CN111511895B 干细胞培养用支架材料以及使用了该支架材料的干细胞培养方法 （积水化学工业株式会社）

2020.06.23PCT/JP2018/0483912018.12.27WO2019/131982JA2019.07.04JP2009273444A,2009.11.26US5880216A,1999.03.09干细胞培养用支架材料以及使用了该支架包含合成树脂，其中，100℃储能模量为1.0×104pa以上且1.0×108pa以下，25℃储能模量与100℃储能模量的比((25℃的储能模量)/(100℃该干细胞培养用支架材料具备适度的亲水性以2所述细胞培养用支架材料的25℃储能模量为5.0×108Pa以上且5.0×109P所述聚乙烯醇缩醛树脂包含具有氨基或酰胺结构的所述聚乙烯醇缩醛树脂包含0.1摩尔％以上20摩尔％以下的具有氨基或酰胺结构的结所述聚乙烯醇缩醛树脂的聚合度为100以上6003[0001]本发明涉及一种干细胞培养用支架材料以及使用了该支架材料的干细胞培养方(hESC)或人类诱导性多能干细胞(hiPSC)等人类多能干细胞(hPSC)等。安全且再现性优异4[0013]根据以上内容，谋求一种具备适度的亲水性以及强度的干细胞培养用支架材料、25℃储能模量与100℃储能模量之比((25℃下的储能模量)/(100℃下的储能模量))为1.0[0019](3)根据(1)或(2)所述的干细胞培养用支架材料，其中，所述干细胞为多能干细[0026]图4A以及图4B分别为实施例以及比较例的细胞接种起5天后的相位差显微镜照与100℃储能模量的比((25℃的储能模量)/(100℃的储能模量))为1.0×101以上且1.0×5[0032]就使干细胞更适宜地进行粘合的观点而言，所述树脂膜的100℃储能模量更优选一步更优选为3.0×105Pa以上且5.0×1[0033]就使干细胞更适宜地进行粘合的观点而言，所述树脂膜的25℃储能模量优选为105[0035]就使干细胞适宜地进行粘合的观点而言，所述树脂膜的玻璃化转变点优选为-30[0041]就100℃以及25℃的储能模量而言，例如可通过在主链以及侧链中导入刚性的官6[0048]本说明书中的聚(甲基)丙烯酸酯是通过使作为单体的(甲基)丙烯酸酯进行聚合7[0066]聚乙烯醇缩醛树脂优选在其一部分具有布朗台斯德碱性基团或布朗斯台德酸性80.1摩尔优选的上限为20.0摩尔％。若具有所述亚胺结构的结构单元的含量为0.1摩9有所述酰胺结构的结构单元优选为下述式(4[0099]具有所述氨基或酰胺结构的结构单元的含量的优选的下限为0.1摩尔优选的优选的下限为0.1摩尔优选的上限为20摩尔％的结构单元的含量的比例(具有亚氨基的结构单元/具有氨基或酰胺结构的结构单元)优选[0101]所述改性聚乙烯醇缩醛树脂的缩醛化度并无特别限定，优选的下限为60摩尔%,于60摩尔进一步优选为65摩尔％以上，且更优选为85摩尔％以下，进一步优选为80摩[0102]所述改性聚乙烯醇缩醛树脂的乙酰基量并无特别限定，优选的下限为0.0001摩[0103]就刚接种后的细胞粘合性的观点而言，优选在聚乙烯醇缩醛树脂的骨架中包含[0105]“干细胞”指具有自我复制能力及分化能力的细胞。将干细胞中具有自我复制能[0106]作为多能干细胞，例如可举出：诱导性多能干细胞(inducedpluripotentstemMuse细胞(multilinegedifferentiatingstressenduringcells)、胚胎癌细胞[0115]本发明也涉及一种使用了所述干细胞培养用支架材料的[0116]图1A为实施方式的干细胞培养用容器的立体概念图，图1B为其侧面截面概念[0121]具备1个或多个孔(hole)的细胞培养用测试板、细胞培养用烧瓶的材质并无特别[0125]例如，提供含有所述干细胞培养用支架材料及多糖类的干细胞培养用载体(介[0140]通过使所得到的聚乙烯醇缩丁醛1g溶解于丁醇19g中，而得到聚乙烯醇缩丁醛溶液。将所得到的聚乙烯醇缩丁醛溶液150μL喷出至φ22mm的盖玻璃上，使用旋转涂布机以2000rpm旋转20秒而得到平滑的树脂膜。将所得到的所述树脂膜连同盖玻璃一并投入φ[0143]在所得到的细胞培养用容器中加入磷酸缓冲生理食盐水1mL并在37℃的培养箱内培养基TeSRE8(STEMCELL公司制造)1mL及ROCK-Inhibitor(Y27632)10μM的存在下，在372浓度5％的培养箱内进行培养。每24小时去除培养基750μL，加入250μL的新的TeSR[0150]在所得到的细胞培养用容器中加入磷酸缓冲生理食盐水1mL并在37℃的培养箱内5的在1mL的TeSRE8培养基中利用移液破碎为50～200μm的细胞块接种在培养容器中，在培养基TeSRE8(STEMCELL公司制造)1mL及[0153]使φ10mm的氧化锆球(YTZ-10)自高度1[0157]在细胞培养试验中，使用相位差显微镜10×4倍的相位差显微镜(Olympus公司制[0173]使甲基丙烯酸甲酯48重量份、甲基丙烯酸丁酯45重量份以及丙烯酸甲氧基甲酯7