芍药苷-黄芩素醇质体的表征与体外经皮吸收的研究

芍药苷-黄芩素醇质体的表征与体外经皮吸收研究摘要目的：对芍药苷-黄芩素醇质体（PAE-BA醇质体）进行质量评价，并考察其体外透皮特性。方法：以粒径、Zeta电位、包封率和多分散指数PDI为评价指标，利用注入-超声结合法制备芍药苷-黄芩素醇质体；采用透射电子显微镜对PAE-BA醇质体进行表征分析；采用Franz扩散池对其体外透皮性能进行考察。结果：芍药苷-黄芩素醇质体的多分散指数为0.187±0.03平均粒径为130.78±5.60nm，平均电位为-（58.71±1.62）mV。芍药苷平均包封率为54.28±5.18%，黄芩素平均包封率为80.81±0.74%。形态分布较均一，无沉淀无杂质。在TEM视野下呈球形或近球形囊泡，粒径大小较均一。结论：通过质量评价得出芍药苷-黄芩素醇质体形态分布均一，质量良好。将药物制备成醇质体可以促进药物的透皮吸收。关键词：芍药苷;黄芩素;醇质体;形态表征;经皮吸收 正文1引言赤芍系毛茛科植物芍药或川赤芍的干燥根，气微香，味微苦。其功效多样，可清热凉血、养血和营、散瘀止痛、敛阴平肝，以化瘀、除血痹为主要作用，且抗炎、免疫稳定作用显著。其中，向楚兵等研究发现，赤芍的水煎液对二甲苯所致的小鼠耳廓急性炎症有显著抑制作用，杨琪伟等发现赤芍的乙醇提取物对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀有较好的抗炎效果。赤芍主要含单萜苷类（如芍药苷、羟基芍药苷）、没食子酸葡萄糖及黄酮类等化合物。其中，芍药苷（paeoniflorin，Pae）是芍药中最早发现的蒎烷单萜苷，化学式为C23H28O11，具备抗炎、抗氧化、抗高血脂等广泛药理活性。黄芩素亦为赤芍活性成分，化学式C15H10O5，具有抗菌、抗病毒、清除氧自由基、增强免疫、解热、镇痛、抗炎及抗肿瘤等多种作用。当归为伞形科植物当归的干燥根，香气浓郁，味甘、辛、微苦，有补血活血、调经止痛等功效。临床上主要用于治疗风湿痹痛、跌打损伤、经闭痛经、虚寒腹痛等症，现代药理研究表明当归具有抑制炎症反应、促进骨髓造血、调节免疫、扩血管等作用。当归主要含咖啡酸、阿魏酸、当归多糖等化合物。赤芍-当归为最常见的经典药对组合，两者配伍广泛用于痛症、炎症、血液循环障碍等疾病。针对气滞血瘀（经色紫暗、有血块）或血虚夹瘀（经量少、色淡）证型。冠心病心绞痛，改善心肌缺血，减少刺痛感。脑梗死后遗症，促进脑部血液循环，辅助恢复肢体功能。也常用于治疗风湿痹痛关节炎、痛风缓解关节肿痛。课题组前期研究结果表明，赤芍中的芍药苷、黄芩素与当归中的咖啡酸是治疗类风湿关节炎（RheumatoidArthritis，RA）的主要活性成分。然而，研究表明，芍药苷与黄芩素生物利用度欠佳。其中，芍药苷因脂溶性差、渗透性弱，难以穿过生物膜，进而限制了其药效的充分展现。导致二者在治疗RA方面的应用也受到一定阻碍。醇质体是在传统脂质体的基础上改良开发的药物载体，由高浓度乙醇（20%～50%）、磷脂和水组成。它不仅保留了传统脂质体的靶向性好、生物相容性高的优点，还解决了传统脂质体在皮肤角质层中的穿透问题，有利于药物的经皮吸收。高浓度的短链醇可以显著增强药物的透皮吸收能力，并在一定浓度范围内增加膜的流动性和柔性，使之更易变形、穿透皮肤从而增加药物传递至深层皮肤的量及通过血液循环到达全身的药量。因此，醇质体作为经皮给药载体在局部和全身治疗方面具有很好的应用前景。查阅大量文献得知当归中除了阿魏酸、咖啡酸等成分发挥抗氧化、抗炎等作用外，还含有大量的当归油。当归油为浅红棕色油状液体，具特色香气。其主要成分藁本内酯功效显著，既能抗炎、扩张毛细血管以改善血液循环、调节免疫功能，又因属温性中药挥发油，可促进药物经皮吸收，还具备滋养保护皮肤、促进干裂皮肤愈合等作用。课题组前期的实验表明选用5%当归油作为透皮吸收促进剂。中药挥发油作为天然促渗剂，在经皮给药系统中表现出独特的优势。当归挥发油不仅能够破坏角质层的有序结构，增强药物的透皮吸收，还具有抗炎、抗氧化等药理活性，与芍药苷和黄芩素可发挥协同治疗作用。基于“药辅合一”的理念，将当归挥发油作为醇质体的促渗剂，既能提高药物的透皮效率，又能增强其治疗效果。课题组前期优化了芍药苷-黄芩素醇质体的制备工艺，本研究拟在此基础上通过观测醇质体形态，并对其粒径、Zeta电位、多分散指数（PDI）及包封率等质量指标进行全面评价。进一步以离体SD大鼠皮肤为模型，考察醇质体的透皮吸收性能，并考察当归挥发油促渗效果。本论文的开展有助于推动中药活性成分的递送技术发展。通过优化醇质体制备工艺和评价其透皮性能，为中药复方经皮给药系统的开发奠定了理论基础，并为后续产业化应用提供了技术支持。2材料与方法2.1实验仪器与材料表1实验器材仪器型号生产厂家磁力搅拌仪MS-H280-Pro北京大龙兴创实验仪器股份g司高频超声波清洗器XM-5200UHF小美超声仪器有限公司电子天平PR224ZH/E奥豪斯仪器（常州）有限公司纳米粒径电位分析仪zS90英国马尔文仪器有限公司六硼化镧透射电子显微镜JEM-2100Plus日本JEOL公司全自动样品快速研磨仪JXFSTPRP-24L上海净信实业有限公司水浴恒温振荡器SHZ-B上海博迅医疗生物仪器股份有限公司智能透皮试验仪TP-6天津市精拓仪器科技有限公司高效液相色谱仪PrimaidePLUS日立科学仪器（北京）有限公司表2实验试剂及药品试剂名称生产批号生产厂家芍药苷标准品（HPLC＞98%）Yz042523南京源植生物科技有限公司黄芩素标准品（HPLC＞98%）Yz0124236南京源植生物科技有限公司咖啡酸标准品（HPLC＞98%）Yz012423南京源植生物科技有限公司卵磷脂C15635664上海麦克林生化科技有限公司胆固醇C15563100上海麦克林生化科技有限公司无水乙醇2401073204天津市天力化学试剂有限公司维生素CYD20241010天津市永大化学试剂有限公司当归油A905690西安市恒茂化玻实业有限公司2.2实验方法2.2.1芍药苷-黄芩素醇质体包封率的测定2.2.1.1芍药苷-黄芩素醇质体的制备精密12mg芍药苷和6mg黄芩素，采用超声注入法制备20ml醇质体。体系含26%乙醇，2%卵磷脂，胆固醇与卵磷脂比例为1：8.8。将将有机相缓慢注入pH6.8的PBS缓冲液，40℃、700rpm搅拌45分钟后，冰浴超声5秒暂停2秒，重复八次（45KHz，功率：138W）。0.22µm微孔滤膜过滤，得到粒径均匀的醇质体混悬液，置于4ºC冰箱保存。2.2.1.2对照品储备液的制备精密称取芍药苷、黄芩素单体粉末20mg与10mg，置于25mL棕色容量瓶内，以色谱甲醇定容至刻度线，超声助溶至完全。随后精密移取1mL母液至另一25mL棕色容量瓶，再次用色谱甲醇定容，制得芍药苷浓度0.032mg·mL⁻¹、黄芩素浓度0.016mg·mL⁻¹的混合对照品溶液。2.2.1.3芍药苷-黄芩素醇质体中芍药苷、黄芩素含量测定方法的建立1.色谱条件色谱柱：Shim-packGISTC18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）流动相：乙腈（A）和0.1%磷酸水（B）；紫外检测波长：230nm（芍药苷）、275nm（黄芩素）；柱温：30℃；流速：1mL·min-1；进样量：10μＬ。表3色谱柱梯度洗脱条件t/minA(%)B(%)012882020802.线性关系依“2.2.1.2”项所述方法制备芍药苷-黄芩素混合对照品储备液，加入甲醇进行稀释。将芍药苷稀释成8.22、16.44、32.88、82.2、164.4μg·mL⁻¹系列浓度，黄芩素稀释成4.148、8.296、16.592、41.48、82.96μg·mL⁻¹系列浓度，按色谱条件检测，以峰面积（y）为纵坐标、质量浓度（x）为横坐标绘制标准曲线。可得芍药苷标准曲线方程为y=4846543.5555x-3592.1314（r2=0.9998）；黄芩素的标准曲线方程为y=5399.3204x-71077.4876（r2=0.9999）。通过检测结果可知在系列浓度范围内芍药苷、黄芩素具有良好的线性关系。图1芍药苷标准曲线图2黄芩素标准曲线3.方法学3.1精密度实验:精密移取“2.2.1.2”项制备的对照品溶液，连续进样6次，测定已知浓度对照品的峰面积。将其代入“2.2.1.3”项标准曲线，算得黄芩素与芍药苷的浓度及RSD。经检测评估仪器精密度，结果显示芍药苷、黄芩素的RSD值分别为0.024%、0.028%，表明仪器精密度佳。表4精密度序号123456平均值RSD（%）芍药苷浓度（μg·mL-1）33.0932.5833.0432.6232.5432.8832.790.024黄芩素浓度（μg·mL-1）9.359.018.958.758.628.618.880.0283.2重复性实验:精密量取“2.2.1.1”项制备的醇质体1mL六份，以色谱甲醇稀释20倍，按“2.2.1.3”项条件进样，获取色谱图并记录峰面积。将峰面积代入标准曲线，测定芍药苷与黄芩素的浓度。结果显示，芍药苷、黄芩素的RSD值分别为0.25%、0.12%，表明本方法重复性良好。表5芍药苷重复性序号123456平均值RSD（%）芍药苷浓度（μg·mL-1）52.1953.9156.2857.4956.3251.4054.600.25表6黄芩素重复性序号123456平均值RSD（%）黄芩素浓度（μg·mL-1）23.5724.5326.2726.5126.1925.2625.390.123.3稳定性实验:精密量取“2.2.1.1”项所制醇质体1mL六份，用甲醇稀释20倍后室温放置。按“2.2.1.3”项中的色谱条件条件，分别于2h、4h、6h、8h、10h、12h进样10μL，得色谱图并记录峰面积，代入标准曲线计算芍药苷与黄芩素浓度。结果显示，二者RSD分别为0.03%、0.12%，表明样品12h内稳定。表7芍药苷稳定性时间（h）24681012平均值RSD（%）芍药苷浓度（μg·mL-1）56.3155.5158.3457.4055.8855.3356.240.12表8黄芩素稳定性时间（h）24681012平均值RSD（%）黄芩素浓度（μg·mL-1）25.7226.2526.2625.6625.6026.0026.000.033.4加样回收率实验:通过高效液相检测出样品中芍药苷浓度为54.60μg·mL-1，黄芩素浓度为25.39μg·mL-1，精密量取“2.2.1.1”项下制备的醇质体1mL六份，分别置于20mL容量瓶中，分别精密加入芍药苷对照品（51.38μg·mLmL-1）1ml、黄芩素对照品（25.93μg·mL-1）1ml，加入适量色谱甲醇超声破乳后，再用流动相稀释定容至刻度线，即得供试溶液。按“2.2.1.3”项下色谱条件进样，记录峰面积，计算芍药苷、黄芩素浓度，测得芍药苷加样回收率为97.87%，黄芩素加样回收率为86.35%。测定计算芍药苷、黄芩素RSD分别为5.63%、6.48%。表9加样回收编号样品（μg·mL-1）对照品加入量（μg·mL-1）测得量（μg·mL-1）回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）芍药苷54.6049.52147.1888.9299.615.7354.6049.52158.80100.0754.6049.52158.24599.5354.6049.52162.818103.9254.6049.52164.102105.1754.6049.52158.78100.06黄芩素23.3924.9965.6178.3786.356.4823.3924.9966.9681.0123.3924.9968.9584.8823.3924.9969.4985.9323.3924.9973.5593.8523.3924.9973.6794.082.2.1.4醇质体包封率测定取分子截留量为1000Da的透析袋，置于含1mmol·L⁻¹EDTA和2%NaHCO₃的溶液中，煮沸10min。待冷却至室温，用蒸馏水彻底冲洗透析袋里外，接着再用蒸馏水煮沸10min。取出冷却至室温后，将透析袋置于70%乙醇溶液中浸泡保存。包封率指醇质体中包合的芍药苷与黄芩素量在其总投料量中的占比，是评估芍药苷-黄芩素醇质体质量的关键指标。本试验运用透析袋法测定其包封率，具体操作为：取“2.2.1.1”项下制备的芍药苷-黄芩素醇质体混悬液4mL置于透析袋中。将透析袋置于200ml含26%乙醇的PBS溶液中，在恒温振荡仪中振荡（37℃，100rpm）,分别在0.5h,1h,2h,3h,4h,6h,8h,12h吸取外相液，0.22μm微孔滤膜过滤，采用“2.2.1.3”项下的方法进行测定。根据峰面积计算芍药苷、黄芩素含量，测定其不同取样时间的包封率，最终取3h下测得的包封率作为醇质体中芍药苷、黄芩素包封率。包封率计算公式：EE%=DP−EE%是芍药苷-黄芩素醇质体的包封率；DP是醇质体悬浮液中总的芍药苷、黄芩素含量；Ds是醇质体中未被包封的游离芍药苷、黄芩素含量；2.2.2芍药苷-黄芩素醇质体的表征考察2.2.2.1形态观测将铜网放置于干净的滤纸上，吸取“2.2.1.1”项下制备的芍药苷-黄芩素醇质体20µL滴于铜网上，多余液体用滤纸吸干，将铜网放入4ml离心管内室温干燥48后于六硼化镧透射电子显微镜下观察醇质体的形态并拍照。2.2.2.2醇质体粒径、多分散指数、zeta电位的测量取1mL“2.2.1.1”项下制备的芍药苷-黄芩素醇质体，用相应比例醇溶液稀释10倍后，使用zS90纳米粒径电位分析仪测量粒径、多分散指数和电位。（25℃、平衡时间120s/3次）2.2.3体外透皮吸收试验2.2.3.1离体皮肤制备选取SD大鼠，以4%水合氯醛按10mL·kg⁻¹剂量进行麻醉。麻醉后，使用电动剃毛仪剔除大鼠腹部鼠毛，随后采用颈椎脱臼法处死大鼠。尽可能完整地取下大鼠腹部皮肤，小心去除皮下脂肪与血管组织，用生理盐水反复冲洗干净，以滤纸吸干表面水分，置于-20℃冰箱保存（一周内使用）。在进行透皮实验前，将鼠皮取出，放入生理盐水中自然解冻，浸泡30分钟，之后再次用生理盐水冲洗，用滤纸吸干水分，置于一旁备用。2.2.3.2芍药苷-黄芩素醇质体凝胶的制备取卡波姆941粉末0.75g，逐步分散至50ml蒸馏水中（40℃），于40℃水浴锅中搅拌2h，静置过夜，得到空白凝胶。量取20g空白凝胶，向其中加入“2.2.1.1”项下制备的醇质体溶液20ml,混合均匀，然后用三乙醇胺调节pH至中性，即得芍药苷-黄芩素醇质体凝胶。2.2.3.3体外透皮渗透液的制备精密称取处方量的黄芩素与芍药苷，直接溶解于已配制好的pH6.8的PBS溶液中，随后将溶液置于超声仪内，确保黄芩素和芍药苷完全溶解于PBS溶液。依据“2.2.3.2”项所述方法制备PBS溶液凝胶，精密量取2g该凝胶置于供给池中。分别于0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h时，精密量取1mL接收液，使用0.22μm的有机滤膜过滤，滤液留存备用。另精密移取2g“2.2.3.2”项制备的芍药苷-黄芩素醇质体凝胶，加入到供给池中。同样在上述各时间点，精密量取1mL接收液，经0.22μm有机滤膜过滤后备用。此外，精密移取“2.2.3.2”项的芍药苷-黄芩素醇质体凝胶，向其中加入5%当归挥发油作为透皮促渗剂，充分混匀。精密量取2g加入促渗剂的醇质体凝胶，置于供给池中。在0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h等时间点，精密量取1mL接收液，用0.22μm有机系滤膜过滤，所得滤液供后续分析使用。2.2.3.4体外透皮操作步骤采用Franz扩散池法开展透皮实验。设置接收池温度为37℃，其容积为16.6mL，扩散面积为0.785cm²。将SD大鼠皮妥善固定于接收池与供给池之间，确保角质层朝向供给池。以含0.2%维生素C的25%色谱乙醇溶液作为接收液。开启恒温37℃水浴装置与磁力搅拌器，平衡10分钟后，分别精密量取2g黄芩素-芍药苷混合的PBS凝胶、2g黄芩素-芍药苷醇质体凝胶以及2g加入5%当归挥发油的黄芩素-芍药苷醇质体凝胶，加入到供给池中，并用塑封膜封住上口。在0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h时间点，从接收池中各取样1mL。将各组透皮后的接收液，使用0.22μm的有机系滤膜过滤，滤液留存备用。同时，及时补充等量新鲜接收液，并排净鼠皮与接收液之间的气泡，以维持接收液环境的稳定性。最后，按照“2.2.1.3”项所规定的色谱条件，对接收液中黄芩素的含量进行测定，并据此计算单位面积的累积渗透量（Qn），为后续分析提供数据支持。计算公式如下：Qn=VCa+其中，Ca和Cb分别代表受试介质中a，b时测得的黄芩素浓度，s为有效扩散面积，和Vb分别代表接收池体积（16.6mL）和取样体积（1mL）。2.2.3.5皮肤滞留量试验从扩散池上小心取下皮肤，用生理盐水冲洗以去除残留制剂，随后用滤纸吸干皮肤表面水分。精确剪下有效皮肤面积，将皮肤剪碎并研磨均匀，加入甲醇后超声处理20min，促使皮肤中的药物充分溶出。待溶出完全后，取上清液，经0.22μm滤膜过滤。对滤液进行液相检测，测定芍药苷、黄芩素在皮肤中的滞留量。同时，依据公式Qs=CVs计算药物单位面积的皮肤滞留量（Qs，单位：μg·cm⁻²），其中C为皮肤提取液中药物浓度，V为提取液总体积，s为有效扩散面积。3.结果3.1芍药苷-黄芩素醇质体包封率按照“2.2.2.1”项下的方法测得芍药苷的包封率分别为54.28±5.18%，黄芩素的包封率80.81±0.74%。表10芍药苷包封率序号游离浓度破乳浓度包封率1（mg·mL-1）0.501.0451.95%2（mg·mL-1）0.651.3250.67%3（mg·mL-1）0.511.2960.22%表11黄芩素包封率序号游离浓度破乳浓度包封率1（mg·mL-1）0.110.5380.01%2（mg·mL-1）0.130.6981.46%3（mg·mL-1）0.120.6280.97%3.2芍药苷-黄芩素醇质体的质量评价3.2.1形态观测按照“2.2.2.1”项下方法观察到醇质体体粒径呈球形或近球形囊泡，粒径大小较均一，结构完整。其透射电镜图见图3。图3醇质体透射电镜图（放大倍数：20k）3.2.2醇质体粒径、多分散指数、Zeta电位按照“2.2.2.2”项方法测得黄芩素-芍药苷醇质体的多分散指数为0.187±0.02，Zeta电位为-（59.17±2.04）mV，平均粒径为131.13±5.29nm。表12醇质体粒径、多分散指数（PDI）、Zeta电位序号123456789平均值粒径123.1125.6125.5135.0135.9135.9135.1135.3133.5131.13Zeta电位-55.6-59.4-58.0-57.7-59.4-62.8-58.7-60.1-60.8-59.17PDI0.1820.1800.1650.1690.2210.2130.2230.1530.1800.187a b图4醇质体粒径分布（a）及Zeta电位（b）3.2.3体外透皮吸收按照“2.2.3”项的方法测得PBS凝胶组、醇质体凝胶组、含5%当归油的醇质体凝胶组体外透皮累计透过量。PBS凝胶组中黄芩素在8h时开始透过皮肤，24h累计透过量为（43.78±1.38）μg·cm−2；醇质体组黄芩素6h开始透过皮肤，24h累计透过量为（55.49±18.86）；当归油组黄芩素6h开始透过皮肤，24h累计透过量为（121.84±8.25）μg·cm−2。PBS凝胶组中芍药苷在24小时内无透过量；醇质体组芍药苷6h开始透过皮肤，24h累计透过量为（194.19±34.67）；当归油组芍药苷2h开始透过皮肤，24h累计透过量为（260.97±70.22）μg·cm−2。表12黄芩素24h累计透过量黄芩素0.5h1h2h4h6h8h12h24hPBS(μg·cm-2)0000010.2228.6142.250000012.9723.0544.13000008.8229.4744.95醇质体(μg·cm-2)00005.2852.1358.6076.5800004.7917.3528.1440.2400003.1117.3634.3149.655%当归油(μg·cm-2)0003.3710.3721.2758.60115.050005.229.7610.2815.09119.460002.657.2923.9550.09131.02表13芍药苷24h累计透过量芍药苷0.5h1h2h4h6h8h12h24hPBS(μg·cm-2)000000000000000000000000醇质体(μg·cm-2)000034.9446.4674.25214.01000016.67165.97201.84214.4100000136.18149.74154.165%当归油(μg·cm-2)015.9025.7482.77134.44156.90216.58256.320029.3566.08117.16140.86199.89333.390015.4747.8064.0281.84117.87193.193.2.4皮肤滞留量按照“2.2.3.5”项下方法计算，得出芍药苷-黄芩素PBS凝胶、芍药苷-黄芩素凝胶与含5%当归油的芍药苷-黄芩素凝胶中黄芩素的皮肤滞留量为(11.52±2.15)、(12.63±2.35)和(17.24±3.65)μg·cm−2：芍药苷滞留量为0μg·cm−2.表明不同制剂中的黄芩素经皮肤吸收时均存在一定的滞留情况，且滞留量由高到低依次为含促渗剂的醇质体凝胶、不含促渗剂的醇质体凝胶、PBS凝胶。表14黄芩素皮肤滞留量黄芩素123平均值PBS(μg·cm-2)13.1212.379.0811.52醇质体(μg·cm-2)15.2411.9610.6812.635%挥发油(μg·cm-2)15.2115.0521.4517.244.讨论与结论本实验采用超声-注入法制备了芍药苷-黄芩素醇质体。杨畅等人研究了芍药苷醇质体的体外释放、透皮特性，有效地解决了芍药苷低脂溶性和低生物利用度。但单一芍药苷制剂在复杂疾病（如类风湿性关节炎）中的疗效可能受限。黄芩素具有显著的抗炎和免疫调节作用，且具有良好的脂溶性，可能通过调节醇质体的膜结构进一步提高药物的载药量和释放速率。与单一芍药苷醇质体相比，复合醇质体可实现更完全的药物释放和更高的透皮效率，减少药物残留。课题组前期利用响应面优化法对处方进行了系统优化。优化后的处方成功制备出形态为类球形囊泡结构的醇质体，其粒径适中且分布均匀，在4℃条件下展现出良好的储存稳定性。测量粒径是检测黄芩素-芍药苷醇质体颗粒的大小，我们测得黄芩素-芍药苷醇质体的平均粒径为130.78±5.60nm，制备的醇质体具有较小的粒径且分布较为均匀。经测定，所制备醇质体的多分散指数为0.187±0.03，该值小于0.3。多分散指数作为衡量颗粒分散度的重要指标，此实验数据表明，所制得的醇质体颗粒分散相对均匀，粒径分布范围较窄。这一特性有助于提高醇质体在生物体内的渗透性与吸收效率，为其在药物递送系统中的应用提供了有力支持。Zeta电位是表征胶体分散系稳定性的关键参数。实验测得所制备醇质体的Zeta电位值为-（58.71±1.62）mV，较高的电位差意味着醇质体颗粒间存在较强的静电排斥力，这有效阻止了颗粒的聚集与沉降，说明所制备的醇质体具有较高的稳定性。采用透析袋法测定醇质体包封率，芍药苷、黄芩素分子量＜1000Da，可自由透过透析袋，醇质体粒径远大于透析袋截留量，故留在袋内。常选用PBS缓冲液（pH=6.8）作为透析外液，以保持渗透压平衡，但在实验过程中发现若单用PBS缓冲液作为透析外液，黄芩素很难溶解在外液中，且黄芩素易氧化，影响实验结果，故将外液改为含0.2%维生素C的26%乙醇PBS溶液。在查阅大量文献后，选用0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、12h吸取外相液考察透析时间，经重复多次实验发现，在3h时游离药物基本已完全透析，故选用3h下测得的包封率作为醇质体中芍药苷、黄芩素包封率。与课题组前期测得的包封率对比，芍药苷的包封率从40%提高到54.28±5.18%，但黄芩素的包封率从85%变成80.81±0.74%，有所降低，分析其原因在未改变醇质体体系成分比例的情况下可能是由于脂质膜空间与载量的限制，复合醇质体的磷脂双分子层和内部水相容积有限，当同时包封两种或多种药物时，药物分子会竞争有限的结合位点或空间。若一种药物占据过多空间（如疏水性药物插入脂质层），另一种药物的包封率可能下降。在体外透皮试验中，接收液的选择至关重要，需确保试验处于漏槽条件。针对水溶性较差的药物，通常通过添加吐温、胆酸钠、乙醇、丙二醇等物质来提高溶解度。为保护醇质体本身结构不受影响，最终确定使用含0.2%维生素C的26%乙醇溶液作为接收液，这不仅满足了漏槽条件，避免黄芩素氧化的同时还具有一定的防腐作用，有效防止了24h透皮试验中微生物对模拟皮肤的腐蚀。通过体外透皮实验对比黄芩素-芍药苷PBS凝胶、醇质体凝胶以及加入5%当归挥发油的醇质体凝胶在不同时间点的累计透过量，发现PBS溶液仅有少量药物透过皮肤，而制成醇质体后，药物透过皮肤的速度和累计量显著增加。这表明醇质体可有效提升药物的透皮率。综合大量文献分析，乙醇在醇质体中发挥着关键作用。乙醇的存在赋予了醇质体良好的柔韧性与变形性，这一特性使得醇质体相较于传统PBS溶液，在透皮过程中更具优势。传统PBS溶液颗粒相对固定，难以灵活改变形态以适应皮肤孔径；而醇质体凭借其柔韧变形特质，能更轻松地穿透皮肤孔径，抵达深层皮肤组织，进而显著促进药物的透皮吸收。将单纯的药物醇质体与添加挥发油的药物醇质体进行对比研究，结果表明当归挥发油在药物透皮过程中起到了促渗剂的作用。从相关实验数据可知，在相同时间节点下，加入挥发油的醇质体透过皮肤的速度更快，且能使更多药物透过皮肤。这是因为当归挥发油可能改变了皮肤角质层的结构，增加了皮肤的通透性，降低了药物透皮的阻力。因此，在制备醇质体后加入当归挥发油，一方面能够加速药物进入血液的速度，使药物更快发挥药效；另一方面，还能提高药物透过皮肤的量，增加药物在皮肤局部或全身的生物利用度，为药物的高效递送提供了新的思路和方法。在试验中，供药剂型的选择同样至关重要，凝胶剂外观均匀细腻，有良好的粘附性、涂展性、稳定性和透皮性能，且相较混悬液其流动性较弱，避免在试验过程中出现供给池漏液导致实验结果出现偏差。测得芍药苷-黄芩素PBS凝胶、芍药苷-黄芩素凝胶与含5%当归油的芍药苷-黄芩素凝胶中黄芩素的皮肤滞留量分别为(11.52±2.15)、(12.63±2.35)和(17.24±3.65)μg·cm−2：芍药苷滞留量为0μg·cm−2.表明不同制剂中的黄芩素经皮肤吸收时均存在一定的滞留情况，且滞留量由高到低依次为含促渗剂的醇质体凝胶、不含促渗剂的醇质体凝胶、PBS凝胶。理论上滞留量越大说明药物在皮肤上的作用效果越久，其治疗效果更佳。同时，醇质体的小粒径（小于200nm）使其易于穿透角质层，进入皮肤表皮及其底部，并在皮肤内滞留，形成药物贮库，实现缓释效果，延长了药物的药效发挥时间，为局部皮肤病治疗提供了更佳的疗效。基于现有研究，仍需在以下几个方面进一步探索与优化：1.需考察长期储存条件下醇质体的物理稳定性（如粒径、Zeta电位变化）和化学稳定性（如药物降解），添加稳定剂以延长保质期。2.推动临床转化与个性化治疗。当前研究集中于体外和动物实验，下一步需开展临床前安全性评价（如皮肤刺激性、全身毒性）和药效学验证。结合类风湿关节炎的病理特点。5.结论本试验围绕提高芍药苷-黄芩素醇质体包封率、考察芍药苷-黄芩素醇质体的表征与体外经皮吸收，考察芍药苷-黄芩素药对的不同剂型在皮肤中的滞留量。为类分湿关节炎的治疗提供可靠基础。醇质体可有效改善和提高芍药苷-黄芩素的经皮渗透效果，由研究结果可知，醇质体在增大透皮量的同时增加了在皮肤中的滞量，24h的芍药苷累积渗透量为30.41μg·cm−2，黄芩素累积渗透量96.9μg·cm−2。加入促渗剂后24h的芍药苷累积渗透量为256.32μg·cm−2，黄芩素累积渗透量为183.5μg·cm−2。芍药苷皮肤滞留量为0，黄芩素皮肤滞留量为(13.46±5.83)μg·cm−2，加入促渗剂后黄芩素皮肤滞留量(15.18±6.27)μg·cm−2。以醇质体作为载体使芍药苷-黄芩素的透皮特性得到明显改善，但要达到治疗剂量还有待进一步深入研究探讨，以便为芍药苷-黄芩素经皮给药新制剂的研究开发提供理论依据增加RA患者的用药选择。参考文献[1]张朦.二元醇对醇质体稳定性及载药行为的影响研究[D].佳木斯大学,2024.[2]许攀.天麻素阿魏酸醇质体的制备及评价[D].江西中医药大学,2022.[3]林俊敏.乳香-没药精油醇质体的制备及体外释药研究[D].广东工业大学,2021.[4]毕建云,王嘉驿,刘善新.基于星点设计-响应面优化法的川芎挥发油二元醇质体制备及性能表征[J/OL].中国医院药学杂志,1-13[2025-05-06].[5]江俊仿,龙立青,邓敏娴,等.穿心莲内酯醇质体的制备和评价[J/OL].天然产物研究与开发,1-13[2025-05-06].[6]蒲美玲,梁蓉,赵炳天,等.羟基积雪草双糖苷神经酰胺醇质体的制备及皮肤渗透性能[J/OL].精细化工,1-12[2025-05-06].[7]尹子丽,李秀楠,吴倩,等.金铁锁总皂苷醇质体凝胶的制备及评价[J].时珍国医国药,2024,35(13):2993-2998.[8]于秋菊.吲哚美辛二元醇质体凝胶剂的制备与质量研究[J].安徽化工,2024,50(04):58-64+68.[9]梁蓉,贾利萍,杨成.包封视黄醇棕榈酸酯和肌肽的二元神经酰胺醇质体的制备和性能[J].精细化工,2025,42(01):159-165+232.[10]邓梦洁,易国斌,吕冉,等.阿魏酸纳米醇质体的制备、表征及体外经皮吸收研究[J].日用化学工业(中英文),2023,53(11):1285-1292.[11]陈筱瑜,冯玉天娇,吴少嫒,等.黄芪甲苷二元醇质体凝胶的制备及其对大鼠皮肤创面愈合的影响[J].福建中医药,2023,54(10):44-47.[12]毛卫玲,梁荣珍,吉贞料,等.芍药苷调节IL-6/STAT3信号通路对慢性萎缩性胃炎大鼠的治疗作用研究[J].现代免疫学,2025,45(02):179-184+210.[13]高军,王隶书,陈昕,等.经典名方达原饮指纹图谱及多指标含量测定研究[J].药学前沿,2025,29(03):416-422.[14]黄楚瑶,魏桢文,郑宁香,等.当归芍药散通过调控cGAS-STING/IRF7/STAT3信号通路改善血管性痴呆的神经炎症[J/OL].中国实验方剂学杂志,1-14[2025-05-06].[15]孙立夫.赤芍、白芍的化学成分及药理学研究的比较分析[J].园艺与种苗,2024,44(03):11-13+83.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