DB14T 1177-2016 大田转基因棉花外源序列PCR 检测规程_第1页
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文档简介

2016-05-30实施2016-05-30实施 1 1 1 25样品DNA提取 26PCR检测基因 47PCR反应程序及电泳检测 4 5 5附录A(规范性附录检测引物 6附录B(资料性附录2转基因棉花检测鉴定结果 7工1凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。转基因棉花2内标基因Sadl4.1.2PCR扩增常规试剂3基乙醇,充分混匀,用纯净水定容至1000mL,在103.4kPa.121℃条件下,灭菌15min,5.3.1取样45.3.5溶解6.1内标基因Sad1检测6.4调控元件的检测5反应程序为:94℃预变性4min,94℃变性40s,55℃退火40s,72℃延伸45s;循环5次;94℃变性40s,60℃退火40s,72℃延伸45s,循环25次;最后72℃延伸10min,12℃保存。每个样品PCR反应设应详细记录植株名称、由间检测DNA检测、凝胶电泳等检测结果,并建立档案。检测记录格式6序列扩增片段大小基因Sadl正向引物Sad-F1基因Bt基因正向引物Bt-F1反向引物Bt-R135S启动子正向引物35S-F1反向引物35S-R135S启动子启动子5’-TTATGGAACGTCAGTGGAGC-3’终止子35S终止子78(资料性附录)转基因棉花检测鉴定结果样品编号送样日期DNA检测□CrylAc基因或CrylAb基因□CaMV35

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