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实验动物中国地鼠微卫星DNA检测方法2020-02-01实施2020-02-01实施 I1范围 12术语和定义 1 1 2工1实验动物中国地鼠微卫星DNA检测方法指经人工饲育，对其携带的微生物和寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚，用于科学研究、教学、生产和检定以及其它科学实验的中国地鼠(Gricetulusgriseus)。2.42群体数量(只)抽样数量(只)大于1004.1采样位点引物序列退火温度(℃)片段大小479553R:GTTCTTAATGGATCTAC5R:GTTCTTTCCCACTCACAA6R:GTTCTTTCTGGGGGATG4R:GTTCTTGTCACCCCATG5R:GTTCTTTCCCAACACCC4R:GTTCTTCCCCACAGTCAG7R:GTTCTTTGTTTGATCACR:GTTCTTGAGGTAGGCAG6R:GTTCTTCTACCCCTCTC5R:GTTCTTGTCCTGAGCAA7R:GTTCTTAGGCCAAGCTC4.3PCR扩增PCR扩增程序：94℃预变性5min;94℃变性30s,退火(退火温度见表2)30s,72℃延伸45s,35个循环；72℃延伸20min。扩增产物4℃保存。4扫描结果出现两种波形：一种为纯合基因型，只有一个主波扩增片断大小。每个位点的等位基因根据扩增片断从小到大顺序排列纪录为a,b,c,d等。将所有样本的每个微卫星位点的基因型以ab,bb等形式输入群体遗传分析软件的数据文件，计算样品在各微卫星位点上的基因频率、平均
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