（正式版）DB22∕T 1997-2014 《饲料中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星的测定 液相色谱-串联质谱法》

备案号：41843-2014定液相色谱-串联质谱法Determinationofenrofloxacin,ciprofloxacin,norfl2014-04-30实施2014-04-30实施吉林省质量技术监督局发布I本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草。本标准由吉林省质量技术监督局提出并归口。本标准起草单位：吉林省产品质量监督检验院、吉林大学。本标准主要起草人：李媛媛、刘斌、李滢倩、关树文、刘智、任明月、王颖。1饲料中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星的测定液相色谱-串联质谱法本标准规定了饲料中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星的液相色谱-串联质谱测定。本标准适用于饲料中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星的含量测定。本标准方法检出限为10μg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T20195动物饲料试样的制备用乙腈和磷酸盐缓冲溶液提取试样中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星，固相萃取小柱净化，5%氨水甲醇溶液洗脱，供液相色谱-串联质谱检测，外标法定量。4试剂与材料所有试剂，如未注明规格，均指分析纯；除另有说明外，水为GB/T6682规定的一级水。4.1甲醇，色谱纯。4.2乙腈，色谱纯。4.4甲酸，色谱纯。4.5磷酸氢二钠(Na₂HP04.12H₂O)。4.6磷酸二氢钾(KH₂PO₄)。4.8磷酸盐缓冲溶液：称取5.68g磷酸氢二钠(4.5)和1.36g磷酸二氢钾(4.6)置于1000mL烧杯中，加入800mL水溶解，用磷酸(4.3)调至pH=3.0,再用水定容至1000mL。4.9氨水甲醇溶液(5%):取5mL氨水(4.7)与95mL甲醇(4.1)混合。24.10甲酸水溶液(pH=3.0):量取500mL水，用甲酸(4.4)调pH值到3.0。4.11甲醇水溶液(25%):取250mL甲醇(4.1),加水稀释到1000mL。4.12甲醇-甲酸溶液(15+85):量取30mL甲醇(4.1)与170mL甲酸溶液(4.13恩诺沙星(CAS:93106-60-6)、环丙沙星(CAS:93107-08-5)、诺氟沙星(CAS:70物质，纯度大于等于95%。4.14标准贮备液(1.0mg/mL):称取0.1g(精确至0.1mg)标准物质(4.13),至100mL容量瓶，甲醇(4.1)定容。2℃~4℃冷藏保存，可保存6个月。4.16OasisHLB固相萃取小柱或相当者：603a)色谱柱：C8柱1(50mm×2.1mm(i.b)色谱柱温度：30℃;e)流动相比例：乙睛：0.1%甲酸溶液(15:85)。d)干燥器：氮气，流速10L/min,温度325℃;f)监测离子：检测离子见表1;恩诺沙星按照上述条件测定试样和标准工作溶液，如果试样中的质量色谱峰保留 (变化范围在±2.5%之内);试样中目标化合物的两个子离子的相对丰度与浓度相当标准溶液的相对丰4测定结果可由计算机自动计算待测组分的含量，也可按式(1)计算：5(资料性附录)MRM质量色谱谱图图A.1三种被测物混合标准溶液总离子流图(1.0mg/L)x9