2026年生物制药测试题库及答案

2026年生物制药测试题库及答案1.单选题（每题1分，共20分）1.1下列哪一项不是CHO细胞作为重组蛋白表达宿主的优势A.人源化糖基化修饰能力B.可在无血清悬浮培养中快速增殖C.对巴氏消毒敏感，易于灭活外源病毒D.已获批用于多种上市单抗生产答案：C1.2在亲和层析中，ProteinA填料对IgG的捕获主要依赖A.静电作用B.疏水作用C.特异性Fc段结合D.金属螯合作用答案：C1.3用于测定单抗电荷异质性的常规技术是A.反相HPLCB.毛细管等电聚焦C.动态光散射D.浊度法答案：B1.4下列哪项最可能导致生物反应器补料分批培养中乳酸陡升A.溶解氧>60%airsat.B.葡萄糖浓度>8mmol/LC.谷氨酰胺浓度<0.5mmol/LD.pH设定值7.0答案：B1.5对E.coli包涵体复性时，最优先添加的辅助因子是A.还原型谷胱甘肽B.氯化钠C.甘油D.EDTA答案：A1.6关于CRISPR-Cas9敲除GS（谷氨酰胺合成酶）基因，下列说法正确的是A.需同时转染Cas9mRNA与双sgRNAB.敲除后细胞可在无谷氨酰胺培养基生长C.仅适用于贴壁细胞D.不可用于CHO细胞答案：A1.7病毒清除验证中，哪种模型病毒属于非脂包膜小型RNA病毒A.MuLVB.Reo-3C.SV40D.PRV答案：B1.8依据ICHQ5E，变更后单抗可比性评估中最重要的质量属性是A.颜色B.渗透压C.糖基化谱D.装量答案：C1.9在DoE（实验设计）中，用于筛选大量因子的经典设计是A.中心复合设计B.Box-Behnken设计C.Plackett-Burman设计D.拉丁方设计答案：C1.10用于实时监测生物反应器内活细胞密度的在线探头基于A.近红外光谱B.电容法C.拉曼光谱D.超声衰减答案：B1.11下列哪项不是单抗诱导的免疫原性风险因素A.非人源CDR序列B.高甘露糖糖型C.聚集体>10%D.皮下给药途径答案：D1.12对ADC药物，决定其临床最大耐受剂量的主要毒性通常是A.中性粒细胞减少B.肝酶升高C.外周神经病变D.皮疹答案：A1.13用于测定ADC药物DAR（药物抗体比）的疏水相互作用层析缩写是A.SECB.IEXC.HICD.RP答案：C1.14下列哪种脂质辅料最常用于mRNA-LNP的阳离子脂质A.DSPCB.PEG2000-DMGC.DLin-MC3-DMAD.胆固醇答案：C1.15关于生物类似药“指纹图谱”比对，下列说法正确的是A.仅需比较一级序列B.必须覆盖高级结构与翻译后修饰C.可忽略糖基化D.仅需体外药效答案：B1.16用于测定蛋白Tm（熔解温度）的高通量技术首选A.差示扫描量热法（DSC）B.动态光散射（DLS）C.圆二色谱（CD）D.荧光染料法（DSF）答案：D1.17在病毒样颗粒（VLP）疫苗生产中，下列宿主系统不能正确组装HBsAgVLP的是A.酿酒酵母B.汉逊酵母C.昆虫杆状病毒D.大肠杆菌胞质表达答案：D1.18关于连续制造中周期性放行模式（PAT），下列说法错误的是A.需实时放行检测B.可用多变量统计过程控制（MSPC）C.无需工艺验证D.需定义控制策略答案：C1.19下列哪项属于强制降解试验中最常用的氧化条件A.0.1%H2O225°C2hB.0.01NHCl60°C2hC.0.01NNaOH60°C2hD.紫外310nm24h答案：A1.20对单抗进行亚可见颗粒（2–10µm）计数，药典推荐的方法是A.光阻法B.显微计数法C.流式成像法D.电感法答案：A2.多选题（每题2分，共20分；每题至少两个正确答案，多选少选均不得分）2.1下列哪些属于典型的下游病毒清除步骤A.低pH孵育B.阴离子交换层析C.纳滤20nmD.亲和层析答案：A、B、C2.2关于高浓度蛋白制剂（>100mg/mL），正确的有A.黏度随浓度指数上升B.易形成可见异物C.需关注皮下给药体积限制D.无需考虑渗透压答案：A、B、C2.3下列哪些检测可用于评估ADC的体内稳定性A.小鼠血浆PKB.质谱分析游离毒素C.体外血浆孵育+SECD.细胞毒性IC50答案：A、B、C2.4关于mRNA疫苗加帽，下列说法正确的是A.Cap1结构可降低先天免疫激活B.酶法加帽效率>化学法C.需使用牛痘病毒加帽酶D.Cap0足以满足临床需求答案：A、C2.5下列哪些属于ICHQ6B规定的生物技术产品特性检验项目A.氨基酸序列B.糖基化位点占用C.宿主细胞蛋白残留D.内毒素答案：A、B、C、D2.6关于连续灌流培养，正确的有A.需细胞截留装置B.可达>50×10^6cells/mLC.产物质量均一性优于补料分批D.无需在线细胞去除答案：A、B、C2.7下列哪些辅料可提高蛋白冻干稳定性A.海藻糖B.聚山梨酯80C.甘露醇D.甘氨酸答案：A、C、D2.8用于测定宿主DNA残留的qPCR方法需验证的参数包括A.特异性B.检测限C.耐用性D.线性与范围答案：A、B、C、D2.9下列哪些属于“质量源于设计”（QbD）的核心工具A.风险评估（FMEA）B.设计空间C.控制策略D.事后验证答案：A、B、C2.10关于双特异性抗体（BsAb）结构，正确的有A.CrossMab技术可防止轻链错配B.knobs-into-holes促进重链异源二聚C.均需使用共同轻链D.可通过电荷配对减少聚集体答案：A、B、D3.填空题（每空1分，共20分）3.1中国药典2025版规定，重组单抗制剂中宿主蛋白残留限度为________ng/mg。答案：103.2依据ICHQ1A(R2)，加速稳定性试验条件为________°C±2°C/________%RH±5%RH。答案：40；753.3用于测定蛋白二级结构的最常用红外光谱区段为________cm⁻¹。答案：1600–17003.4在DoE方差分析中，用于衡量因子显著性的统计量为________。答案：F值3.5病毒清除研究中，LRV（LogReductionValue）≥________被视为有效步骤。答案：43.6用于mRNA原液纯度测定的AgilentFragmentAnalyzer主要检测________指标。答案：mRNA完整度（%）3.7单抗的FcRn结合位点位于________结构域。答案：CH2-CH33.8在补料分批培养中，谷氨酰胺浓度通常控制在________mmol/L以内以减少氨积累。答案：23.9用于测定ADC细胞毒性的常用报告细胞系为________。答案：SK-BR-33.10中国NMPA2025版指南要求，生物类似药药学比对研究至少包括________批原研与________批类似药。答案：10；103.11依据USP<787>，治疗性蛋白注射液中不溶性微粒≥10µm限度为________粒/容器。答案：60003.12用于蛋白N端测序的Edman降解试剂为________。答案：PITC（苯异硫氰酸酯）3.13在超滤浓缩中，衡量膜污染程度的指标为________。答案：通量衰减率3.14用于测定脂质体粒径的PCS技术中文全称为________。答案：光子相关光谱法3.15单抗的pI值通常分布在________区间。答案：6–93.16用于CHO细胞基因组拷贝数定量的内参基因常用________。答案：β-actin3.17病毒灭活试验中，0.1%TritonX-100处理________分钟可破坏脂包膜病毒。答案：603.18用于测定蛋白自由巯基的试剂为________。答案：Ellman试剂（DTNB）3.19在冻干曲线中，一次干燥终点通常以________探头判断。答案：皮拉尼真空规3.20依据ICHQ3D，注射剂中元素杂质镉限度为________ppm。答案：0.24.简答题（封闭型，每题5分，共20分）4.1简述CHO细胞二氢叶酸还原酶（DHFR）扩增系统原理。答案：CHO细胞经甲氨蝶呤（MTX）抑制DHFR活性，导致核苷酸合成受阻；高浓度MTX压力下，细胞通过共扩增DHFR及目的基因所在质粒区域，使目的基因拷贝数增加，从而提高表达量。4.2写出低pH病毒灭活常用参数，并指出关键控制要点。答案：pH3.6±0.1，温度15–25°C，时间30–60min；关键控制：pH在线监测、混合时间≤5min、灭活后即时中和、避免蛋白聚集。4.3列举三种测定蛋白聚集体的技术并给出分辨率范围。答案：SEC-HPLC（2–100nm）、AUC-SV（1–1000nm）、MALS（1–500nm）。4.4说明mRNA加帽率测定的LC-MS流程。答案：mRNA经RNaseT1酶切→获得5’端寡核苷酸→C18柱脱盐→UPLC分离→ESI-TOFMS检测Cap1与Cap0峰面积→计算Cap1/(Cap1+Cap0)×100%。5.简答题（开放型，每题10分，共20分）5.1结合案例，讨论高甘露糖糖型对单抗临床PK/PD的潜在影响及调控策略。答案：高甘露糖（Man5–Man9）通过增加FcRn非依赖的肝ASGPR清除，缩短半衰期；案例：某抗HER2单抗Man9>20%时，CL升高1.8倍，AUC下降45%。调控：培养温度32°C、添加Mn²⁺、过表达GnT-III、使用α-甘露糖苷酶抑制剂kifunensine反向调控、DoE优化Mn/Cu比。5.2阐述连续灌流培养中“稳态”判定指标及PAT整合方案。答案：指标：活细胞密度CV<5%、乳酸<5mmol/L、氨<2mmol/L、产物质量糖型CV<3%、每日单位体积产率波动<10%。PAT：拉曼光谱实时测葡萄糖/乳酸/氨、电容探头测VCD、在线HIC测电荷异构、软传感器基于MVDA预测糖基化，通过MPC（模型预测控制）自动调节灌流速率和补料组分。6.计算题（每题10分，共20分）6.1某单抗下游纯化含ProteinA、低pH、阴离子交换、20nm纳滤四步，已知各步LRV分别为1.5、4.0、2.0、5.0，求总LRV；若起始病毒载量10⁸particles/mL，最终蛋白浓度100mg/mL，求每毫克蛋白病毒颗粒数。答案：总LRV=1.5+4.0+2.0+5.0=12.5；剩余病毒=10⁸×10⁻¹²·⁵=10⁻⁴·⁵=3.16×10⁻⁵particles/mL；每毫克病毒数=3.16×10⁻⁵/100=3.16×10⁻⁷particles/mg。6.2某50kDa蛋白在超滤膜通量J=30Lm⁻²h⁻¹，浓缩倍数10×，初始体积100L，膜面积1m²，求浓缩时间；若通量随浓度指数衰减模型J=J₀exp(−0.1C)，C单位mg/mL，最终蛋白浓度100mg/mL，求平均通量并修正时间。答案：初始通量30Lm⁻²h⁻¹；无衰减时间t=90L/30Lm⁻²h⁻¹=3h；平均浓度C̄=(10+100)/2=55mg/mL；平均通量J̄=30exp(−0.1×55)=30×e⁻⁵·⁵=30×0.00409=0.123Lm⁻²h⁻¹；修正时间t=90/0.123=732h（提示：需改用分段计算或透析过滤，此处仅示范模型）。7.综合应用题（每题20分，共40分）7.1某生物类似药与原研HER2单抗进行头对头III期临床前可比性研究。药学部分发现：类似药高甘露糖Man512%，原研8%；电荷异构体主峰65%vs70%；FcγRIIIa结合活性90%vs100%；ADCC体外活性85%vs100%。请制定后续风险评估、补充研究及监管沟通策略。答案：风险：高甘露糖可能缩短半衰期→需开展食蟹猴PK（单剂量3mg/kg，测AUC、CL、t₁/₂，90%CI80–125%）；电荷差异→需扩大批次至20批，统计等价性检验（±3σ）；FcγRIIIa↓→需ADCC体内小鼠模型验证，若仍<90%则调整上游Mn²⁺/Cu²⁺比；提交FDATypeC会议，提交可比性桥接计划，承诺临床PK/PD桥接研究；若PK不等价，考虑开展验证性临床。7.2设计一款靶向CD19-CD3的双特异性抗体（BsAb），要求：1）防止轻链错配；2）半衰期与IgG相当；3）可放大生产；4）低免疫原性。请给出结构示意图、序列设计要点、下游纯化路线、关键质量属性及控制策略。答案：结构：采用CrossMab-CH1-CL交叉+knobs-into-holesFc