（正式版）DB43∕T 1765-2020 《斑点叉尾鮰柱形病检疫技术规程》

斑点叉尾鲫柱形病检疫技术规程2020-04-02发布2020-07-02实施I前言 Ⅱ 2规范性引用文件 3术语和定义 4检疫程序 5产地检疫采样 6一般情况调查 27.1外部检查 7.2解剖检查 8镜检 29实验室检验 29.1实验准备 9.2病原菌分离 9.3病原菌鉴定 310斑点叉尾柱形病的判定 3 附录A(资料性附录)斑点叉尾柱形病流行病学调查 4附录B(资料性附录)柱状黄杆菌培养基的配制方法 5本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。请注意本标准某些内容可能涉及专利，本标准发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由湖南省畜牧水产事务中心提出。本标准由湖南省农业标准化委员会归口。本标准起草单位：长沙学院、长沙市水生动物防疫检疫站、湖南省畜牧兽医研究所、长沙市动物疫病预防控制中心、常德市畜禽水产品质量安全检验检测中心、平江县动物疫病预防控制中心、安化县鼓楼乡动物防疫站、汨罗市畜牧水产服务中心、湘阴县水产科学研究所、湖南生物机电职业技术学院。本标准主要起草人：向静、王志明、唐爱明、王钦、江新明、夏晓伟、许吉秋、黄超、江为民、文立华、张建国。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。SC/T7103水生动物产地SC/T7201-1鱼类细菌病检疫技术规程第1部分：通用技术斑点叉尾©柱形病cloumnare)。主要症状为烂鳃、烂鳍、烂尾、皮肤溃烂以及内脏充血。(20～25)℃的水温是斑点叉尾鲫柱形病高发的温度范围。斑点叉尾柱形病是一种破坏性严重的细菌性疾病，各种规格的斑点叉尾均可发病，一旦暴发该病，死亡率可达80%以上，最高死亡率可达100%。按DB43/221的规定执行。按SC/T7103的规定执行。鉅柱形病流行病学调查参见附录A。工2色灶逐渐扩大变成浅灰色溃烂，样似“马鞍状”。发病鱼的口腔、下颌和腹部粘附着黄褐色物质，用出现以上病理症状，可进一步判断为疑似斑点叉尾柱形病。剪取少量病鱼病灶处鳃丝放在载玻片上，加上(2～3)滴无菌水(或清水),盖上盖玻片，(400～600)倍显微镜下观察。鱼体鳃上无大量寄生虫和真菌，放置(20～30)min,镜检见到鳃丝上有大量细长、参照SC/T7201-1的规定执行。参照SC/T7201-1的规定执行。柱状黄杆菌培养基的配制方法参见附录B。参照SC/T7201-1的规定执行。将取样的接种环在Shieh琼脂培养基平板上划线，置28℃恒温培养(36～48)h;挑选形态结构、3颜色相同的单个菌落，在平板上再次划线分离纯化，28℃恒温培养24h。取单个纯化菌落，用于病原鉴将纯化的菌种接种于Shieh琼脂培养基平板，置28℃恒温分别培养24h、48h,观察菌落的形态、生化特性鉴定操作与结果判定方法按SC/T7014的规定执行。颜色较浅的假根状。菌体大小(0.5～0.7)μm×(4～8)μm,少数菌体长度达(15～25)μm。菌体普霉素的Shieh培养基中生长。氧化酶、细胞色素酶、接触酶反应均为阳性；产生硫化氢，液化明胶，分解酪氨酸；水解吐温20和吐温80;赖氨酸脱羧酶、精氨酸脱羧酶和鸟氨酸试验阴性；不利用淀粉、取洁净载玻片一张，用移液器取柱状黄杆菌诊断血清10μ1,滴加于载玻片的一端，另一端则滴加生理盐水10μ1,做对照。然后用铂耳环挑取少许待检细菌，置生理盐水滴中缓慢混匀，再将铂耳环灭菌后冷却，钓取少许待检细菌置于血清滴中缓慢混匀。在(1～3)min内，血清滴若出现明显10斑点叉尾©柱形病的判定参照SC/T7015的规定执行。4附录A(资料性附录)调查内容鱼种来源生态养殖方式很少暴发斑点环水养殖系统中，极易发生斑点叉尾柱形患病鱼规格冬春低温季节出现大批量发病死亡，可水质池塘水质好，经常消毒，很少养殖环境恶化、低溶氧、高氨氮、亚硝酸盐含量高的养殖水体，易发生斑点叉尾鲫柱形病。全程喂食全价配合饲料很少在鱼体受伤时，易暴发斑点叉尾柱形病。发病死亡情况一旦暴发柱形病，斑点叉尾死亡率可达80%以上，最高可达当斑点叉尾暴发疾病，但死亡率很低，药物使用与治使用消毒药物对水体消毒，可有效当斑点叉尾鲫暴发疾病，使用消毒药物点叉尾鲴柱形病。5附录B(资料性附录)B1Shieh营养肉汤培养基：称取蛋白胨5g、酵母提取物0.5g、醋酸钠0.01g、氯化钡0.01g、磷酸氢二钾0.1g、磷酸二氢钾0.05g、硫酸镁0.3g、氯化钙0.0067g、硫酸铁0.001g、碳酸氢钠0.05g,加入1000mL蒸馏水中，调节pH值至7