多项选择题1.答案：ABCD。解析：固定会使组织细胞收缩，不会使体积增大，E选项错误。2.答案：ABCE。解析：HE染色无法显示特定蛋白的表达水平，需通过免疫组化实现，D选项错误。3.答案：ABCDE。解析：所有选项均为免疫组化非特异性背景的常见诱因。4.答案：ABDE。解析：HE染色属于常规染色，不属于特殊染色范畴，C选项错误。5.答案：ABCE。解析：免疫组化属于蛋白水平检测技术，不属于分子病理检测范畴，D选项错误。6.答案：ABCDE。解析：所有选项均为处理感染性标本的必备防护用品。7.答案：ABC。解析：冷冻切片的冰晶会破坏抗原及核酸结构，不适合用于常规免疫组化及分子检测；冷冻切片对脂肪组织的形态显示效果差，D、E选项错误。8.答案：ABCD。解析：胃镜活检组织属于组织病理标本，不属于细胞学标本，E选项错误。9.答案：ABCD。解析：固定是包埋前的步骤，不属于包埋操作流程，E选项错误。10.答案：ABCD。解析：染色流程标准化属于检验中质量控制内容，E选项错误。三、判断题1.答案：×。解析：需做酶组织化学、流式细胞术、部分分子检测的标本需留取新鲜组织，不得用福尔马林固定。2.答案：×。解析：伊红染色时间过长会导致胞浆着色过深，细胞核与胞浆对比度下降，影响诊断。3.答案：×。解析：免疫组化结果判读需结合阳性、阴性对照，排除非特异性染色干扰后，阳性信号定位正确才可判定为阳性。4.答案：√。解析：病理废弃标本携带潜在感染性，属于感染性医疗废物，需按规范处置。5.答案：×。解析：冷冻切片受冰晶、制片时间短等因素影响，诊断准确率约为95%，低于石蜡切片的99%以上，石蜡切片是病理诊断的金标准。6.答案：×。解析：过度抗原修复会破坏抗原表位，同时增加非特异性背景，反而降低染色质量。7.答案：×。解析：细胞学标本存在取样局限、无法观察组织结构等不足，仅作为筛查手段，不能替代组织活检。8.答案：×。解析：直接用无水乙醇脱水会导致组织表面快速收缩变硬，内部水分无法脱出，最终导致组织硬脆、切片困难，需用梯度乙醇逐步脱水。9.答案：√。解析：FISH通过荧光标记的核酸探针与目标基因互补结合，可直观检测基因的拷贝数及结构变异。10.答案：√。解析：符合生物安全管理要求，紫外线消毒可有效杀灭操作区表面的致病微生物。四、名词解释1.10%中性缓冲福尔马林：是病理常规固定的首选固定液，由4%甲醛溶液用磷酸盐缓冲液配置而成，pH值稳定在7.2-7.4，可有效保存组织细胞形态、抗原及核酸的结构完整性，避免固定导致的组织酸化。2.抗原修复：是免疫组化染色的关键步骤，指甲醛固定过程中蛋白交联导致抗原决定簇被封闭，通过热修复或酶消化的方式打开交联键，使抗原决定簇重新暴露，保证抗体可与目标抗原特异性结合的过程。3.冷冻切片：是将新鲜组织快速冷冻至-20℃左右达到合适硬度后，直接用冷冻切片机切片的技术，特点是制备速度快，从标本接收到完成制片仅需15-30分钟，主要用于术中快速病理诊断。4.液基细胞学检测：是细胞学标本制备的改良技术，将采集的细胞放入细胞保存液中，通过离心去除黏液、红细胞等杂质，将均匀的细胞层制片染色，可提高细胞的清晰度及异常细胞的检出率，常用于宫颈癌筛查、浆膜腔积液细胞检测等。5.室间质量评价：是病理质量控制的重要组成部分，由上级质控机构向参与实验室发放统一的质控标本，各实验室按常规流程检测后回报结果，由质控机构评价各实验室的检测能力，识别实验室间的差异，保证检测结果的一致性。五、简答题1.答：病理常规标本固定的核心要求包括：①固定液量：为标本体积的10-20倍，保证标本完全浸没在固定液中；②固定时间：穿刺类小标本固定4-6小时，手术切除大标本固定12-24小时，最长不超过72小时；③固定液选择：常规标本首选10%中性缓冲福尔马林，需做特殊检测的标本留取新鲜组织；④标本预处理：直径大于1cm的实性标本需每隔0.5cm平行切开，空腔脏器剪开平铺，保证固定液充分接触所有组织面。2.答：HE染色的基本原理为：①苏木素为碱性染料，可与细胞核内带负电荷的脱氧核糖核酸（DNA）特异性结合，使细胞核染为蓝紫色；②伊红为酸性染料，可与细胞浆内带正电荷的蛋白质特异性结合，使细胞浆、细胞外基质等成分染为不同程度的粉红色；③通过两种染料的对比染色，可清晰显示组织细胞的形态结构及病变特征，为病理诊断提供基础形态学依据。3.答：免疫组化染色的标准操作流程为：①石蜡切片脱蜡至蒸馏水；②抗原修复：根据抗体要求选择热修复或酶消化修复；③阻断内源性过氧化物酶：3%过氧化氢室温孵育10分钟；④血清封闭：5%-10%非免疫动物血清室温孵育10分钟，减少非特异性吸附；⑤滴加一抗：4℃孵育过夜或37℃孵育1-2小时；⑥滴加二抗：37℃孵育30分钟；⑦DAB显色：镜下控制显色时间，出现特异性阳性信号后终止显色；⑧苏木素复染细胞核，盐酸乙醇分化、温水返蓝；⑨梯度乙醇脱水、二甲苯透明，中性树胶封片后镜下判读。4.答：分子病理检测对F