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文档简介

第2章

第3节

胚胎工程二

胚胎工程技术及其应用情境导入1982年世界首例试管牛问世

试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。一、体外受精任务1

阅读教材P60,思考并回答以下问题:1.体外受精技术主要包括哪几个步骤?2.卵母细胞的培养目的是什么?3.离心的目的是什么?4.精子与卵细胞如何完成体外受精?5.受精卵如何培养?6.体外受精技术的意义是什么?

体外受精卵巢MⅡ期卵母细胞获能精子精子离心处理新鲜或解冻的精液受精卵培养一、体外受精1.体外受精技术主要包括哪几个步骤?体外受精卵巢MⅡ期卵母细胞获能精子精子离心处理新鲜或解冻的精液受精卵培养主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等步骤一、体外受精2.卵母细胞的培养的目的是什么?体外受精卵巢MⅡ期卵母细胞获能精子精子离心处理新鲜或解冻的精液受精卵培养各种动物排出的卵子成熟程度虽然不同,但都只有培养到MⅡ期,才具备与精子受精的能力一、体外受精3.离心的目的是什么?体外受精卵巢MⅡ期卵母细胞获能精子精子离心处理新鲜或解冻的精液受精卵培养去除精浆,以利于精子获能一、体外受精4.精子与卵细胞如何完成体外受精?体外受精卵巢MⅡ期卵母细胞获能精子精子离心处理新鲜或解冻的精液受精卵培养在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程一、体外受精5.受精卵如何培养?体外受精卵巢MⅡ期卵母细胞获能精子精子离心处理新鲜或解冻的精液受精卵培养早期胚胎培养的基本条件:①营养条件、②无菌、无毒③适宜的温度、pH和渗透压、④适宜的气体环境意义:①是提高动物繁殖能力的有效措施②为胚胎移植提供可用的胚胎注意:通过体外受精获得的受精卵不能直接植入受体子宫,必须通过体外早期胚胎培养

培养到早期胚胎才能进行胚胎移植一、体外受精不同动物胚胎移植时间不同:比较试管动物和克隆动物有性生殖无性生殖体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植核移植技术、早期胚胎培养、胚胎移植来自双亲主要来自核供体二、胚胎移植任务2

阅读教材P61-62,思考并回答以下问题:1.什么是胚胎移植?2.什么是供体和受体?3.简述牛胚胎移植的过程。4.同期发情处理的目的是什么?怎么处理?5.什么是超数排卵?(P62相关信息)6.胚胎移植的生理学基础是什么?(P62思考与讨论)7.胚胎移植技术的意义是什么?1.胚胎移植的概念:

指将通过

得到的胚胎,移植到

的雌性动物体内,使之继续发育为新个体的技术。体外受精及其他方式同种的生理状态相同二、胚胎移植2.胚胎移植的过程①对供、受体母牛进行选择,并用激素进行同期发情处理③配种或人工授精②供体母牛超数排卵④胚胎的收集、检查、培养或保存⑤胚胎移植⑥妊娠检查比较自然受精、人工授精和体外受精项目自然受精人工授精体外受精不同点过程场所相同点雌雄动物交配完成雌性动物输卵管中用人工的方法将公畜的精液注入母畜生殖道内,完成受精人工获取精子、卵子,在体外培养液中完成受精过程雌性动物输卵管中体外培养液中(1)精子获能、卵子成熟后方能完成受精过程;(2)都是有性生殖二、胚胎移植4.同期发情处理的目的是什么?怎么处理?确保供体和受体的生殖器官处于相同的生理状态,使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致,这是胚胎移植成功与否的关键。(雌激素、孕激素)5.什么是超数排卵?(P62相关信息)超数排卵是指应用外源促性腺激素,诱发卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵子。P62思考•讨论1.将检验合格的胚胎移植到任何一个受体的子宫内,胚胎都能正常发育吗?如果不能,在胚胎移植前应该对受体进行怎样的处理?2.受体会不会对来自供体的胚胎发生免疫排斥反应?3.胚胎移植后,经受体孕育的后代,其遗传特性与供体还是受体保持一致?为什么?4.胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。你认为这样的概括正确吗?为什么?不一定能正常发育。一般情况下检验合格的胚胎需要移植到同种的、生理状态相同的受体子宫内,胚胎才能继续发育。在胚胎移植前要对受体进行同期发情处理,使供体和受体生殖器官的生理变化同步,这样才能为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境。受体对来自供体的胚胎基本上不会发生免疫排斥反应。胚胎移植后,经受体孕育的后代的遗传特性与供体保持一致。因为供体胚胎与受体子宫建立的仅是生理和组织上的联系,其遗传物质在孕育过程中不会发生任何变化。正确。因为胚胎移植的成功率与供体、受体生理环境条件的一致性密切相关。只有供体、受体生理环境条件高度一致,移人受体的胚胎才能被接受,并继续发育。所以,我们可以把胚胎移植简单概括为早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。胚胎移植的生理学基础4.意义:①充分发挥雌性优良个体的

。②大大缩短了

本身的繁殖周期。③对供体施行

处理后,增加供体一生繁殖后代的数量。供体:提供胚胎的个体产生具有优良遗传特性的胚胎职能:受体:接受胚胎的个体承担繁重而漫长的妊娠和育仔任务职能:

胚胎移植是胚胎工程的最终技术环节,还将推动胚胎工程其他技术的研究和应用。繁殖潜力供体超数排卵二、胚胎移植三、胚胎分割任务3

阅读教材P62-63,思考并回答以下问题:1.什么是胚胎分割?2.胚胎分割有什么特点?3.胚胎分割的理论基础是什么?4.胚胎分割用到的主要仪器有哪些?5.怎么操作胚胎分割?6.胚胎分割技术有哪些缺陷?(P63资料卡)7.胚胎分割技术的意义是什么?三、胚胎分割1.概念:采用

方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等,经移植获得

的技术。机械同卵双胎或多胎三、胚胎分割2.特点:

生物的无性繁殖方式统称为克隆。就胚胎分割技术本身而言,是将同一胚胎分割成几部分,借助胚胎移植技术产生遗传物质完全相同的后代,是一种无性繁殖的方式,因此,也属于动物克隆的一种方法。后代具有相同的遗传物质,因此胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。三、胚胎分割三、胚胎分割3.理论基础:

动物胚胎细胞的全能性。所以胚胎分割的时期为桑椹胚或囊胚。三、胚胎分割为什么不用桑椹胚之前和囊胚之后的细胞组织进行胚胎分割?

因为胚胎分割是采用机械分割的方式,会对细胞造成损伤,所以要求细胞团有足够的能力去修复其损伤,还要保持细胞的全能性。桑椹胚之前的细胞团细胞数量少,不足以修复胚胎分割所造成的创伤;囊胚期以后细胞开始出现程度比较高的分化,全能性降低。?三、胚胎分割4.使用的主要仪器:

体显视微镜显微操作仪

三、胚胎分割5.操作程序:结合视频简述胚胎分割的操作程序三、胚胎分割5.操作程序:(1)选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚,移入盛有操作液的培养皿中。(2)用分割针或分割刀分割,分割后的胚胎可以直接移植给受体,或经体外培养,再移植给受体。(3)可用分割针分割滋养层,做DNA分析,鉴定性别。注意:分割囊胚阶段的胚胎时,要将内细胞团均等分割三、胚胎分割问题:为什么要取滋养层细胞进行分析和鉴定?①滋养层细胞发育成胎盘和胎膜,不发育胎儿的组织或器官,不会对胎儿产生影响。②滋养层和内细胞团均来自同一个受精卵的有丝分裂,含有相同的遗传物质。三、胚胎分割6.胚胎分割技术的缺陷:

(1)刚出生的动物体重偏低,毛色和斑纹还存在差异。

(2)采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的。

早期胚胎的体积很小,细胞数目有限。分割的份数越多,每一份的细胞数会越少,作为囊胚期的内细胞团所受的影响会更大。因此,分割的份数越多,技术的难度会越大,移植后的恢复和发育的难度会越大,移植成功率自然会降低。三、胚胎分割7.意义①促进优良动物品种的繁殖②产生的遗传性状相同的后代是进行遗传学研究的宝贵材料;③在胚胎移植前,进行性别鉴定、遗传病筛查等,对于人工控制动物性别、动物繁育健康后代具有重要意义。练习与应用一、概念检测1.体外受精和胚胎移植都是在医学和农业生产上应用较多的胚胎工程技术。判断下列相关表述是否正确。(1)采集来的卵母细胞和精子可以直接用于体外受精。

()(2)经胚胎移植产生的后代,其遗传特性与受体保持一致。

()(3)进行胚胎移植前,要对供体和受体进行免疫检査,以防止发生免疫排斥反应。

()2.杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点,成为受广大消费者喜欢的绵羊品种。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示。(1)

请将图中括号内的内容补充完整。(2)

为了获得数量较多的卵母细胞,可以对雌性杜泊羊进行怎样的处理?(3)在进行体外受精操作之前,还要对获得的卵母细胞和精子进行怎样的处理?体外胚胎培养

胚胎移植。可以对雌性杜泊羊进行超数排卵处理。要对采集到的卵母细胞进行成熟培养,对采集到的精子进行获能处理。×××二、拓展应用北方白犀牛曾经广泛分布于非洲中部等地,但由于猖獗的盗猎和自然栖息地的丧失,它们的数量不断减少。2018年3月,世界上最后一头雄性北方白犀牛去世,该物种仅剩下两头雌性。在此之前,研究人员设法保存了北方白犀牛的精子。请回答下列问题。(1)我们可以使用哪些现代生物技术来人工繁育北方白犀牛?运用这些技术一定能繁育成功吗?请说出你的理由。(2)

如果繁育成功,这样人工繁育的种群与野生种群相比,有什么区别?(3)

如果繁育不成功,这一物种将永远从地球上消失,从中我们能得到怎样的教训?可以使用人工授精、体外受精、胚胎移植、体细胞核移植等技术来人工繁育北方白犀牛。运用这些技术不一定能成功繁育北方白犀牛,因为任何一项技术都不能保证百分之百的成功率,何况现存的北方白犀牛数量极少。这样人工繁育的种群与野生种群相比,遗传多样性会降低,野外生存能力也会下降。多种多样的生物是生态系统的重要成员,是一个个独特的基因库。任何一个物种的灭绝都可能产生多米诺效应,使其他相关物种受到影响,进而威胁到生态系统的平衡与稳定。保护濒危的野生动物,保护生物多样性刻不容缓。复习与提高一、概念检测1.

若下图表示细胞工程操作中的某些过程,请回答下列问题。(1)如果A、B分别是白菜和甘蓝的原生质体,则C细胞再生出细胞壁后需要通过什么技术才能发育成杂种植株“白菜-甘蓝”?若白菜和甘蓝杂交产生了子代,该子代是否可育?为什么?(2)若该图表示抗丙肝病毒的单克隆抗体制备过程中的一环,A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞表示什么?符合要求的C细胞应具有哪些特点?(3)如果A、B分别是取自优良奶牛的卵细胞和精子,在进行体外受精时,一般要把A细胞培养到什么时期?B细胞则要经过什么处理才能与A细胞结合为受精卵?植物组织培养技术白菜和甘蓝杂交产生的子代没有同源染色体,进行减数分裂时联会发生紊乱,不能形成正常的配子,所以该子代一般不可育。B淋巴细胞能大量增殖并能产生抗丙肝病毒的抗体。减数分裂Ⅱ中期(MⅡ期)获能处理。2.2015年10月,我国科学家屠呦呦因发现青蒿素可以有效降低疟疾患者的死亡率而获得了诺贝尔生理学或医学奖。青蒿素类药物的市场需求很大,请你根据所学内容及以下信息,提出一条提高青蒿素类药物产量的研究思路。(1)青蒿素的衍生物双氢青蒿素也是很好的抗疟疾药物,并且它的药物活性比青蒿素的高很多;(2)青蒿素是从黄花蒿中提取的,在黄花蒿产生青蒿素的代谢过程中,某些酶(如FPS酶)起决定性作用;(3)野生黄花蒿在生长过程中,处于花蕾期时体内青蒿素含量最高;(4)研究人员在对黄花蒿进行组织培养时,发现它的愈伤组织中没有青蒿素,但是由愈伤组织再分化形成的芽和苗中均有青蒿素;(5)四倍体黄花蒿体内青蒿素的含量比二倍体髙38%,但四倍体植株比二倍体植株矮小很多。3.在章首页中介绍的体细胞克隆猴的培育过程中,我国科学家经过多年的反复试验,可以在10s之内对卵母细胞进行去核操作,在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞里。有评论者认为:该研究的研究者利用“聪明的化学方法和操作技巧”,攻克了多年来导致体细胞克隆猴失败的障碍。培育克隆猴的流程如下图所示,请结合图回答问题。(1)研究人员在将胎猴的体细胞注入去核的卵母细胞前,用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中,灭活的仙台病毒所起的作用是什么?诱导细胞融合。3.在章首页中介绍的体细胞克隆猴的培育过程中,我国科学家经过多年的反复试验,可以在10s之内对卵母细胞进行去核操作,在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞里。有评论者认为:该研究的研究者利用“聪明的化学方法和操作技巧”,攻克了多年来导致体细胞克隆猴失败的障碍。培育克隆猴的流程如下图所示,请结合图回答问题。(2)为了调节相关基因的表达,提高胚胎的发育率和妊娠率,研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚,同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA处理了它。这两种物质发挥作用的机制是什么?这两种物质都是通过改变组蛋白的表观遗传修饰来调控基因表达。组蛋白去甲基化酶Kdm4l的mRNA可以表达组蛋白去甲基化酶,该酶能降低组蛋白的甲基化水平;组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA可以抑制组蛋白脱乙酰酶的作用,提高组蛋白的乙酰化水平。3.在章首页中介绍的体细胞克隆猴的培育过程中,我国科学家经过多年的反复试验,可以在10s之内对卵母细胞进行去核操作,在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞里。有评论者认为:该研究的研究者利用“聪明的化学方法和操作技巧”,攻克了多年来导致体细胞克隆猴失败的障碍。培育克隆猴的流程如下图所示,请结合图回答问题。(3)评论者所说的培育过程中用到的“聪明的化学方法和操作技巧”,你认为具体体现在什么地方?“聪明的化学方法”是指对重构胚的处理用了TSA以及将组蛋

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