T-FJAASS 022-2025 野生稻优异基因资源挖掘利用技术规程

ICS65.020.01CCSB05T/JAASS174—2025野生稻优异基因资源挖掘利用技术规程Technicalregulationsfortheminingandutilizationofsuperiorgeneresourcesinwildrice(OryzarufipogoIT/FJAASS022-2025 T/JAASS174-2025T/AHAASS021-2025 2规范性引用文件 3术语和定义 3.1野生稻wildrice 3.2优异基因superiorgene 3.3分子标记molecularmarker 3.4分子标记辅助育种技术molecularmarker-assistedbreedingtechniques 23.5轮回亲本recurrentparent 3.6近等基因系near-isogenicline 3.7生物育种biologicalbreeding 24性状鉴定 4.1样本采集 4.2鉴定数据 4.3鉴定指标 4.4鉴定方法 5基因挖掘与利用 5.1亲本选择 5.2标记选择 5.3回交选择 5.4近等基因系构建 5.5性状鉴定 5.6基因挖掘 5.7标记开发 5.8生物育种利用 附录A近等基因系构建技术流程 附录B图位克隆技术流程 T/FJAASS022-2025 T/JAASS174-2025T/AHAASS021-2025本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由福建省农业科学院水稻研究所提出。本文件由福建省农学会、江苏省农学会、安徽省农学会归口。本文件起草单位：福建省农业科学院水稻研究所、福建农林大学、重庆三峡农业科学院。本文件主要起草人：杨德卫、何旎清、程朝平、林少俊、李生平、黄成志、刘军化。1T/FJAASS022-2025 T/JAASS174-2025T/AHAASS021-2025野生稻优异基因资源挖掘利用技术规程本标准规定了野生稻（Oryzarufipogon）优异基因资源挖掘与利用的术语和定义、技术要求与方法。本标准适用于野生稻（Oryzarufipogon）优异基因资源挖掘与利用。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T19557.7植物品种特异性（可区别性）、一致性和稳定性测试指南水稻NY/T83米质测定方法NY/T1433水稻品种鉴定技术规程SSR分子标记法NY/T2175农作物优异种质资源评价规范野生稻NY/T2646水稻品种试验稻瘟病抗性鉴定与评价技术规程NY/T2720水稻抗纹枯病鉴定技术规范NY/T2955水稻品种试验水稻黑条矮缩病抗性鉴定与评价技术规程NY/T3625稻曲病抗性鉴定技术规程NY/T3692水稻耐盐性鉴定技术规程NY/T4454水稻耐冷性鉴定技术规程NY/T4456水稻二化螟抗性鉴定技术规程DB36/T952水稻对褐飞虱抗性鉴定技术规程DB34/T2810水稻白叶枯病抗病性鉴定技术规程DB34/T3098水稻细菌性条斑病抗病性鉴定技术规程DB34/T3134水稻抗旱性鉴定方法3术语和定义2T/FJAASS022-2025 T/JAASS174-2025T/AHAASS021-2025NY/T2175中界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1野生稻wildrice生长在自然环境下的稻属植物，与栽培稻相比，其形态特征和生物学特性较为原始，具有较高的遗传多样性和进化潜力。3.2优异基因superiorgene对水稻的某些性状产生有利影响的基因，如产量、米质、抽穗期、抗病、抗虫、耐冷和耐盐碱等相关基因。3.3分子标记molecularmarker以个体间遗传物质内核苷酸序列变异为基础的遗传标记，是DNA水平遗传多态性的直接反映。3.4分子标记辅助育种技术molecularmarker-assistedbreedingtechniques利用分子标记与决定目标性状基因紧密连锁的特点，通过检测分子标记，即可检测到目的基因的存在，达到选择目标性状的目的，具有快速、准确、不受环境条件干扰的优点。3.5轮回亲本recurrentparent在回交时选择的亲本，一般选择当前生产应用范围较广，但仍存在单一不良性状的亲本。3.6近等基因系near-isogeniclines除了某个单一片段外，其他遗传背景均与轮回亲本相同的，通常是经过杂交和回交方法，形成的除了目标性状有差异，其他遗传背景完全相同的遗传材料（品系）。3.7生物育种biologicalbreeding利用遗传学、细胞生物学、现代生物工程技术等方法原理培育植物新品种的过程。4性状鉴定4.1样本采集按照NY/T2175-2012的规定执行。4.2鉴定数据3T/FJAASS022-2025 T/JAASS174-2025T/AHAASS021-2025每份水稻种质资源（包括野生稻、地方品种等）均为稳定纯合株系，且每个性状应在同一地点有连续3年以上重复鉴定结果，鉴定结果的有效数据按NY/T2175的规定执行。4.3鉴定指标按照NY/T2175的规定执行。4.4鉴定方法4.4.1产量、生育期及稻米品质指标按照GB/T19557.7和NY/T83的规定执行。4.4.2抗病性4.4.2.1稻瘟病抗性按照NY/T2646的规定执行。4.4.2.2白叶枯病抗性按照DB34/T2810的规定执行。4.4.2.3稻曲病抗性按照NY/T3625的规定执行。4.4.2.4黑条矮缩病抗性按照NY/T2955-的规定执行。4.4.2.5纹枯病抗性按照NY/T2720的规定执行。4.4.2.6细菌性条斑病抗性按照DB34/T3098的规定执行。4.4.3抗虫性4.4.3.1褐飞虱抗性按照DB36/T952的规定执行。4.4.3.2二化螟抗性按照NY/T4456的规定执行。4.4.4抗逆性4.4.4.1耐盐性按照NY/T3692的规定执行。4T/FJAASS022-2025 T/JAASS174-2025T/AHAASS021-20254.4.4.2耐冷性按照NY/T4454的规定执行。4.4.4.3抗旱性按照DB34/T3134的规定执行。5基因挖掘与利用5.1亲本选择以具有某一或某些优良性状（产量、米质、抽穗期、抗病、抗虫、耐冷和耐盐碱等）的野生稻材料为供体亲本，以综合性状优良但供体亲本相应优良性状不足的材料为受体亲本。受体亲本应优先选定目前推广面积较大或是具有较大推广潜力的品种。5.2标记选择用均匀覆盖水稻全基因组分子标记检测供体亲本野生稻与受体亲本之间的多态性，获得尽可能多的多态性分子标记。分子标记可以是SNP标记，SSR标记和InDel标记等。DNA提取、扩增和产物检测按照NY/T1433提供的方法进行。5.3回交选择以优异野生稻资源为供体、以需要改良栽培稻为受体或轮回亲本，通过杂交1代，回交3代，直到BC3F1，回交技术流程可参考附录A。5.4近等基因系构建利用筛选的多态性分子标记对获得BC3F1单株进行检测分析，对含有单个目标基因的单株保留并继续自交，直到性状稳定；对含有两个以上目标基因的单株继续与轮回亲本回交，并跟踪分子标记，直至获得含有单个基因的单株，并连续自交，直到性状稳定，最终获得携带不同优异基因性状的近等基因系。近等基因系构建技术流程可参考附录A。5.5性状鉴定对获得的每个近等基因系进行性状鉴定，主要包括产量、米质、抽穗期、抗病、抗虫、耐冷和耐盐碱等性状进行系统的调查与分析，筛选并获得与受体亲本有差异的近等基因系。性状鉴定方法参照4.4的规定进行。5T/FJAASS022-2025 T/JAASS174-2025T/AHAASS021-20255.6基因挖掘利用获得与受体亲本有差异的近等基因系，通过再次与受体亲本杂交，构建次级分离群体，并在目标基因区域内设计多态性引物（因为每个近等基因系与受体亲本仅仅存在一个目标片段的差异利用图位克隆技术，对目标性状基因进行鉴定与分离，图位克隆技术可参考附录B。5.7标记开发根据鉴定优异等位基因的特异序列，或优异单倍型，开发功能性标记或者与目标基因紧密连锁的分子标记。5.8生物育种利用对获得部分稳定优异的近等基因系材料，对鉴定符合目标要求的材料，可直接作为常规稻进行审定并推广种植，或者作为恢复系配制杂交稻品种，再进行审定推广。以含有目标性状（如产量、抽穗期和抗性等）的近等基因系为供体材料，与生产上需要改良的亲本进行杂交或回交，借助开发的功能性标记或连锁分子标记跟踪检测，并对目标性状进行跟踪鉴定，