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文档简介
阴道分泌物临床检验与结果报告规范化指南要点解读总结2026一、概述阴道分泌物检验是通过检测女性生殖道是否存在内环境改变或感染,来辅助诊断阴道炎症的基本项目。本指南整合了以下标准文件制定:依据文件说明WS/T662-2020《临床体液检验技术要求》我国行业标准《全国临床检验操作规程》第4版我国操作规程CDC《2021年性传播疾病治疗指南》美国指南IUSTI/WHO《2018阴道分泌物管理指南》国际指南适用:临床实验室阴道分泌物的人工检验
目的:规范检验操作流程、结果报告及质量要求推荐级别分类级别含义1类证据级别最高,专家组一致推荐2A类级别稍低,专家组一致推荐2B类级别低,部分专家推荐3类专家分歧较大二、标本的采集与运送(一)标本采集采样器具要求:清洁干燥、无菌、无化学药品或润滑剂采样方法:使用1~3根灭菌拭子于阴道侧壁上1/3处旋转采样,以能清晰看到分泌物附着在拭子上为准如分泌物量过少,可在阴道后穹窿处采集标识要求:标本留取后宜用条形码标签进行唯一标识,包括但不限于:患者姓名、年龄、ID号、医嘱、标本类型、检验项目等推荐意见1(1类):建议于阴道侧壁上1/3处旋转采集阴道分泌物
推荐意见2(1类):应避免采集宫颈黏液,以免引起pH值改变(二)标本运送及接收要点要求运送条件室温尽快送检,途中注意生物安全防护毛滴虫检测保温、保湿并立即送检,送检时间不超过1h接收核对核对标本信息、采样时间、检查标本质量推荐意见3(1类):标本留取后应进行唯一标识并立即送检(三)注意事项影响检验结果的情况(采集前24~48h内):月经期性交盆浴阴道灌洗阴道内用药使用阴道润滑剂不合格标本包括:无标识或标识错误容器破裂涂片未见上皮细胞送检超过规定时间实验室应拒收不合格标本,及时向临床说明不合格原因,并做好相关记录。三、理学检查1.分泌物性状类型临床提示正常白色稀糊状、无腥臭气味豆腐渣或乳凝块样外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)黄绿色泡沫状、伴恶臭的脓性阴道毛滴虫病(TV)推荐意见4(1类):分泌物性状易受取样和运送影响,建议以临床医生进行妇科检查为主2.pH值正常阴道环境:弱酸性,pH保持在3.8~4.5pH值升高(>4.5):提示可能存在细菌性阴道病(BV)检测注意事项:pH值多由临床医生床旁利用干拭子擦拭阴道侧壁,在精密试纸上滚动进行检测宫颈黏液、精液、血液或预湿拭子会影响检测结果推荐意见5(1类):宫颈黏液、精液、血液或预湿拭子会影响阴道分泌物pH值四、形态学检查(一)涂片制备1.湿片制备向试管内滴加约0.5ml的0.9%氯化钠(NaCl)溶液洗脱阴道拭子,制成悬浊液或直接滴加1~2滴0.9%NaCl溶液至洁净载玻片上,再将拭子放在溶液中混合制成厚薄适宜的涂片(以能透视纸上字迹为宜),盖上盖玻片待检2.干片制备直接将阴道拭子均匀涂布在洁净玻片上,待自然晾干利用酒精灯快速烘干固定进行革兰染色;或根据临床需求选择其他染色方法(二)显微镜镜检湿片镜检低倍镜(10×10):快速浏览全片,评估涂片质量高倍镜(10×40):随机选择至少10个高倍镜视野,观察:上皮细胞、杆菌、球菌、白细胞线索细胞、阴道毛滴虫、真菌等病原微生物加做项目:滴加1~2滴10%氢氧化钾溶液,可快速溶解细胞、阴道毛滴虫和黏液丝,提高真菌检出率推荐意见6(1类):湿片镜检应观察上皮细胞、杆菌、球菌、白细胞及线索细胞、阴道毛滴虫、真菌等有形成分干片镜检革兰染色:细菌和真菌检测最常用的方法低倍镜(10×10):大致浏览全片油镜(10×100):仔细辨别细菌、真菌、阴道毛滴虫和线索细胞推荐意见7(2A类):基于相差显微镜的Donders评分标准可用于AV的辅助诊断
推荐意见8(1类):清洁度判定存在一定局限性,不建议单独使用清洁度诊断阴道炎症
推荐意见9(1类):干片染色镜检有利于有形成分的鉴别;基于革兰染色的Nugent评分可用于BV的实验室诊断(三)清洁度判定标准表1阴道分泌物清洁度判断标准清洁度杆菌球菌白细胞或脓细胞上皮细胞Ⅰ度多无0~5个/HPF满视野Ⅱ度中少>5~≤15个/HPF1/2视野Ⅲ度少多>15~≤30个/HPF少量Ⅳ度无大量>30个/HPF无注:HPF为高倍视野临床意义:Ⅰ-Ⅱ度多为正常,Ⅲ-Ⅳ度为异常。但清洁度判定存在局限性,临床不再单纯使用清洁度进行阴道炎症诊断。(四)Donders评分标准(AV诊断)表2需氧性阴道炎的Donders评分标准(10×40)评分乳杆菌分级a白细胞数含中毒颗粒的白细胞比例背景菌群基底旁上皮细胞比例0分Ⅰ级无或散在个别不明显或溶胞性无或偶见—1分Ⅱa级≤10个/HPF<1%大肠杆菌类等肠杆菌类的小杆菌—2分Ⅱb级>10个/HPF1%~10%球菌样或呈链状—3分Ⅲ级>10个/HPF>10%—>10%注:
a乳杆菌分级:Ⅰ级=大量多形乳杆菌;Ⅱa级=混合菌群,乳杆菌为优势菌群;Ⅱb级=混合菌群,乳杆菌比例降低;Ⅲ级=乳杆菌比例下降严重或缺失
HPF为高倍视野评分标准:Donders评分诊断0~2分正常3~4分轻度AV5~6分中度AV>6分重度AV(五)病原微生物和线索细胞的革兰染色形态表3阴道分泌物病原微生物和线索细胞的革兰染色形态(10×100)成分染色后镜下形态假丝酵母菌卵圆形革兰阳性孢子或假菌丝,呈链状及分枝状,呈深蓝或蓝灰色阴道毛滴虫呈梨形、椭圆形或圆形,偶见鞭毛;粉红色,胞核小,染色深,胞质泡沫感明显,可见深染颗粒线索细胞大量短小的革兰阴性杆菌附于上皮细胞,胞质内有颗粒状红染物(六)Nugent评分标准(BV诊断)表4细菌性阴道病的Nugent评分标准(10×100)评分乳杆菌数量阴道加德纳菌及其他类杆菌弯曲杆菌0分4+001分3+1+~2+1+~2+2分2+3+~4+3+~4+3分1+3+—4分04+—注:
评分基于3个油镜视野下细菌的平均数量
总得分=乳杆菌评级+阴道加德纳菌及其他类杆菌评级+弯曲杆菌评级
0分:未见细菌;1+=<1个细菌;2+:1-4个细菌;3+:5-30个细菌;4+:>30个细菌Nugent评分标准:总评分诊断0~3分正常4~6分中间型≥7分BVBV诊断Amsel标准(满足至少3项可诊断):阴道分泌物性状为灰白色、均质、稀薄阴道分泌物pH>4.5胺试验阳性湿片镜检中,线索细胞数量>20%的阴道上皮细胞总量注意:Amsel标准灵敏度和特异度较低(灵敏度约60%~72%),易导致漏诊。(七)其他染色方法染色方法特点巴氏染色、瑞氏-吉姆萨染色有利于异常细胞检出,但不能区分革兰阳性和革兰阴性细菌荧光染色法灵敏度高,抗干扰能力强,但成本较高五、化学检查1.胺试验向新鲜涂片直接滴加1滴10%氢氧化钾溶液使游离氨释放,产生鱼腥样气味即胺试验阳性,可用于辅助诊断BV2.干化学检查通过干化学酶法检测特异标志酶,评估阴道健康状况,辅助鉴别诊断各型阴道炎。表5干化学检查项目及临床意义检查项目临床意义唾液酸苷酶厌氧菌代谢产物,联合形态学检查辅助诊断BV过氧化氢反映阴道分泌物中乳杆菌等有益菌的量白细胞酯酶间接反映阴道分泌物中白细胞数量脯氨酸氨基肽酶辅助诊断(应用价值有限)乙酰氨基糖苷酶辅助诊断(应用价值有限)β-葡萄糖醛酸苷酶辅助诊断(应用价值有限)凝固酶辅助诊断(应用价值有限)注:可根据临床需要和病情酌情选用六、结果报告阴道分泌物检验结果报告推荐采用三级报告模式。(一)一级报告:描述性报告根据医嘱和实验室开展的检验项目进行报告,可包括形态学检查、化学检查和阴道微生态评价。如可行,可采用图文报告形式。1.形态学检查检查内容报告方式清洁度以Ⅰ~Ⅳ级进行报告(分级标准见表1)白细胞半定量方式报告,推荐以10×40高倍镜下最低~最高的数量进行报告病原微生物阴道毛滴虫、线索细胞、真菌或寄生虫以定性结果报告:
•查见→"检出"
•未查见→"未检出"
•检出线索细胞时可进一步报告其百分比
•查见真菌应报告具体形态(孢子、芽生孢子或假菌丝)2.化学检查化学检查结果以定性结果报告:阴性(-)或阳性(+)。3.阴道微生态评价参考《阴道微生态评价的临床应用专家共识》,评价指标包括:评价项目分级标准菌群密集度Ⅰ级:每个视野平均1-9个细菌Ⅱ级:10-99个Ⅲ级:≥100个且光镜下细菌满视野
Ⅳ级:成团聚集的细菌覆盖于上皮细胞菌群多样性Ⅰ级:1-3种Ⅱ级:4-6种Ⅲ级:7~9种Ⅳ级:≥10种优势菌群常见:乳杆菌(革兰阳性杆菌)、链球菌(革兰阳性球菌)、加德纳菌(革兰阴性短杆菌或弧菌)菌群生长情况正常:密集度Ⅱ-Ⅲ级、多样性Ⅱ-Ⅲ级、优势菌为乳杆菌
菌群抑制:细菌明显减少,无优势菌,密集度和多样性均≤Ⅰ级
菌群增殖过度:密集度和多样性均为Ⅲ~Ⅳ级,且优势菌为形态类似乳杆菌的革兰阳性杆菌Donders评分0-2分=正常;3-4分=轻度AV;5~6分=中度AV;>6分=重度AVNugent评分0-3分=正常;4-6分=中间型;≥7分=BV(二)二级报告:诊断建议综合形态学、化学检查和阴道微生态评价结果,给出1~2个倾向性的诊断建议。镜检发现提示诊断查见真菌的芽生孢子或假菌丝可能为VVC查见阴道毛滴虫TV(三)三级报告:检验提示为临床提供合理性的进一步检验建议:当镜检结果与化学检查结果不符时,应以镜检结果为主可建议通过培养法或NAAT进行确诊实验怀疑混合型阴道炎或复发性VVC时,可通过阴道微生态评价或培养法做进一步检验推荐意见10(1类):阴道分泌物检验结果报告推荐采用三级报告模式七、质量控制1.室内质控项目要求质控物至少使用阴性和阳性质控物检测频率每工作日至少检测1次偏差要求不超过1个等级,且阴性不可为阳性,阳性不可为阴性已有质控物的项目唾液酸苷酶、乙酰氨基糖苷酶、过氧化氢、白细胞酯酶、脯氨酸氨基肽酶、β-葡萄糖醛酸苷酶、凝固酶等定性化学检查2.室间质评或能力验证项目要求已开展室间质评的项目乙酰氨基糖苷酶、唾液酸苷酶、白细胞酯酶、过氧化氢、脯氨酸氨基肽酶未开展室间质评的项目至少使用5份新鲜临床样品(含2份正常和3份异常水平)进行比对比对结果判读偏差不超过1个等级,阴性不可为阳性,阳性不可为阴性,符合率应≥80%记录保存至少保存2年3.人员要求要求说明专业资格具有相关的专业技术资格人员间比对定期进行,每年至少两次,每次使用至少5份新鲜临床样品(含2份正常和3份异常水平)比对要求≥80%的结果通过比对为符合记录保存至少保存2年形态学考核采用显微摄影照片(包括正常和异常有形成分)或其他形式进行考核识别要求检验人员应能正确识别至少80%疑难病例讨论如进行阴道微生态评价,应定期组织科内疑难病例讨论推荐意见11(1类):阴道分泌物检验应开展室内质控,参加室间质评或实验室间比对八、指南推荐意见汇总序号推荐内容级别1建议于阴道侧壁上1/3处旋转采集阴道分泌物1类2应避免采集宫颈黏液,以免引起pH值改变1类3标本留取后应进行唯一标识并立即送检1类4分泌物性状易受取样和运送影响,建议以临床医生进行妇科检查为主1类5宫颈黏液、精液、血液或预湿拭子会影响阴道分泌物pH值1类6湿片镜检应观察上皮细胞、杆菌、球菌、白细胞及线索细胞、阴道毛滴虫、真菌等有形成分;滴加氢氧化钾可提高真菌检出率1类7基于相差显微镜的Donders评分标准可用于AV的辅助诊断2A类8清洁度判定存在一定局限性,不建议单独使用清洁度诊断阴道炎症1类9干片染色镜检有利于有形成分的鉴别;基于革兰染色的Nugent评分可用于BV的实验室诊断1类10阴道分泌物检验结果报告推荐采用三级报告模式1
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