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文档简介
2026年病理技术考试试题及答案第一部分:单项选择题(共40题,每题1分,共40分)1.在常规病理技术中,最常用的固定液是()。A.95%乙醇B.4%多聚甲醛C.10%中性缓冲福尔马林D.Carnoy固定液2.10%中性缓冲福尔马林中,甲醛的实际浓度通常为()。A.10%B.4%C.3.7%D.5%3.组织脱水过程中,最常用的脱水剂是()。A.丙酮B.乙醇C.正丁醇D.叔丁醇4.组织从脱水剂进入石蜡包埋前,必须经过的中间媒介是()。A.二甲苯B.甲醇C.氯仿D.苯5.常规石蜡包埋时,石蜡的熔点一般选择在()。A.52B.56C.60D.456.常规H&E染色中,苏木精染液主要使细胞核着色,其属于()。A.酸性染料B.碱性染料C.中性染料D.复合染料7.在H&E染色中,用于“分化”苏木精染色过深部分的常用溶液是()。A.1%盐酸乙醇B.0.5%氨水C.70%乙醇D.1%乙酸8.伊红是常用的细胞质染料,它属于()。A.碱性染料B.酸性染料C.脂溶性染料D.金属络合染料9.组织切片经脱蜡至水后,在进入苏木精染液前,通常需要进行的处理是()。A.酸化处理B.媒染剂处理C.酸化水洗D.无需特殊处理10.常规病理组织切片的最佳厚度为()。A.1B.3C.8D.1011.在冷冻切片技术中,最常用的包埋剂是()。A.石蜡B.OCT复合物C.琼脂D.明胶12.显示糖原的常用染色方法是()。A.PAS染色法B.Masson三色染色法C.油红O染色法D.刚果红染色法13.免疫组织化学染色中,最常用的显色底物是()。A.NBT/BCIPB.AECC.DABD.新复红14.抗原修复分为热修复和化学修复,常用的热修复缓冲液是()。A.PBS缓冲液B.Tris缓冲液C.柠檬酸盐缓冲液(pH6.0)D.碳酸氢钠缓冲液15.在免疫组化染色中,为了减少内源性过氧化物酶的干扰,通常使用()进行阻断。A.正常羊血清B.3%C.牛血清白蛋白D.TritonX-10016.脱钙是含骨组织制片的关键步骤,常用的脱钙液是()。A.10%硝酸B.5%乙酸C.10%盐酸D.1%硫酸17.判断脱钙是否终点的方法是()。A.组织变软B.脱钙液清澈C.钙盐化学检测呈阴性D.固定时间足够长18.在常规石蜡切片过程中,展片时的水温通常控制在()。A.30B.40C.50D.6019.下列哪种试剂是常用的透明剂()。A.乙醇B.二甲苯C.甲醛D.冰醋酸20.细胞病理学涂片固定中,常用的固定液是()。A.95%乙醇B.10%福尔马林C.丙酮D.甲醇21.Mallory三色染色法主要用于显示()。A.脂肪B.胶原纤维和肌纤维C.糖原D.弹性纤维22.在电子显微镜技术中,常用的固定液是()。A.10%福尔马林B.2.5%戊二醛C.95%乙醇D.甲醇23.下列关于瑞氏染色的描述,正确的是()。A.主要用于组织切片染色B.是细胞学涂片常用的染色方法C.只能染色细胞核D.不含甲醇24.在免疫荧光技术中,常用的荧光素是()。A.DABB.FITCC.HRPD.AP25.组织块在固定时,固定液的体积应为组织体积的()。A.1∼B.5∼C.15∼D.50倍以上26.为了防止组织在脱水过程中收缩或变硬,脱水梯度应()。A.由高浓度到低浓度B.由低浓度到高浓度C.保持恒定浓度D.先高后低再高27.切片时造成组织出现裂隙或皱褶,最常见的原因是()。A.切片刀太钝B.组织脱水过度C.组织块过硬D.切片速度过快28.透射电镜样品后染色常用的重金属盐是()。A.醋酸铀和柠檬酸铅B.锇酸C.戊二醛D.乙醇29.原位杂交技术主要用于检测()。A.蛋白质B.DNA或RNAC.脂肪D.糖类30.下列哪种染色法用于显示抗酸杆菌()。A.革兰染色B.抗酸染色C.吉姆萨染色D.银染色31.在免疫组化自动化染色中,最常用的检测系统是()。A.PAP法B.ABC法C.EnVision法D.直接法32.组织芯片制作中,受体蜡块通常使用()。A.低熔点石蜡B.高熔点石蜡C.普通石蜡D.混合蜡33.封固剂的作用是()。A.固定组织B.脱水组织C.透明组织D.封闭切片并保存染片34.中性树胶是常用的封固剂,其折光率应接近()。A.1.0B.1.33C.1.515D.1.7035.Gomori六胺银染色主要用于显示()。A.真菌B.细菌C.病毒D.螺旋体36.组织切片染色后,为了便于长期保存,最后一步是()。A.脱水B.透明C.封固D.水洗37.下列哪种情况适合使用冷冻切片()。A.观察细微细胞结构B.术中快速病理诊断C.大批量常规活检D.病毒包涵体观察(首选)38.在免疫组化染色中,阳性结果通常呈现的颜色是()。A.蓝色B.红色C.棕黄色D.绿色39.为了消除非特异性背景染色,常在加一抗前使用()。A.正常非免疫血清B.PBSC.TrisD.DAB40.Masson三色染色中,胶原纤维通常被染成()。A.红色B.蓝色C.黄色D.黑色第二部分:多项选择题(共20题,每题2分,共40分。多选、少选、错选均不得分)1.影响组织固定的因素包括()。A.固定液的种类B.固定液的温度C.固定液的pH值D.组织块的大小2.常用的组织固定液有()。A.10%中性缓冲福尔马林B.95%乙醇C.Bouin液D.Zenker液3.组织脱水过程中,若脱水不彻底,会导致()。A.透明不完全B.切片困难C.染色不均匀D.细胞结构清晰4.下列哪些试剂属于透明剂()。A.二甲苯B.氯仿C.苯D.环己酮5.H&E染色中,导致细胞核染色过浅的原因可能有()。A.苏木精染液时间过短B.分化时间过长C.蓝化时间不足D.乙醇浓度过高6.免疫组织化学染色中,抗原修复的方法包括()。A.微波加热修复B.高压锅加热修复C.胰酶消化修复D.胃酶消化修复7.常用的特殊染色方法包括()。A.Masson三色染色B.PAS染色C.刚果红染色D.抗酸染色8.冷冻切片的优点包括()。A.速度快B.能较好地保存脂肪和脂类物质C.能保存某些酶的活性D.细胞结构比石蜡切片更清晰9.在病理技术中,造成切片出现气泡的原因可能有()。A.封固剂中含有气泡B.盖玻片未平放C.组织切片干燥D.载玻片不干净10.免疫组化染色中出现非特异性背景染色的原因包括()。A.内源性生物素干扰B.一抗浓度过高C.孵育时间过长D.洗涤不充分11.常用的显示脂肪的染色方法有()。A.苏丹III染色B.油红O染色C.刚果红染色D.PAS染色12.电子显微镜样品制备的基本步骤包括()。A.取材与固定B.脱水与包埋C.超薄切片D.染色13.细胞病理学检查的样本类型包括()。A.脱落细胞学B.细针穿刺细胞学C.刮片细胞学D.印片细胞学14.下列关于脱钙的描述,正确的有()。A.脱钙后必须彻底水洗B.脱钙时间越长越好C.脱钙时应每日更换脱钙液D.脱钙后组织变软15.在免疫荧光技术中,常用的荧光素有()。A.FITCB.TRITCC.PED.DAB16.病理实验室常用的质量控制措施包括()。A.仪器定期维护B.试剂批号管理C.设立阳性对照和阴性对照D.技术人员定期培训17.组织切片中常见的假象或伪影包括()。A.刀痕B.气泡C.皱褶D.染色沉淀18.下列哪些染色法可用于显示网状纤维()。A.镀银染色B.Masson染色C.Gomori染色D.PAS染色19.分子病理学技术主要包括()。A.PCRB.FISHC.SouthernBlotD.测序20.实验室生物安全防护中,关于甲醛处理的描述,正确的是()。A.必须在通风橱内操作B.废液需专门处理C.可以直接排入下水道D.应佩戴防护手套和口罩第三部分:判断题(共15题,每题1分,共15分。对的打“√”,错的打“×”)1.乙醇是一种优良的固定剂,能很好地保存糖原,但不能沉淀核蛋白。()2.组织固定的根本目的是为了防止组织自溶和腐败,并保持组织细胞的固有形态。()3.在脱水过程中,组织块可以直接放入无水乙醇中进行快速脱水。()4.二甲苯是极好的透明剂,也是优良的脱水剂。()5.苏木精是一种天然染料,不能直接染色,必须经过氧化成熟后才能使用。()6.伊红Y是一种水溶性染料,配制成乙醇溶液染色效果更好。()7.切片时,切片刀的角度越大,切片越容易,但切片质量会下降。()8.冷冻切片不需要经过脱水、透明和包埋步骤。()9.免疫组化染色中,所有的抗体都需要进行抗原修复。()10.DAB显色液具有致癌性,操作时应特别注意防护。()11.脱钙完全的标志是针刺组织无阻力感。()12.透射电镜观察的组织切片厚度通常与石蜡切片厚度相当。()13.原位杂交技术既可以检测DNA,也可以检测RNA。()14.细胞蜡块技术是将细胞学样本制成蜡块进行常规切片的技术。()15.病理技术员在取材时,不需要记录组织的颜色、形状和大小。()第四部分:填空题(共20空,每空1分,共20分)1.10%中性缓冲福尔马林的配方是:40%甲醛mL,磷酸二氢钠g,磷酸氢二钠g,蒸馏水加至mL。2.组织脱水一般遵循从浓度到浓度的梯度原则。3.常规石蜡切片机切片时,组织块应固定在持蜡器上,且切面应与刀刃。4.H&E染色中,苏木精将细胞核染成色,伊红将细胞质染成色。5.在免疫组化EnVision二步法中,酶标聚合物通常含有酶和抗体。6.抗酸染色中,抗酸杆菌被染成色,背景被染成色。7.常用的封固剂有树胶和介质。8.PAS染色阳性反应通常呈色,主要检测和糖蛋白。9.透射电镜常用的包埋介质是,常用的超薄切片厚度为nm。10.细胞学涂片常用的染色方法有染色和染色。11.组织芯片是将多个组织标本排列在同一个蜡块上。12.免疫荧光双标记中,常用的两种荧光素组合是FITC(绿色)和(红色)。第五部分:名词解释(共10题,每题3分,共30分)1.固定2.脱水3.透明4.媒染剂5.分化6.蓝化7.抗原修复8.原位杂交9.细胞蜡块10.脱钙第六部分:简答题(共6题,每题5分,共30分)1.简述H&E染色的基本原理及步骤。2.简述免疫组织化学染色中抗原修复的原理及常用方法。3.简述冷冻切片与石蜡切片的主要区别及优缺点。4.简述造成组织切片染色不均匀(阴阳脸)的可能原因及解决方法。5.简述Masson三色染色的主要成分及其在病理诊断中的应用。6.简述病理技术实验室生物安全的基本要求。第七部分:综合应用与分析题(共3题,每题10分,共30分)1.某技术员在制作一组肾穿刺活检标本的石蜡切片时,发现切片染色后细胞核着色模糊,细胞核与细胞质对比度差,且切片上有大量细小的空洞。请分析可能的原因,并提出相应的改进措施。2.在进行乳腺癌HER2免疫组化染色时,发现阳性对照组织着色良好,但病人组织的细胞膜呈现均一的棕黄色强阳性,且细胞核和细胞质也有不同程度的着色(背景深)。同时,阴性对照也出现了非特异性着色。请分析造成这种现象的可能原因,并设计一个排查流程。3.一位新入职的技术员在使用冷冻切片机进行术中快速病理诊断时,发现切出的切片卷曲严重,无法展平,且组织细胞结构模糊,无法诊断。请从冷冻切片技术的取材、温度控制、切片操作及固定等方面,分析可能出现的问题并给出解决方案。参考答案与解析第一部分:单项选择题1.【答案】C【解析】10%中性缓冲福尔马林因其穿透力强、固定均匀、能较好保存组织抗原和形态结构,且价格低廉,是病理技术中最常用的固定液。2.【答案】B【解析】市售福尔马林浓度为37%~40%,配制10%福尔马林实际上是取1份40%甲醛加9份水(或缓冲液),因此实际甲醛浓度为4%。3.【答案】B【解析】乙醇是最常用的脱水剂,它脱水能力强,可与水以任何比例混合,且硬化组织适中。4.【答案】A【解析】石蜡不溶于水和乙醇,但溶于二甲苯。二甲苯也不溶于水,但能溶于乙醇。因此,二甲苯作为中间溶剂,既能溶解脱水剂(乙醇),又能溶解包埋剂(石蜡),起到桥梁作用。5.【答案】B【解析】常规石蜡包埋通常选用熔点在56~58℃的石蜡,此温度既能保持石蜡的硬度以利于切片,又不会过高而烫伤组织。6.【答案】B【解析】苏木精是一种碱性染料(阳离子染料),易与细胞核中酸性物质(如DNA、RNA)结合(嗜碱性),使细胞核着色。7.【答案】A【解析】盐酸乙醇是常用的分化剂,能破坏苏木精与组织的部分结合,将过深的颜色褪去,突出细胞核结构。8.【答案】B【解析】伊红是一种酸性染料(阴离子染料),易与细胞质中碱性物质(如蛋白质)结合(嗜酸性),使细胞质着色。9.【答案】C【解析】切片脱蜡至水后,通常用酸化水(含少量乙酸的蒸馏水)洗涤,以增强细胞核对苏木精的亲和力,利于染色。10.【答案】B【答案】3~5μm是常规病理诊断最理想的厚度,既能保证细胞层次不重叠,又能提供足够的染色对比度。11.【答案】B【解析】OCT(OptimalCuttingTemperature)复合物是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物,冷冻后支持组织,是冷冻切片的标准包埋剂。12.【答案】A【解析】PAS(PeriodicAcid-Schiff)染色法是显示糖原(及粘多糖、基底膜等)的经典方法,阳性呈紫红色。13.【答案】C【解析】DAB(3,3'-二氨基联苯胺)是辣根过氧化物酶(HRP)最常用的显色底物,反应产物呈棕黄色沉淀,不溶于有机溶剂,便于永久保存。14.【答案】C【解析】柠檬酸盐缓冲液(pH6.0)和Tris-EDTA缓冲液(pH9.0)是最常用的热抗原修复缓冲液,前者应用更为普遍。15.【答案】B【解析】过氧化氢()能破坏组织内的内源性过氧化物酶活性,防止其在DAB显色时产生非特异性沉淀。16.【答案】A【解析】10%硝酸是常用的脱钙液,脱钙速度快,但作用强,对组织形态和抗原有一定损伤。17.【答案】C【解析】虽然组织变软是直观感觉,但科学判断终点是进行化学检测(如钙盐检测液检测),或通过物理探测(如放射线照相)确认无钙存在。18.【答案】B【答案】展片水温应略低于石蜡熔点,约42~45℃可使切片充分舒展且不致石蜡融化过快导致组织离散。19.【答案】B【解析】二甲苯是最常用的透明剂,能使组织透明,并溶解石蜡。20.【答案】A【解析】95%乙醇能迅速固定细胞并保存胞质内糖原和脂质,是细胞学涂片的首选固定液。21.【答案】B【解析】Mallory三色染色法将胶原纤维染成蓝色,肌纤维和红细胞染成红色,用于区分结缔组织和肌组织。22.【答案】B【解析】戊二醛是电镜标准的初级固定剂,它能很好地保存微细结构和蛋白质,穿透力虽较福尔马林弱,但交联作用强。23.【答案】B【解析】瑞氏染色是血涂片和细胞学涂片最常用的复合染色方法,由酸性伊红和碱性亚甲蓝组成。24.【答案】B【解析】FITC(异硫氰酸荧光素)呈黄绿色荧光,是应用最广泛的荧光素。25.【答案】C【解析】固定液体积不足会导致固定不均或组织变质,一般要求体积为组织体积的15~20倍。26.【答案】B【解析】梯度脱水应从低浓度(如75%)逐步过渡到高浓度(无水乙醇),以避免组织剧烈收缩。27.【答案】B【解析】脱水过度(高浓度乙醇时间过长)会导致组织严重收缩、变脆,切片时易碎裂或产生皱褶。28.【答案】A【解析】醋酸铀和柠檬酸铅是电镜常规的双重电子染色剂,分别增加细胞核膜和细胞质及膜的电子密度。29.【答案】B【解析】原位杂交(ISH)是用标记的核酸探针,在组织细胞原位检测特定的DNA或RNA序列。30.【答案】B【解析】抗酸染色(如Ziehl-Neelsen法)是检测结核杆菌等抗酸杆菌的特异性染色。31.【答案】C【解析】EnVision法(二步法)灵敏度高、背景低、操作简便,是目前自动化免疫组化最常用的检测系统。32.【答案】B【解析】受体蜡块用于接受组织芯,需具备一定的硬度和韧性,通常使用高熔点石蜡或特殊的硬度调整石蜡。33.【答案】D【解析】封固剂的作用是将切片永久封存在载玻片和盖玻片之间,提供适宜的折光率并保护切片。34.【答案】C【解析】光学显微镜物镜的介质(玻璃)折光率约为1.515,中性树胶的折光率设计为接近此值,以减少光折射造成的图像模糊。35.【答案】A【解析】Gomori六胺银染色是真菌和某些微生物(如肺孢子菌)的高灵敏度染色方法,菌体呈黑色或褐色。36.【答案】C【解析】封固是最后一步,经脱水、透明后,滴加封固剂并加盖玻片。37.【答案】B【解析】冷冻切片最大的优势是速度快(15-30分钟),因此是手术中快速病理诊断的首选方法。38.【答案】C【解析】在HRP-DAB系统中,阳性结果呈现棕黄色;在APFastRed系统中呈现红色。39.【答案】A【解析】使用与二抗来源相同的正常非免疫血清封闭,可以占据组织中的非特异性结合位点,减少背景染色。40.【答案】B【解析】在经典的Masson三色染色中,胶原纤维被苯胺蓝染成蓝色。第二部分:多项选择题1.【答案】ABCD【解析】固定效果受固定液性质、温度(低温穿透慢)、pH(中性缓冲最佳)、组织块大小(越厚越慢)等多因素影响。2.【答案】ABCD【解析】均为病理常用固定液。A为通用;B用于糖原、冰冻切片;C用于结缔组织、胚胎组织;D用于淋巴结、骨髓等。3.【答案】ABC【解析】脱水不彻底会导致组织中残留水分,使二甲苯无法充分进入(透明不完全),石蜡无法渗入(包埋不好),进而导致切片困难和染色不均。4.【答案】ABCD【解析】均为能使组织透明的有机溶剂,其中二甲苯最常用。5.【答案】ABC【解析】苏木精时间短、分化过度(酸处理太强)、蓝化不足(碱性处理不够)均会导致细胞核着色浅或发红。6.【答案】ABCD【解析】抗原修复包括热诱导修复(微波、高压、水浴)和酶诱导修复(胰酶、胃酶、蛋白酶K)。7.【答案】ABCD【解析】均为病理诊断中除H&E外的重要辅助诊断特殊染色。8.【答案】ABC【解析】冷冻速度快,无需有机溶剂处理,能保存脂类和酶活性。缺点是细胞结构通常不如石蜡切片精细。9.【答案】ABD【解析】封固剂本身气泡、操作手法不当、载玻片脏污都会导致气泡。10.【答案】ABCD【解析】内源性生物素(如肝、肾)、抗体浓度过高、孵育时间过长、洗涤不充分都是常见原因。11.【答案】AB【解析】苏丹III和油红O是显示中性脂肪的特异性染色,前者呈橘黄色,后者呈红色。12.【答案】ABCD【解析】电镜制样步骤繁琐,包括取材固定、脱水、树脂包埋、超薄切片和电子染色。13.【答案】ABCD【解析】细胞学样本来源广泛,包括脱落、穿刺、刮片及印片。14.【答案】ACD【解析】脱钙必须彻底,但时间过长会严重破坏组织形态和抗原,需每日更换并检测终点。15.【答案】ABC【解析】FITC(绿)、TRITC/PE(红)是常用荧光素;DAB是显色底物,非荧光素。16.【答案】ABCD【解析】全面的质量控制涵盖仪器、试剂、对照设置及人员素质。17.【答案】ABCD【答案】刀痕(刀钝)、气泡(封片)、皱褶(切片操作)、沉淀(染液或清洗问题)均为常见伪影。18.【答案】AC【解析】网状纤维染色主要依靠银染法,如Gomori或Foot染色,虽然Masson也能显示,但网状纤维特异性染色指银染。19.【答案】ABCD【解析】PCR(扩增)、FISH(荧光原位杂交)、Blotting(印迹)、Sequencing(测序)均为分子病理核心技术。20.【答案】ABD【解析】甲醛有毒致癌,必须在通风橱操作,佩戴防护,废液需按化学废物处理,严禁直接排入下水道。第三部分:判断题1.【答案】√【解析】乙醇能沉淀白蛋白和球蛋白,但不能沉淀核蛋白(核蛋白溶于水),且能很好地保存糖原和脂质。2.【答案】√【解析】这是固定的根本目的:防止自溶、腐败,尽可能保持生前结构。3.【答案】×【解析】直接放入高浓度或无水乙醇会导致组织表面迅速硬化,内部水分无法渗出,形成“硬壳”效应,造成脱水不均和严重收缩。4.【答案】×【解析】二甲苯是透明剂,不溶于水,不能作为脱水剂使用。5.【答案】√【解析】苏木精原液无染色能力,必须氧化成苏木红(Haematein)成为成熟染液,并在媒染剂(如铝盐)作用下才具染色力。6.【答案】√【解析】伊红Y是水溶性的,但为了与脱水步骤兼容及增强染色效果,常配制成乙醇溶液。7.【答案】√【解析】切片刀角度(底角)过大,刀刃对组织压力过大,虽易切下,但易导致切片皱褶、厚度不均,质量差。8.【答案】√【解析】冷冻切片利用低温冷冻支撑组织,直接切片,无需经历石蜡包埋的脱水透明过程。9.【答案】×【解析】并非所有抗原都需要修复,新鲜组织或福尔马林短时间固定的组织,部分抗原无需修复即可检出。10.【答案】√【解析】DAB被证实具有致癌性,操作时需戴手套、口罩,并在通风橱内进行,废液需专门处理。11.【答案】√【解析】物理检测法:针刺无阻力感是判断脱钙终点的重要经验指标。12.【答案】×【解析】电镜超薄切片通常在50-100nm之间,远薄于石蜡切片(3-5μm)。13.【答案】√【解析】ISH应用范围广泛,DNA探针测基因,RNA探针测基因表达。14.【答案】√【解析】细胞蜡块技术是将细胞学样本离心后像组织块一样包埋,可进行切片和IHC,是重要的辅助技术。15.【答案】×【解析】取材记录至关重要,必须详细记录部位、大小、形状、颜色、质地等,是诊断的重要依据。第四部分:填空题1.【答案】100;4;6.5;1000【解析】标准配方:100mL40%甲醛+900mLPBS(含4gNaP和6.5g2.【答案】低;高【解析】梯度脱水原则。3.【答案】平行【解析】切面必须与刀刃平行才能切出完整薄片。4.【答案】蓝;红【解析】H&E标准颜色。5.【答案】辣根过氧化物(HRP);二抗(或抗兔/抗鼠)【解析】EnVision聚合物是将多个二抗分子和酶分子交联在一个大分子骨架上。6.【答案】红;蓝【解析】Ziehl-Neelsen抗酸染色结果。7.【答案】中性树胶;水溶性(如Aqueous)【解析】常规用中性树胶,若需保持水溶状态或某些荧光染色用水溶性封片剂。8.【答案】紫红;糖原【解析】PAS染色原理及主要应用。9.【答案】环氧树脂;50-70【解析】Epon812等环氧树脂是标准包埋剂,超薄切片极薄。10.【答案】巴氏(Papanicolaou);HE(或瑞氏)【解析】妇科涂片多用巴氏,其他涂片多用HE或瑞氏。11.【答案】阵列(或高密度)【解析】TMA的核心特征。12.【答案】TRITC(或TexasRed)【解析】常用红绿荧光搭配。第五部分:名词解释1.【答案】固定:使用化学试剂(固定液)或物理方法,使活体组织细胞的结构和成分(如蛋白质)发生交联或沉淀,从而终止细胞生命活动,防止自溶和腐败,尽可能保持其生前形态结构的过程。2.【答案】脱水:利用脱水剂(如乙醇)置换出组织内的水分,为后续透明剂(不溶于水)的进入创造条件,是组织制片的重要步骤。3.【答案】透明:组织经脱水后,用能与脱水剂和包埋剂(如石蜡)均互溶的试剂(如二甲苯)处理,使组织折光率接近玻片,呈现透明状的过程。4.【答案】媒染剂:在染色过程中,某些物质本身无染色能力,但能促进染料与组织结合,增加染色强度和稳定性的试剂,如明矾(钾明矾)是苏木精的媒染剂。5.【答案】分化:利用分化剂(如酸乙醇)将组织过度吸附的染料选择性洗脱的过程,使着色深浅适中,结构对比清晰。6.【答案】蓝化:苏木精经酸性分化后呈红色,利用碱性溶液(如氨水或自来水)使其恢复蓝色的过程,称为蓝化。7.【答案】抗原修复:通过加热(热修复)或酶消化(酶修复)等方法,逆转福尔马林固定导致的蛋白质交联,暴露被遮蔽的抗原表位,以提高免疫组化检测灵敏度的技术。8.【答案】原位杂交:用带有标记的核酸探针,在组织细胞原位与待测的特异性核酸序列(DNA或RNA)进行杂交,通过显色或荧光检测该核酸序列存在与否及其分布的技术。9.【答案】细胞蜡块:将细胞学检查样本(如胸腹水、穿刺液)经过离心沉淀,用琼脂或凝血酶等将其包裹成团块,然后按常规组织处理程序脱水、包埋形成的蜡块,便于切片和免疫组化检测。10.【答案】脱钙:通过化学试剂(脱钙液)或物理方法(电解),去除骨组织或钙化病灶中的钙盐,使组织变软,便于后续切片和染色处理的过程。第六部分:简答题1.【答案】原理:苏木精为碱性染料,使细胞核内的酸性物质(染色质)着蓝色(嗜碱性);伊红为酸性染料,使细胞质和细胞外基质中的碱性物质(蛋白质)着红色(嗜酸性)。步骤:(1)脱蜡至水:二甲苯脱蜡,梯度乙醇下行至水。(2)染核:入苏木精染液数分钟。(3)水洗:流水冲洗。(4)分化:1%盐酸乙醇分化数秒。(5)水洗:流水冲洗。(6)蓝化:返蓝液或自来水蓝化。(7)染质:入伊红染液数秒至数分钟。(8)脱水透明:梯度乙醇上行,二甲苯透明。(9)封固:中性树胶封固。2.【答案】原理:福尔马林固定会导致蛋白质发生醛基交联,遮蔽抗原决定簇。抗原修复通过断裂这些交联键或水解部分蛋白质,重新暴露抗原。常用方法:(1)热诱导修复(HIER):利用高温(微波、高压锅、水浴、蒸汽锅)在缓冲液(如柠檬酸盐pH6.0或Tris-EDTApH9.0)中加热组织切片10-20分钟。(2)蛋白酶诱导修复(PIER):利用蛋白酶(如胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K)消化部分蛋白质,暴露抗原,通常用于细胞间质抗原。3.【答案】区别:(1)制片速度:冷冻切片快(15-30分钟),石蜡切片慢(24-48小时)。(2)组织处理:冷冻切片无需脱水透明,冷冻后直接切;石蜡切片需经过固定、脱水、透明、包埋。(3)厚度:冷冻切片较厚(5-10μm),石蜡切片较薄(3-5μm)。(4)结构清晰度:石蜡切片结构清晰,细胞层次分明;冷冻切片细胞稍大,可能有冰晶伪影。优缺点:冷冻切片优点:快,能保存脂质和酶活性;缺点:结构不如石蜡精细,价格贵。石蜡切片优点:形态完美,可长期保存,成本低;缺点:慢,无法保存脂质,部分抗原丢失。4.【答案】原因:(1)组织脱水不彻底,导致透明和包埋不均。(2)切片刀有缺口或刀刃锋利度不均。(3)染色时切片干燥,导致局部着色深。(4)封固剂未充满或分布不均。解决方法:(1)重新处理组织,严格梯度脱水,延长低浓度乙醇时间。(2)研磨切片刀或更换新刀片。(3)染色全过程保持切片湿润,切勿干片。(4)封片时滴加足量封固剂,轻轻盖下盖玻片。5.【答案】主要成分:通常由苏木精(染核)、丽春红/酸性品红(染肌纤维、红细胞)和苯胺蓝(染胶原纤维)组成。应用:(1)区分肿瘤组织中的胶原纤维与肌纤维,辅助诊断间叶组织肿瘤。(2)显示组织中的纤维化程度,如肝纤维化、肾小球硬化。(3)观察血管壁的结构,区分平滑肌层与胶原层。(4)辅助诊断心肌梗死(区分纤维化瘢痕与心肌肌纤维)。6.【答案】(1
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