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(12)发明专利申请(10)申请公布号CN119738579A(54)发明名称(57)摘要<浓度/稀释度>(pg/mL)2所述酶标二抗包括1:1000~1:5000稀释倍数的羊抗人IgGFc;34所述酶标二抗包括1:1000~1:5000稀释倍数的羊抗人IgGFc;5附图说明(0.0444-11.8)/[1+(x/3640)^1.067操作步骤具体参数包被板准备配制包被液：称取0.75g碳酸钠，1.46g碳酸氢钠，加入去离子水定容至500mL,充分混匀，备用；取重组人CD3ε和CD38异二聚体蛋白一支，加入去离子使取该浓度蛋白用包被液稀释制成终浓度为5~10μg/mL包被蛋白溶液包被酶标板：将5~10μg/mL包被蛋白加入空酶标板中，每孔100μL,置于洗板300μL/孔，3次封闭300μL/孔，36℃1小时标准曲线范围样品孵育时间36℃,2小时洗板300μL/孔，3次二抗按1:1000~1:5000比例稀释，36℃,1小时洗板300μL/孔，3次显色100μL/孔终止50μL/孔置酶标仪中测定波长450nm和630nm处的OD值。9行。第一份样品第二份样品性分别为1.93%和6.63%,中间精[0079]表2蛋白质含量标定结果蛋白质含量标定结果(mg/mL)重复性(CV%)重复1重复2重复3中间精密度[0081]实施例2重组人源化CD3抗体含量的检测方法的建立标准曲线浓度(pg/mL)OD450nm值OD630nm值化CD3抗体)室温(10℃室温(10℃样本(重组人源化CD3抗体)L)标准曲L)检测检测值1L)检测检测L)L)回收率检测检测值1(pL)检测检测 g/mL)回收率检测检测值1(pL)检测检测L)平平均值L)回收率检值1(pL)检测检测L)L)回收率8%11653961%52%68795%4491%888161355[0134]表9不同标准曲线拟合方式的结果浓度单位(pg/mL)理论浓度1111结果重组人源化CD3抗体标准品浓度(pg/mL)[0155]结果重组人源化CD3抗体标准品浓度(pg/mL)重组人源化CD3抗体标准品浓度(pg/mL)回收率回收率4℃,180天回收率-20℃,0天回收率回收率-20℃,180天[0161]实施例3试剂盒应用 序号名称包被蛋白结果1检测试剂盒双抗原列标准曲线成立，R²为0.998,见品稀释度不呈梯度2免疫试剂盒双抗原列标准曲线成立，R²为0.998,见品稀释度不呈梯度3双抗原列标准曲线成立，R²为0.996,见品稀释度不呈梯度4CD3抗体定量检测间接法化CD3抗体，实验结果标准曲线成立，R²为1,见图7。结果异常，检测结果与空白对照一2、用本发明中的重组人源化CD3抗体及山羊抗人IgGFc(HRP)预吸附二抗替换该试Standard和HRP-Goat准曲线各浓度的OD450nm值与空白对照一致。1/4页1/4页标准曲线<浓度/稀释度>(pg/mL)标准曲线<浓度/稀释度>(pg/mL)图33/4页3/4页2000450(值)450(值)

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