DB37T 6033-2026 鱼类病毒性疫病核酸检测非致死采样技术规范

65.15037B50山东省地方标准37/T6033—2026鱼类病毒性疫病核酸检测非致死采样技术规范Technicalspecificationfornon-lethalsamplingofnucleicaciddetectionfishviraldiseases2026-05-发布2026--实施山东省市场监督管理局ꢀꢀ发布DB37/T60332026前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由山东省农业农村厅提出并组织实施。本文件由山东省农业标准化技术委员会归口。源养护中心。广州、杨凤香。IDB37/T60332026鱼类病毒性疫病核酸检测非致死采样技术规范1品封存与运输、样品登记与保存的要求，描述了记录等证实方法。本文件适用于具有保活需求的鱼类病毒性疫病的采样。2规范性引用文件文件。SC/T7103水生动物产地检疫采样技术规范3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4基本要求4.1优先选择已发病、具有典型表观症状的鱼类，并及时取样。4.2采样过程宜避免对诊断和病原分析结果有影响的因素发生。4.3采样工具应满足病料采集要求，做到无菌、无毒、洁净、干燥、无污染。4.4采样机构应为水生动物疫病检测单位。4.5采样人员应不少于2人，并经过专门培训，熟知采样程序和方法。5采样准备5.1方案制定存与运输等。5.2工具准备确定采样人员，准备采样器具及辅助设施，制备采样记录表格。5.2.1采样器具一次性无菌注射器、采血管或灭菌EP管。5.2.2辅助设施1DB37/T60332026搪瓷托盘、镊子、酒精棉球、深色绒布及水桶（盆）、生理盐水等。5.3方案实施品采集后应及时赋予唯一性编号。采样数量应符合SC/T7103的要求。6现场采样6.1取6ꢀcm以上的海、淡水鱼苗或成鱼，用50ꢀmg/L～150ꢀmg/L的MSꢀ222（间氨基苯甲酸乙酯甲磺酸盐）浸浴5min～15ꢀmin进行麻醉。6.26.2.1用无菌注射器沿鱼体中线、臀鳍基部后面的鳞下刺入，推进至血管棘之间，刺破血管弧的动脉1ꢁmin～2ꢁ鲜血液缓慢注入普通采血管或经灭菌生理盐水浸润的灭菌EP管中。6.2.2体长6ꢁcm～10ꢁcm鱼种，采血0.5ꢁmL；体长10ꢁcm～15ꢁcm鱼种，采血1mL～1.5mL；15ꢁcm以上大规格鱼种或成鱼，采血2ꢁ6.3粘贴标签每个样品管贴标签并写明样品编号、采集地点、鱼类种类、采样人员、采样日期等。样品管较小，无法写具详细信息时可粘贴唯一性简易防水标识。6.4采样记录样品采集时，采样人员应认真填写采样记录，记录内容详见附录A《现场采样记录表》，并由采样人、被采样单位负责人（或业务负责人或其委托人）共同签字确认。采样记录表一式三份，分别留存被采样单位、承检单位和任务下达部门。7样品封存与运输7.1样品封存装材料和器具应完整、结实、洁净、干燥，且具有抗压抗震防渗漏性能。7.2样品运输将采血后的采血管或灭菌EP管低温静置10ꢀmin～20ꢀmin后放入冰盒中，添加柔性填充材料，专人运输，途中避免剧烈震荡，严禁倾覆颠倒。8样品登记与保存8.1样品登记处理2DB37/T603320268.1.1样品核验收录行电子资料留存。8.1.2血清制备将装有新鲜血液的采血管或EP管置4℃冰箱中过夜，以3ꢁ500ꢁrpm速度离心10ꢁmin。分离后小心吸取上层血清，转入新的灭菌EP管中，制备成独立样本或混合样本。8.1.3样品收储流转血清样本重新登记完成后，及时进入实验室流转和分样检疫。8.2样品保存样品经分样后，除一部分进入检疫检验流程外，其余部分于－80ꢀ℃留样冻存。检测报告签发后，血清样品应存储6个月方可作无害化处理。3DB37/T60332026附录A（资料性）现场采样记录表现场采样记录表见表A.1。表A.1现场采样记录表样品名称样品数量样品编号样品规格□无病症；□有病症；□濒死病症：样品状态采样时℃pH环境条件单