2026年高职（生物制药技术）生物制药分离纯化综合测试题及答案

2025年高职（生物制药技术）生物制药分离纯化综合测试题及答案

（考试时间：90分钟满分100分）班级______姓名______第I卷（选择题共40分）答题要求：本大题共20小题，每小题2分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的，请将正确答案的序号填在括号内。1.以下哪种分离技术基于物质在两相之间的分配系数差异进行分离？（）A.离子交换色谱B.超滤C.萃取D.凝胶过滤色谱2.生物制药分离纯化过程中，常用来去除热源的方法是（）A.活性炭吸附B.离子交换C.超滤D.透析3.蛋白质等生物大分子在离子交换色谱中，其保留时间主要取决于（）A.分子大小B.电荷性质C.溶解度D.挥发性4.凝胶过滤色谱中，最先被洗脱出来的物质是（）A.大分子物质B.小分子物质C.中等分子物质D.无法确定5.以下哪项不是亲和色谱的特点？（）A.特异性高B.分辨率高C.操作简便D.适用范围广6.在萃取过程中，若要提高萃取效率，可采取的措施是（）A.降低温度B.增加萃取剂用量C.减小两相体积比D.降低搅拌速度7.离子交换树脂的活性基团带正电荷时，属于（）A.阳离子交换树脂B.阴离子交换树脂C.两性离子交换树脂D.中性离子交换树脂8.超滤膜的截留分子量是指（）A.能截留50%溶质的分子量B.能截留90%溶质的分子量C.能截留95%溶质的分子量D.能截留100%溶质的分子量9.以下哪种方法可用于蛋白质的浓缩？（）A.透析B.超滤C.离子交换色谱D.凝胶过滤色谱10.亲和色谱中，配基与目标生物大分子之间的结合力主要是（）A.共价键B.离子键C.氢键D.疏水作用11.生物制药分离纯化中，常用的缓冲液pH值范围一般在（）A.2-4B.4-6C.6-8D.8-1012.以下哪种色谱技术可用于分离具有不同电荷性质的蛋白质混合物？（）A.离子交换色谱B.凝胶过滤色谱C.亲和色谱D.疏水作用色谱13.在离心分离中，离心机的转速越高，离心力（）A.越小B.越大C.不变D.先增大后减小14.萃取剂的选择原则不包括（）A.对溶质有较大的溶解度B.与原溶剂互溶C.与溶质有选择性的相互作用D.易于回收和再生15.离子交换色谱中，洗脱液的离子强度增加时，蛋白质的洗脱顺序一般是（）A.先洗脱电荷多的，后洗脱电荷少的B.先洗脱电荷少的，后洗脱电荷多的C.同时洗脱D.无法确定16.凝胶过滤色谱的固定相是（）A.离子交换树脂B.凝胶颗粒C.亲和配基D.疏水吸附剂17.以下哪种方法可用于去除生物样品中的小分子杂质？（）A.超滤B.离子交换色谱C.亲和色谱D.凝胶过滤色谱18.亲和色谱的洗脱方法不包括（）A.改变pH值B.加入竞争剂C.升高温度D.增加离子强度19.在生物制药分离纯化中，常用的除菌方法是（）A.过滤除菌B.加热除菌C.化学药剂除菌D.辐射除菌20.蛋白质在疏水作用色谱中的保留主要取决于（）A.分子表面的疏水基团B.分子大小C.电荷性质D.溶解度第II卷（非选择题共60分）（一）填空题（共10分）答题要求：本大题共5小题，每小题2分，共10分。请在横线上填写正确答案。1.生物制药分离纯化的主要目的是从生物材料中获得______、______、______的生物药物产品。2.离子交换色谱的分离原理是基于离子交换树脂上的______与溶液中的______进行可逆交换。3.萃取过程中，分配系数K越大，说明溶质在萃取相中的浓度越______，萃取效果越______。4.凝胶过滤色谱中，柱子的总体积Vt包括______、______和______。5.亲和色谱的配基应具备______、______、______等特点。（二）判断题（共10分）答题要求：本大题共10小题，每小题1分，共10分）判断下列各题的正误，正确的在括号内打“√”，错误的打“×”。1.超滤主要用于分离小分子物质和大分子物质。（）2.离子交换树脂的交联度越高，其交换容量越大。（）3.萃取过程中，温度升高有利于溶质的萃取。（）4.凝胶过滤色谱中，小分子物质在柱内停留时间长，后被洗脱出来。（）5.亲和色谱的分辨率比离子交换色谱低。（）6.蛋白质在不同pH值的缓冲液中，其电荷性质可能会发生改变。（）7.离心分离时，离心力与转速成正比。（）8.萃取剂的密度应与原溶剂的密度相差越大越好。（）9.离子交换色谱中，缓冲液的离子强度对蛋白质的保留时间没有影响。（）10.亲和色谱的配基与目标生物大分子之间的结合是不可逆的。（）（三）简答题（共20分）答题要求：本大题共4小题，每小题5分，共20分。简要回答下列问题。1.简述离子交换色谱的基本原理。2.萃取过程中影响萃取效率的因素有哪些？3.凝胶过滤色谱的应用有哪些？4.亲和色谱的优点和局限性分别是什么？（四）材料分析题（共10分）答题要求：阅读以下材料，回答问题。材料：在生物制药分离纯化过程中，采用离子交换色谱法分离两种蛋白质A和B。已知蛋白质A带正电荷，蛋白质B带负电荷。使用阳离子交换树脂，以pH7.0的缓冲液作为流动相进行分离。问题：1.蛋白质A和B在离子交换色谱柱上的保留情况如何？（5分）2.若要改变蛋白质A和B的洗脱顺序，可采取哪些措施？（5分）（五）综合应用题（共10分）答题要求：请根据以下要求设计一个生物制药分离纯化的流程。要求：从发酵液中分离纯化一种蛋白质药物，已知该蛋白质药物分子量较大，带负电荷，对热敏感。请设计一个综合的分离纯化流程，包括使用的主要分离技术及操作要点。（10分）答案：1.C2.A3.B4.A5.D6.B7.A8.B9.B10.A11.C12.A13.B14.B15.B16.B17.A18.C19.A20.A填空题答案：1.高纯度、高活性、符合质量标准2.活性基团、离子3.高、好4.外水体积、内水体积、孔隙体积5.特异性高、稳定性好、易于偶联判断题答案：1.×2.×3.×4.×5.×6.√7.√8.√9.×10.×简答题答案：1.离子交换色谱的基本原理是基于离子交换树脂上的活性基团与溶液中的离子进行可逆交换。当含有混合离子的溶液通过离子交换树脂时，离子会与树脂上的活性基团发生交换反应，不同离子与树脂的亲和力不同，从而实现分离。2.萃取过程中影响萃取效率的因素有：萃取剂的选择、温度、pH值、萃取剂用量、两相体积比、搅拌速度等。3.凝胶过滤色谱的应用有：分离生物大分子、测定生物大分子的分子量、脱盐、浓缩生物大分子等。4.亲和色谱的优点是特异性高、分辨率高、操作简便；局限性是配基的制备较为困难，成本较高，适用范围相对较窄。材料分析题答案：1.蛋白质A带正电荷，会与阳离子交换树脂结合，在柱上保留时间较长；蛋白质B带负电荷，不与阳离子交换树脂结合，会较快被洗脱下来。2.可采取的措施有：改变缓冲液的pH值，使蛋白质A的电荷性质改变；增加缓冲液的离子强度，降低蛋白质A与树脂的结合力；