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ICS65.020CCSB16DB43DB43/T1964—2020苎麻根腐线虫病综合防控技术规程RegulationforIntegratedPreventionandControlTechnologyofRamierootrotnematodedisease2020-12-29发布2021-03-29实施湖南省市场监督管理局发布I Ⅲ 1 1 1 1 2 2 2 3 3 4 6本文件主要起草人：朱春晖、张德咏、刘勇、成飞雪、程菊娥、解啸、孙书娥、王东1苎麻根腐线虫病综合防控技术规程GB/T17980.38农药田间药效试验准则（一）杀NY/T1321—2007农作物种质资源鉴定技术规程-苎麻苎麻根腐线虫病RamieRootRotNema为害苎麻地下根茎的一种线虫病，由咖啡短体线虫引起，属于动物界（Animalia）、线虫门综合防控IntegratedPreventio防治、物理防治和科学用药等资源节约型、环境友好型技术来控制农作物病虫害的植物保护措施。26.1.1应选择抗性强的品种，如独山圆麻、牛耳青、华苎4号、中苎1号、湘苎2号和川苎系列8号、11号、16号等。6.1.2采用无病土育苗或基质育苗，并进行苗床消毒；选用健康壮苗。6.1.4实行高垄栽培，适时开沟排水，降低地下水位。可利用生物农药或微生物菌肥抑制苎麻根腐线虫病的发生。如用阿维菌素(乳油或颗粒剂)、光合细菌嗜硫小红卵菌(Rhodovulumsulidophilum化学药剂使用应符合GB/T8321NY/T1276和GB/T17980.38的相关规定。根据NY/T1321—2007农作物种质资源鉴定技术规程-苎麻A.2、A.4、A.5的内容进行病原分离、3病情分级和病情指数的计算。9.1建立苎麻根腐线虫病防治档案记录档案，为生产活动追溯提供有效的证据。记录主要包括前茬作4(资料性)土壤中或者根中分离的线虫显微镜下形态图为图A1。线虫形态的大小符合表A1数据，则为咖啡短测量项目测量值范围雌虫(mm)雄虫(mm)a体长/最大体宽c′尾长/肛门处体宽St(μm)口针长度线虫用无菌水清洗3次，放于0.2mLPCR薄壁管中，-20℃冷冻10min,加小量蛋白酶PKase,65℃消化1h,95℃灭活10min,离心上清液作为PCR反应模板。引物：5’-5延伸45sec,28个循环，72℃延伸10min。取扩增产物8μL,加入到1.5%琼脂糖凝胶(100mL1.5%琼脂糖凝胶含有5μLSYGBGreen)的点样孔内。电泳缓冲液1×TAE,120V,电泳30min。电泳结束后，取出琼脂糖凝胶，通过凝胶成像仪观察结果并拍照记录，扩增片段与预期目标条带大小一致，则结果判定为阳性，未扩增出预期大小条带，则结果判定为阴性；若阳性对照未扩增出预期大小片段或空白对照扩增出任何条带，则检测结果失败，需要重新检测。进一步可以通过克隆扩增片段、测序及比较分析，加以确认检测结果。

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