《微生物检验技术培训课程》课件-链球菌属

链球菌属STREPTOCOCCUS概念链球菌属于链球菌科，是化脓性球菌中另一大类常见的革兰阳性球菌，排列成双或长短不一的链状。广泛分布于自然界、人和动物的粪便及健康人的鼻咽部，目前含有69个种及亚种，多数为非致病菌，少数可导致疾病。链球菌属中对人类致病的主要是A群链球菌和肺炎链球菌。肺炎双球菌一、生物学性状（一）分类1.根据细胞壁多糖抗原（C抗原）结构分类图15-2链球菌抗原结构模式图Lancefield分类（A~H、K~V，20个血清群）一、生物学性状（一）分类2.根据对红细胞的溶血能力甲（α）链（草绿色链球菌）：肺炎链球菌。乙（β）链（溶血性链球菌）：A、C、G群及B群无乳链球菌。丙（r）链（非溶血性链球菌）：D群牛链球菌。一、生物学性状（二）形态与染色1.链球菌G+，球形或卵圆形，直径0.8-1.0µm。成双或呈链状排列。无鞭毛、无芽胞。有些菌株在含血清的培养基中，早期（2~4h）可见荚膜。一、生物学性状（二）形态与染色2.肺炎链球菌G+，矛头状。成双排列，宽度相对、尖端相背。无芽胞、无鞭毛，新鲜标本或营养丰富时可形成荚膜。肺炎双球菌一、生物学性状（三）培养特性——生长条件营养需求：较高，普平生长不良。普通培养基中加有葡萄糖、血液或血清的培养基中生长良好。气体需求：致病菌大多为需氧或兼性厌氧菌，在5%CO2环境下生长最好；少数为微需氧或专性厌氧菌，多为口、消化道、泌尿道的正常菌群，特定条件下可至病。温度：最适温度35-37℃；PH：最适7.4～7.6。一、生物学性状（三）培养特性——生长现象血平板上的链球菌菌落：灰白、圆形凸起、表面光滑、边缘整齐、半透明或不透明、直径0.1-0.75mm的细小菌落，不同菌种可出现不同的溶血现象。肺炎链球菌：细小圆形、灰白色扁平菌落，α溶血；培养48h后出现自溶，菌落中心凹陷、边缘隆起、呈脐窝状。液体培养基：链球菌呈沉淀生长；肺链均匀混浊生长。一、生物学性状（四）生化反应触酶阴性葡萄球菌属（+）链球菌属（-）一、生物学性状（四）生化反应PYR试验：化脓性链球菌产生吡咯烷酮酰肽酶，能水解L-吡咯烷酮β-萘酚酰胺产生β-萘酚酰胺。加入N，N-二甲氧基肉桂醛试剂后产生桃红色即为阳性。一、生物学性状（四）生化反应A群链球菌对杆菌肽敏感其他链球菌通常耐受。一、生物学性状（四）生化反应B群链球菌CAMP试验阳性其他溶血性链球菌无此特性一、生物学性状（四）生化反应D群链球菌七叶苷水解试验阳性一、生物学性状（四）生化反应肺炎链球菌：菊糖分解+、对Optochin敏感、胆汁溶菌试验+、荚膜肿胀试验+。可与其他甲型溶血性链球菌相鉴别图3-50肺炎链球菌对Optochin敏感（抑菌圈>15mm）抑菌环一、生物学性状（五）抵抗力抵抗力不强，大多60°C/30min死亡，对常用消毒剂敏感。干燥痰及尘埃中可存活数周至数月。对青霉素、红霉素、四环素等敏感。存在耐药菌株，对青霉素耐药的肺炎链球菌（PRSP）已出现并在全球播散。二、临床意义（一）A群链球菌致病物质：链道酶（SD）红疹毒素链球菌溶血毒素（SLO、SLS）膜磷壁酸M蛋白透明质酸酶链激酶（SK）二、临床意义（二）所致疾病化脓性感染：皮肤及皮下组织感染、其它系统感染。中毒性疾病：猩红热。超敏反应性疾病：风湿热、急性肾小球肾炎。急性化肱性扁桃体炎丹毒二、临床意义——其他链球菌B群链球菌（无乳链球菌）：新生儿败血症、新生儿脑膜炎；泌尿生殖感染和菌血症。甲型溶血性链球菌引起亚急性细菌性心内膜炎。肺炎球菌引起大叶性肺炎。三、微生物学检验（一）标本采集脓液、咽拭子、炎性分泌物、血液、脑脊液、痰液等。采集后2h内运送到实验室，立即进行检查。疑似链球菌所致的超敏反应性疾病应采集血液标本进行抗链球菌溶血毒素0抗体检测。三、微生物学检验（二）检验程序脓、痰、咽拭子等血液、脑脊液染色镜检检测抗原分离培养（BAP，5%CO2）增菌培养(硫酸镁肉汤，5%CO2）可疑菌落（菌落性状、溶血特点、触酶-）初步报告血清学分群β溶血性链球菌非β溶血性链球菌甲型溶血性链球菌群药敏试验A、B、C、D等群相应生化实验报告三、微生物学检验可初步报告“找到革兰阳性球菌，链状排列，疑为链球菌”三、微生物学检验图1：血平板图2：革兰氏染色（10x100）初步报告“找到革兰阳性矛头状球菌，成双排列，疑为肺炎链球菌”三、微生物学检验（二）检验程序脓、痰、咽拭子等血液、脑脊液染色镜检检测抗原分离培养（BAP，5%CO2）增菌培养(硫酸镁肉汤，5%CO2）可疑菌落（菌落性状、溶血特点、触酶-）初步报告血清学分群β溶血性链球菌非β溶血性链球菌甲型溶血性链球菌群药敏试验A、B、C、D等群相应生化实验报告三、微生物学检验表4-4β溶血性链球菌的鉴别要点鉴定项目菌种LancefieldPYR试验VP试验CAMP试验BGUR试验化脓性链球菌A+--NA咽峡炎链球菌群A-+-NA无乳链球菌B-NA+NA停乳链球菌马样亚种C---+咽峡炎链球菌群C-+--咽峡炎链球菌群F-+-NA停乳链球菌马样亚种G---+咽峡炎链球菌群G-+--咽峡炎链球菌群未分群-+-NA三、微生物学检验表4-5非β溶血性链球菌的鉴别要点菌名鉴定项目肺炎链球菌草绿色链球菌D群链球菌ɑ溶血+++/-Optochin敏感试验+--胆汁溶菌试验+--胆汁七叶苷水解试验--+三、微生物学检验表4-7肺炎链球菌与其他α溶血性链球菌的鉴别要点鉴定项目菌名形态菌落血清肉汤中盐水中胆汁溶菌试验菊糖发酵试验Optochin敏感试验小白鼠毒力试验肺炎链球菌矛头状

成双有荚膜稍大湿润扁平脐窝状均匀混浊分散++++α溶血性链球菌圆形成链