临床质谱检测前处理技师考试试卷及答案

临床质谱检测前处理技师考试试卷及答案填空题（10题，每题1分）1.临床质谱常用血样类型包括血清、血浆和______。答案：全血2.固相萃取（SPE）基本步骤：活化、上样、______、洗脱。答案：淋洗3.液液萃取（LLE）分层依据是有机溶剂与水相的______不同。答案：极性（或密度）4.校准质谱信号漂移的物质称为______。答案：内标物5.相对离心力（RCF）的单位是______。答案：g6.样本去蛋白的方法包括沉淀法和______法。答案：超滤7.GC-MS挥发性成分常用提取方法是______。答案：顶空萃取8.LC-MS流动相常用挥发性添加剂是______。答案：甲酸（或乙酸）9.前处理核心目标：富集目标物、去干扰、______。答案：提高回收率10.SPE柱选择依据目标物______和样本基质。答案：化学性质（或极性）单项选择题（10题，每题2分）1.适合提取极性弱小分子的方法是？A.LLEB.SPEC.蛋白沉淀D.超滤答案：A2.内标物特性不包括？A.与目标物性质相似B.样本中不存在C.响应稳定D.分子量差>50答案：D3.转速不变，离心管半径增大，RCF会？A.增大B.减小C.不变D.不确定答案：A4.LC-MS蛋白沉淀常用试剂是？A.乙腈B.正己烷C.甲醇D.A+C答案：D5.SPE“活化”目的不包括？A.去柱内杂质B.平衡吸附剂C.吸附目标物D.湿润吸附剂答案：C6.改善基质效应的方法不包括？A.增加萃取次数B.用同位素内标C.稀释样本D.提高样本浓度答案：D7.顶空萃取影响因素不包括？A.温度B.时间C.样本体积D.离心转速答案：D8.去除脂质干扰的有效方法是？A.正己烷-LLEB.C18-SPEC.超滤D.蛋白沉淀答案：A9.样本浓缩常用方法是？A.氮气吹干B.真空蒸发C.冷冻干燥D.以上都是答案：D10.回收率合理范围是？A.50%-70%B.80%-120%C.100%-150%D.无范围答案：B多项选择题（10题，每题2分）1.临床质谱常用样本类型包括？A.血清B.血浆C.尿液D.脑脊液答案：ABCD2.SPE柱类型包括？A.C18柱B.C8柱C.离子交换柱D.硅胶柱答案：ABCD3.去蛋白方法有？A.有机溶剂沉淀B.盐析法C.超滤D.固相萃取答案：ABC4.影响LLE效率的因素包括？A.有机溶剂种类B.水相pHC.萃取次数D.温度答案：ABCD5.内标物选择原则包括？A.结构相似B.样本中天然存在C.响应稳定D.可定量答案：ACD6.前处理常见问题包括？A.基质效应B.回收率低C.样本污染D.浓缩不完全答案：ABCD7.LC-MS挥发性缓冲盐是？A.甲酸铵B.乙酸铵C.磷酸二氢钾D.硫酸钠答案：AB8.顶空萃取类型包括？A.静态顶空B.动态顶空C.SPME顶空D.液液顶空答案：ABC9.离心关键参数包括？A.转速B.RCFC.时间D.温度答案：ABCD10.提高回收率的方法包括？A.优化萃取条件B.多次萃取C.增加内标浓度D.减少操作损失答案：ABD判断题（10题，每题2分）1.血清样本需采集后立即离心。答案：对2.SPE淋洗会洗脱内标物。答案：错3.酸性目标物降低pH可提高LLE效率。答案：对4.蛋白沉淀后需离心去沉淀。答案：对5.同位素内标可校正基质效应。答案：对6.SPE活化只需用有机溶剂，无需水。答案：错7.冷冻干燥适合热敏性样本浓缩。答案：对8.基质效应是杂质对目标物离子化的影响。答案：对9.尿液样本可直接进质谱检测。答案：错10.回收率计算需考虑内标信号。答案：对简答题（4题，每题5分）1.简述SPE基本步骤及目的。答案：步骤为活化、上样、淋洗、洗脱。①活化：用甲醇/水冲洗柱床，去杂质、湿润吸附剂、平衡极性，使目标物易吸附；②上样：样本通过柱，目标物保留，杂质流出；③淋洗：用弱洗脱剂去残留杂质，不洗脱目标物；④洗脱：用强洗脱剂将目标物洗脱，收集用于检测。2.什么是基质效应？常见改善方法？答案：基质效应是样本中杂质（蛋白、脂质）对目标物质谱离子化的抑制/增强。改善方法：①优化前处理（增加萃取次数、SPE富集）；②用同位素内标校正；③稀释样本降低基质浓度；④调整色谱条件（流动相pH、梯度洗脱）减少共流出。3.蛋白沉淀法原理及常用试剂？答案：原理是有机溶剂/盐破坏蛋白空间结构，使其变性沉淀，与小分子分离。常用试剂：①有机溶剂（乙腈、甲醇，降低蛋白溶解度）；②盐类（硫酸铵，盐析作用）。操作后离心取上清（含目标物）。4.如何选择质谱内标物？答案：①化学性质相似（结构、极性、电离特性与目标物一致）；②样本中不存在（无天然干扰）；③响应稳定（检测条件下信号无明显降解）；④可定量（质谱可检测，浓度匹配目标物）；⑤优先同位素内标（氘代/碳13标记，完全校正基质效应）。讨论题（2题，每题5分）1.样本前处理回收率仅60%，分析原因及解决方法。答案：原因：①萃取条件差（有机溶剂极性不匹配、pH不当）；②操作损失（洗脱不完全、转移残留）；③基质干扰（杂质竞争SPE吸附位点）；④目标物降解（处理时间长、温度高）。解决：①优化萃取（调整溶剂/pH）；②减少损失（延长洗脱时间、用低吸附容器）；③增强富集（多次萃取、SPE强洗脱）；④防降解（低温操作、加稳定剂）。2.比较LLE与SPE的优缺点，说明选择原则。答案：LLE优点：操作简单、成本低、批量处理；缺点：有机