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2016-01-20实施2016-01-20实施I 1 13术语和定义 1 2 3 3附录A(资料性附录)苹果树腐烂病菌鉴定方法 5附录B(资料性附录)/苹果树腐烂病鉴定结果记载表 7潜育期234.1.7接种体扩繁5.3.1烫伤口选取采集好的苹果枝条，用自来水冲洗2次，75%酒精冲洗1次，无菌水冲洗1次。将冲洗好的枝条放置于消毒的托盘中，用直径5mm的钉帽在枝条上烫伤口，伤口相距/10cm。每个枝条烫5个伤口，4个接菌，1个做对照。35%～40%,每天浇水保持沙子湿润。4病斑大小0135795.0cm<病斑长度接种后每天观测病害发生情况，记录潜育期时间，在接种后第7d测量病斑长度、宽度。病斑大小测量方法为：在接种点处向上向下测量病斑的扩展长度，即为病斑烂病抗病性类型划分，明确鉴定品种抗病类型，见表2。抗性评价病情指数I免疫Immune(I)0Ⅱ高抗Highlyresistant(HR)抗病Resistant(R)10<病情指数≤20中感ModeratelySusceptible(MS)V感病Susceptible(S)高感HighlySusceptible(HS)5(资料性附录)苹果树腐烂病菌鉴定方法A.1.2.1菌落特征多腔型。分生孢子：胞，无色，镰刀形或线形两端尖锐。A.2分子生物学鉴定预变性；94℃变性60s,退火58℃60s,72℃90s,35个循环；72℃10min。EF1-α的扩增条件为95℃3min预变性；95℃变性30s,退火55℃30s,72℃60s,35个循环；72℃10min。目标基因引物名称引物序列5'-ACCCTCAGTGTAGTGACCC

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