2026病理技术资格证试题及答案

2026病理技术资格证试题及答案一、单选题（A1/A2型题）1.目前病理科最常用的常规固定液是（）。A.95%乙醇B.4%多聚甲醛C.10%中性缓冲福尔马林D.Zenker固定液E.Bouin固定液【答案】C【解析】10%中性缓冲福尔马林（10%NeutralBufferedFormalin，NBF）因其渗透力强、固定均匀、对核质固定效果好且价格低廉，成为病理科最常用的常规固定液。95%乙醇虽有固定作用但易致收缩；Zenker和Bouin固定液通常用于特殊染色需求。2.在HE染色中，苏木精染液pH值通常控制在（）。A.酸性（pH1.0-2.0）B.弱酸性（pH4.0-5.0）C.中性（pH7.0）D.弱碱性（pH7.6-8.0）E.强碱性（pH>10）【答案】D【解析】苏木精为碱性染料，其氧化成熟后称为苏木红，对细胞核中的核酸（酸性物质）有亲和力。为了促进染色，苏木精染液通常配制在弱碱性环境（pH7.6-8.0）中，此时染色能力最强。3.脱水过程中，组织块从低浓度酒精向高浓度酒精梯度过渡的主要目的是（）。A.节省试剂B.防止组织过度硬化C.避免组织剧烈收缩D.加速脱水过程E.有利于透明【答案】C【解析】如果直接将组织投入高浓度酒精，由于组织内外浓度差过大，会导致组织表面迅速硬化，阻碍内部水分渗出，且易引起组织剧烈收缩变形。梯度脱水能温和地去除水分。4.下列关于石蜡包埋温度的描述，正确的是（）。A.应低于石蜡熔点3-5℃B.应等于石蜡熔点C.应高于石蜡熔点2-4℃D.温度越高越好，可防止石蜡凝固E.应在60℃以上【答案】C【解析】包埋时石蜡温度应高于石蜡熔点2-4℃左右。通常使用的石蜡熔点在56-58℃，故包埋箱温度一般设置在60-62℃。温度过高易烫伤组织，导致细胞收缩；温度过低则石蜡粘稠，包埋易产生气泡。5.冰冻切片中，最常用的固定液是（）。A.10%福尔马林B.95%乙醇C.丙酮D.4%多聚甲醛E.甲醇【答案】C【解析】冰冻切片要求快速固定，丙酮渗透快、固定迅速，且能在低温下使用，是术中快速病理诊断（FrostSection）最常用的固定液。固定后通常不需水洗直接染色。6.病理技术中，用于显示糖原（PAS反应）的固定液首选是（）。A.乙醇B.福尔马林C.Carnoy液D.Rossman液E.Bouin液【答案】C【解析】糖原易溶于水，且在常规福尔马林固定中易被氧化消失。Carnoy固定液（由乙醇、氯仿、冰醋酸组成）能很好地保存糖原和尿酸，是PAS染色的首选固定液。7.脱钙过程中，指示脱钙终点最常用的方法是（）。A.称重法B.物理触诊法C.化学测定法D.钙离子指示剂法E.X线透视法【答案】B【解析】在常规病理工作中，最简便、常用的方法是物理触诊法。即用针头轻刺骨组织，若感觉无阻力且组织变软，即认为脱钙完成。化学测定法虽准确但操作繁琐，不常用于日常大批量标本。8.免疫组化染色中，抗原修复的主要机制是（）。A.暴露被甲醛固定所遮蔽的抗原决定簇B.增加抗体的浓度C.封闭非特异性背景D.增强显色反应E.促进抗体结合【答案】A【解析】福尔马林固定过程中，醛基与蛋白质发生交联，形成亚甲基桥，导致空间构象改变，遮蔽了抗原决定簇。抗原修复（热修复或酶修复）通过断裂部分交联键，重新暴露抗原，以便抗体结合。9.下列哪种试剂是常规HE染色中的“分化液”？（）A.伊红染液B.盐酸酒精C.氨水D.Scott氏液E.乙醇【答案】B【解析】在HE染色中，苏木精染色后，组织往往着色过深。盐酸酒精（1%盐酸乙醇）用于分化，即褪去过深的背景染色及胞质着色，使细胞核与胞质对比清晰。Scott氏液（碳酸锂水溶液）是“返蓝液”。10.网状纤维染色常用的金属盐媒染剂是（）。A.硫酸铝钾B.硝酸银C.醋酸铀D.氯化金E.硫酸铜【答案】B【解析】网状纤维染色（如Gomori或Gordon-Sweets法）利用网状纤维对银离子有亲和力，经氨性银溶液浸染后，被还原成黑色的金属银，故网状纤维呈黑色，需要硝酸银作为媒染剂和染色剂。11.在病理档案管理中，蜡块的保存期限通常要求为（）。A.5年B.10年C.20年D.30年E.永久保存【答案】C【解析】根据《病理科建设管理指南》及相关行业规范，常规诊断后的蜡块及切片通常要求保存至少20年，以备后续复查、教学科研及医疗纠纷处理。12.下列关于切片机刀刃角度的说法，错误的是（）。A.硬组织（如骨、脑）需较小的刀刃角B.软组织需较大的刀刃角C.刀刃角越小，切片越容易皱缩D.常用石蜡切片刀刃角约为3°-5°E.刀刃角设置不当易导致切片厚薄不均【答案】A【解析】硬组织阻力大，需要较大的刀刃角（如5°-7°）以支撑切割力；软组织阻力小，需要较小的刀刃角（如3°）以保证切片平整。选项A说硬组织需小角度是错误的。13.脱水透明剂二甲苯若进入眼内，正确的紧急处理措施是（）。A.立即滴入生理盐水冲洗B.立即滴入弱碱中和C.立即用大量清水冲洗15分钟以上D.滂可维溶液冲洗E.不需处理，自行吸收【答案】C【解析】任何化学试剂溅入眼内，首要原则是用大量流动清水冲洗至少15分钟，稀释并冲出化学物质，最大限度减少损伤，然后再进行进一步医疗处理。14.Masson三色染色中，胶原纤维通常被染成（）。A.红色B.黄色C.蓝色D.黑色E.绿色【答案】C【解析】Masson三色染色用于区分胶原纤维和肌纤维。在经典配方中，胶原纤维呈蓝色，肌纤维呈红色，红细胞呈黄色。这有助于观察组织纤维化程度。15.细胞凋亡检测中，TUNEL法的原理是检测（）。A.细胞表面抗原B.细胞内特定蛋白C.DNA断裂产生的3'-OH末端D.mRNA表达水平E.染色体畸变【答案】C【解析】TUNEL（TdT-mediateddUTPNickEndLabeling）法原理是：细胞凋亡时，内源性核酸酶激活将DNA切断产生暴露的3'-OH末端，在末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）作用下，将标记的dUTP连接到3'-OH末端，从而显色定位凋亡细胞。16.下列哪项不是影响免疫组化非特异性染色的因素？（）A.内源性过氧化物酶B.内源性生物素C.抗体浓度过高D.正常血清封闭不当E.DAB显色时间过短【答案】E【解析】DAB显色时间过短会导致特异性染色变淡，不会导致非特异性背景染色。A、B、C、D均是导致背景过深或非特异性染色的常见原因。17.在液基细胞学制片中，去除粘液和血液成分的原理是（）。A.过滤B.离心C.密度梯度离心D.细胞自然沉降E.化学溶解【答案】C【解析】液基细胞学（如TCT）利用密度梯度离心技术，将诊断性细胞与粘液、血液、炎性碎片等杂质分离。诊断性细胞比重较大，被吸附在滤膜或沉降到管底，而比重较小的杂质被去除。18.组织切片中出现“空洞”或“裂隙”，最常见的原因是（）。A.固定不及时B.脱水不彻底C.透明时间过长D.包埋时石蜡温度过低E.切片刀钝【答案】B【解析】脱水不彻底是组织切片出现空洞或裂隙最常见的原因。组织中残留的水分在进入透明剂（二甲苯）时，由于不互溶，形成微小气泡，导致切片呈现空洞状。19.抗酸染色用于检测（）。A.真菌B.细菌C.分枝杆菌（如结核杆菌）D.寄生虫E.病毒包涵体【答案】C【解析】抗酸染色（Ziehl-Neelsen法）是检测分枝杆菌的特异性染色方法，因为分枝杆菌细胞壁含有大量脂质（分枝菌酸），能抵抗盐酸酒精的脱色作用，故呈红色，而其他细菌被脱色呈蓝色。20.电子显微镜技术中，用于超薄切片的包埋介质通常是（）。A.石蜡B.火棉胶C.环氧树脂（Epon812）D.明胶E.琼脂【答案】C【解析】电镜要求极高的分辨率和切片硬度（切成50-70nm超薄切片）。环氧树脂（如Epon812）聚合度高、硬度适中、耐受电子束轰击，是电镜标准的包埋介质。石蜡分辨率远达不到要求。21.下列关于病理申请单的描述，错误的是（）。A.是具有法律效力的医疗文书B.必须包含患者姓名、性别、年龄、住院号C.临床病史描述对病理诊断至关重要D.可由实习医生独立填写并签字E.标本类型和部位必须明确【答案】D【解析】病理申请单是重要的法律文书，必须由具有执业资格的临床医生填写并签字，实习医生通常需在上级医师指导下填写，并由上级医师审核签字，不可独立签字生效。22.尿液沉渣涂片查癌细胞，最常用的固定方法是（）。A.95%乙醇固定30分钟B.10%福尔马林固定24小时C.乙醚酒精固定D.冷冻固定E.不需固定，直接涂片干燥【答案】C【解析】尿液涂片查癌细胞通常使用乙醚酒精（等量混合）固定，既能固定又能沉淀蛋白质，保持细胞形态良好。若用福尔马林固定后染色效果较差。23.在免疫荧光技术中，FITC（异硫氰酸荧光素）激发后产生的荧光颜色为（）。A.红色B.绿色C.蓝色D.黄色E.紫色【答案】B【解析】FITC是免疫荧光最常用的标记物，在激发光（488nm）激发下，发出明亮的黄绿色荧光（峰值约525nm）。TRITC则发出红色荧光。24.病理显微摄影中，欲获得最大景深，应调节（）。A.增大光圈孔径B.减小光圈孔径C.增加曝光时间D.提高放大倍数E.使用油镜【答案】B【答案解析】景深与光圈孔径成反比。缩小光圈（即增大数值孔径的倒数，或缩小聚光镜光阑）可以增加景深，使视野内不同层次的细胞结构更清晰。但在显微镜中，光阑过小会降低分辨率，需平衡使用。25.脱钙液“Plank-Rychlo”液的主要成分是（）。A.盐酸和氯化铝B.甲酸C.EDTAD.硝酸E.醋酸【答案】A【解析】Plank-Rychlo液是一种快速脱钙液，主要成分是盐酸和氯化铝。盐酸起脱钙作用，氯化铝能防止组织过度膨胀和软化，且对后续染色影响较小。26.组织块进入石蜡包埋前，必须经过的步骤是（）。A.水洗B.脱水C.透明D.浸蜡E.染色【答案】D【解析】浸蜡是包埋前的关键步骤。组织经透明后，需在熔化的石蜡中浸泡，以置换出组织中的透明剂（二甲苯），使石蜡充分渗入组织内部，这样才能与包埋用的石蜡融为一体，形成坚实的蜡块。27.苏木精染液中常用的氧化剂是（）。A.高锰酸钾B.过氧化氢C.氧化汞（红色氧化汞）D.重铬酸钾E.碘酸钠【答案】C【解析】传统的Harris苏木精染液配方中，使用氧化汞作为氧化剂，将苏木精氧化为具有染色活性的苏木红。现代配方中也有使用碘酸钠等作为氧化剂的改良方法。28.下列哪种染色常用于鉴别诊断黑色素瘤？（）A.普鲁士蓝染色B.Masson-Fontana染色C.刚果红染色D.油红O染色E.PAS染色【答案】B【解析】Masson-Fontana银染色用于显示黑色素。黑色素具有嗜银性，能将银离子还原为黑色金属银，故黑色素颗粒呈黑色或深褐色，有助于在HE染色难以鉴别时确诊黑色素瘤。29.PCR技术在病理诊断中主要用于（）。A.观察细胞形态B.检测基因突变和病原体核酸C.检测蛋白质表达D.检测染色体结构E.检测代谢产物【答案】B【解析】PCR（聚合酶链式反应）是一种核酸扩增技术，具有极高的灵敏度，主要用于检测特定的DNA序列，如淋巴瘤的基因重排、感染性病原体的DNA/RNA（需RT-PCR）以及特定基因的突变。30.关于全包埋技术（巨检取材），下列说法正确的是（）。A.所有肿瘤标本都必须全包埋B.仅用于微小标本C.是为了寻找微小病灶或准确测量肿瘤范围D.费用低，效率高E.不需要临床提供信息【答案】C【解析】全包埋（Totallyembedding）是指将送检标本全部组织块取材进行包埋。这通常用于寻找微小癌灶（如早期宫颈癌锥切标本）、确定肿瘤确切浸润范围或边界，虽耗时耗材多，但在特定病理诊断中非常必要。31.刚果红染色用于诊断（）。A.糖原沉积症B.淀粉样变性C.脂肪沉积症D.纤维素性坏死E.粘液变性【答案】B【解析】刚果红染色是诊断淀粉样变性的特异性染色。淀粉样蛋白与刚果红结合，在普通光镜下呈橙红色，在偏振光显微镜下呈现特征性的苹果绿色双折光。32.在免疫组化自动化染色仪中，DAB显色后必须进行的步骤是（）。A.复染B.脱水C.自来水冲洗D.封片E.抗原修复【答案】C【答案解析】DAB（二氨基联苯胺）是一种显色底物，反应终产物不溶于水但反应过程中可能残留试剂。显色结束后必须用自来水充分冲洗，以终止反应并洗去未结合的底物，防止背景持续加深。后续才是复染、脱水和封片。33.病理切片封片时常用的封固剂是（）。A.二甲苯B.树胶（中性树胶）C.乙醇D.甘油E.加拿大树胶【答案】B【解析】病理切片最常用的封固剂是中性树胶，其折射率与玻璃（1.52）相近，能清晰显示组织结构，并能长期保存。加拿大大树胶也是常用封固剂之一。34.导致切片出现“刀痕”或“划痕”的原因不包括（）。A.刀刃有缺口B.切片机上组织碎屑未清理C.蜡块过硬D.切片速度过快E.染色缸中有沉渣【答案】D【答案解析】切片速度过快通常导致切片厚薄不均或卷片，不会直接产生划痕。刀刃有缺口、蜡块中有硬物（如钙化点）、蜡块过硬、切片机脏污以及染色过程中玻璃器皿不干净导致沉渣划伤切片面，都是划痕的常见原因。35.乙型肝炎病毒免疫组化检测中，通常观察的部位是（）。A.细胞核B.细胞质C.细胞膜D.核仁E.间质【答案】B【解析】乙型肝炎病毒表面抗原和核心抗原在肝细胞中主要呈细胞质阳性（有时伴有膜型），这与丙肝病毒等有所不同。36.病理技术质量控制（QC）中，HE染色“细胞核呈蓝色，细胞质呈红色”属于（）。A.阴性对照B.阳性对照C.内部对照D.外部对照E.空白对照【答案】C【解析】内部对照是指利用标本自身的已知成分作为对照。在HE染色中，红细胞呈红色、细胞核呈蓝色是组织固有的颜色特征，技术员通过观察这些固有特征是否正常来判断染色效果，这属于内部质量控制。37.FISH（荧光原位杂交）技术主要用于检测（）。A.蛋白质水平B.DNA或RNA序列及其定位C.糖类分布D.脂质分布E.酶活性【答案】B【解析】FISH技术利用荧光标记的核酸探针，与细胞核内的染色体或DNA/RNA特定序列杂交，在荧光显微镜下观察信号的位置和数量，常用于检测基因扩增、易位、缺失等。38.下列哪种固定液对脂肪组织的固定效果最好？（）A.10%福尔马林B.95%乙醇C.丙酮D.锇酸E.Bouin液【答案】D【解析】锇酸是电镜水平的固定剂，它能与不饱和脂肪酸发生反应，使脂肪得以固定并被染成黑色，是固定脂肪最好的试剂。常规光镜下脂肪通常不固定，需用冰冻切片。39.病理诊断报告发出后，如需更改原诊断，必须（）。A.直接在原报告上涂改B.口头通知临床C.发出补充报告或更正报告，并保留原记录D.销毁原报告E.电话通知患者【答案】C【解析】病理报告具有法律效力。一旦发出，严禁涂改。若发现错误需要更改，必须按照程序发布“补充报告”或“更正报告”，详细说明更改原因，并归档保存，原报告不可撤销。40.组织切片染色后，若需长期保存，应（）。A.暴露在空气中B.存放在干燥、避光处C.存放在冰箱冷冻室D.长期浸泡在二甲苯中E.存放在湿润环境中【答案】B【解析】染色后的切片应存放在专用的切片盒内，放置在干燥、避光的地方。潮湿会导致褪色或霉菌生长，强光会导致色素（如核固红、伊红）褪色。二、多选题（X型题）41.常规病理技术从标本到切片的基本流程包括（）。A.固定B.取材C.脱水、透明、浸蜡D.包埋、切片、摊片E.烤片、染色、封片【答案】ABCDE【解析】这是一套完整的病理技术流程，涵盖了从标本处理到最终制成镜下可观察切片的所有必要步骤。42.关于苏木精-伊红染色（HE染色），下列描述正确的有（）。A.苏木精是碱性染料，将细胞核染成蓝色B.伊红是酸性染料，将细胞质染成红色C.细胞核内的酸性物质与苏木精结合称为“嗜碱性”D.细胞质内的碱性物质与伊红结合称为“嗜酸性”E.HE染色是病理诊断最基础、最常用的染色方法【答案】ABCDE【解析】HE染色原理涵盖了酸碱化学结合机制。细胞核富含核酸（酸性），结合碱性染料苏木精，呈嗜碱性；细胞质富含蛋白质（碱性），结合酸性染料伊红，呈嗜酸性。它是病理诊断的“金标准”染色法。43.下列哪些情况属于病理技术中的“组织收缩”原因？（）A.使用高浓度酒精直接固定B.脱水时间过长C.透明剂（二甲苯）处理时间过长D.火棉胶包埋E.冰冻切片【答案】ABC【解析】酒精和二甲苯都会导致组织收缩。高浓度酒精直接固定或脱水时间过长会显著收缩组织；二甲苯虽能置换酒精但长时间处理也会引起轻微收缩。火棉胶包埋和冰冻切片相对于石蜡包埋而言，收缩较小。44.免疫组化染色中，常见的对照设置包括（）。A.阳性对照（已知表达该抗原的组织）B.阴性对照（已知不表达该抗原的组织）C.空白对照（省去一抗）D.替代对照（用非免疫血清代替一抗）E.自身对照（利用切片内的正常细胞作为内参）【答案】ABCDE【解析】严谨的免疫组化实验应设置多种对照以排除假阳性或假阴性。阳性对照确认系统工作；阴性/空白/替代对照检测抗体的特异性；自身对照有助于评估组织内部的表达差异。45.病理切片中常见的假象包括（）。A.苏木精沉淀B.切刀痕C.组织折叠D.封片气泡E.色素沉着【答案】ABCDE【解析】这些都是技术操作过程中产生的非病理学改变。苏木精沉淀是染液沉渣附着；刀痕是刀口缺口；折叠是切片未展平；气泡是封固剂未排净；色素沉着如含铁血黄素或福尔马林色素，虽属体内物质但有时也干扰观察。46.下列哪些是特殊染色？（）A.抗酸染色B.网状纤维染色C.PAS染色（过碘酸-雪夫反应）D.免疫组化染色E.原位杂交染色【答案】ABC【解析】特殊染色通常指除常规HE以外的、基于化学显色反应的组织化学染色法，用于显示特定成分（如糖原、网状纤维、细菌、真菌等）。免疫组化和原位杂交属于免疫学和分子病理学范畴，虽也是“特殊”技术，但分类上通常单独列出。但在广义考试中，有时也会将D、E归类于现代特殊技术，但严格来说ABC是经典“特殊染色”。47.脱钙过程中需要注意的事项包括（）。A.脱钙液要足量B.每日更换脱钙液C.脱钙后需充分水洗去除酸液D.避免脱钙过度导致组织结构破坏E.脱钙时间越长越好【答案】ABCD【解析】脱钙是一个关键且危险的步骤。脱钙液不足会导致脱钙不净；需更换以维持浓度；脱钙后必须水洗否则影响染色；脱钙过度会导致组织核酸流失、结构崩解。E选项明显错误。48.病理实验室安全防护措施包括（）。A.穿戴实验服、手套、口罩B.操作甲醛、二甲苯时在通风橱内进行C.定期监测实验室有害气体浓度D.锐器废物放入专用容器E.实验室内饮食【答案】ABCD【解析】病理实验室接触大量有毒有害试剂（致癌物、挥发性有机溶剂）。E选项“实验室内饮食”是严重违反生物安全和化学安全规定的行为。49.影响冷冻切片质量的因素有（）。A.组织块大小B.恒冷箱温度设定C.组织固定情况D.切片刀是否锋利E.抗体浓度【答案】ABCD【解析】冷冻切片质量主要取决于物理切片条件。组织块太大难以冻透；温度不当导致切片破碎或无法切片；固定不好细胞形态不清；刀钝导致切片厚薄不均。抗体浓度是免疫组化因素，与冷冻切片本身质量无关（除非做IF）。50.关于病理档案数字化，下列说法正确的有（）。A.包括玻片数字化扫描（全玻片成像）B.便于远程会诊C.节省物理存储空间D.完全替代传统玻片，可丢弃原玻片E.需要昂贵的扫描设备和存储服务器【答案】ABCE【解析】数字化病理是大势所趋，具有便于存储、传输、会诊的优点。但目前法规和规范通常要求仍需保存传统物理蜡块和玻片作为原始档案，数字化图像作为副本或辅助，不可随意丢弃原玻片（D错误）。三、填空题51.病理标本取材时，对于较大的肿瘤，通常应按照“________”原则，选取肿瘤与________交界处、肿瘤实质及________等部位。【答案】最大切面；正常组织；包膜【解析】取材需全面，最大切面能展示肿瘤浸润最深处；交界处观察侵犯情况；包膜观察是否完整。52.HE染色中，分化液通常是________，返蓝液通常是________。【答案】1%盐酸乙醇（或0.5%-1%盐酸酒精）；Scott氏液（或0.1%-1%氨水/碳酸锂水溶液）【解析】这是HE染色中调节色彩对比的关键步骤。53.免疫组化染色中，HRP（辣根过氧化物酶）最常用的显色底物是________，其显色产物呈________色。【答案】DAB（二氨基联苯胺）；棕黄（或褐）【解析】DAB是HRP的标准底物，灵敏度高且沉淀物稳定，不溶于有机溶剂。54.组织切片脱蜡不彻底，会导致染色________，表现为________。【答案】效果差（或着色不均、发白）；切片呈现云雾状或斑驳状【解析】石蜡不溶于水，若脱蜡不净，水溶性染料无法进入组织，导致染色失败或极淡。55.10%中性缓冲福尔马林中，缓冲液通常是________，其作用是防止________产生。【答案】磷酸盐缓冲液（PBS）；福尔马林色素（或黑色沉淀）【解析】缓冲液维持pH稳定，防止甲醛在酸性环境下与血红蛋白反应生成黑色的福尔马林色素，干扰镜下观察。56.病理诊断报告的书写必须严谨，常用“________”表示肯定诊断，“________”表示无法确定诊断。【答案】符合（或诊断为）；考虑为（或倾向、疑为）【解析】这是病理诊断的术语规范，体现诊断的确定性程度。57.液基薄层细胞学制片技术中，常用的保存液成分通常含有________，具有________细胞的作用。【答案】乙醇（或甲醇）；固定（和防腐/保存）【解析】保存液主要是醇类，用于固定细胞形态，裂解红细胞和粘液。58.电镜超薄切片前，样品通常需要用________或________进行双重染色，以增加反差。【答案】醋酸铀；柠檬酸铅【解析】铀染细胞核和结缔组织，铅染细胞质和膜结构，双重染色使电镜图像黑白对比清晰。59.PCR反应的三部曲是：变性、________、________。【答案】退火；延伸【解析】这是PCR的基本热循环参数。60.病理技术室内质控中，对于仪器设备，应建立________制度和________制度。【答案】日常保养（或维护）；定期校准【解析】设备维护和校准是保证检测结果准确性的硬件基础。四、名词解释61.固定【答案】将生物组织浸入化学试剂（固定液）中，通过物理和化学作用，使细胞内蛋白质沉淀或交联，从而终止细胞生命活动，防止细胞自溶和外源性腐败，并尽可能保持组织和细胞固有形态结构和成分的过程。62.嗜酸性【答案】指组织细胞内某种成分对酸性染料（如伊红）具有亲和性，易被染成红色的特性。这些成分通常是碱性蛋白质（如细胞质中的嗜酸性颗粒、胶原蛋白等），其等电点高于pH7，在酸性环境中带正电荷，与带负电荷的酸性染料结合。63.脱水【答案】利用脱水剂（如梯度酒精）置换出组织内的水分，并为后续透明剂和石蜡的渗入创造条件的过程。脱水是组织处理中承上启下的关键步骤，脱水不彻底会导致切片出现空洞。64.免疫组织化学【答案】利用抗原与抗体特异性结合的免疫学原理，通过化学反应使标记在抗体上的显色剂（如荧光素、酶、金属离子等）显色，从而对组织细胞内的抗原（蛋白质、多肽等）进行定性、定位或定量研究的技术。65.抗原修复【答案】在免疫组化染色中，针对经福尔马林固定、石蜡包埋的组织，因醛基交联导致抗原决定簇被遮蔽，采用加热（热诱导修复，HIER）或酶消化（酶诱导修复，PIER）等方法，重新暴露抗原决定簇，以提高抗体阳性检出率的技术手段。66.网状纤维【答案】又称嗜银纤维，是直径较细（3型胶原蛋白）、主要存在于网状结缔组织中的纤维。其表面被糖蛋白包裹，具有嗜银性，经银染后呈黑色，常作为观察组织支架、基底膜及肿瘤浸润的标志。67.液基细胞学【答案】一种不同于传统涂片的细胞学制片新技术。将采集的细胞放入保存液中，经系统化处理（如离心、密度梯度分离、自动化转移），去除血液、粘液等杂质，制成均匀薄层细胞涂片，能显著提高异常细胞的检出率。68.原位杂交【答案】将核酸探针（带有标记物）与经固定处理的细胞或组织切片中的特定核酸序列（DNA或RNA）进行碱基互补配对杂交，然后通过检测标记物来显示目标核酸在细胞内原有位置的技术。69.脱钙【答案】去除骨组织或钙化病灶中钙盐的过程。通常使用酸性脱钙液（如盐酸、甲酸）或螯合剂（EDTA）溶解羟基磷灰石，使组织变软，便于后续进行常规石蜡包埋和切片。70.分化【答案】在染色过程中，利用分化剂（如酸酒精）有选择地褪去组织上过多的染料或不需要的背景染色，以突出显示所需结构（如细胞核）的处理步骤。HE染色中，苏木精染色后的分化是决定染色质量的关键。五、简答题71.简述HE染色中细胞核和细胞质着色的原理。【答案】HE染色（苏木精-伊红染色）的原理基于电荷的相互作用：（1）细胞核着色（嗜碱性）：细胞核中含有丰富的核酸（DNA和RNA）。核酸是酸性物质，在pH为7.6-8.0的弱碱性染液环境中，核酸分子解离出氢离子，带负电荷。苏木精是一种碱性染料（带正电荷），根据电荷异性相吸原理，苏木精与细胞核中的核酸结合，使细胞核被染成蓝色。（2）细胞质着色（嗜酸性）：细胞质的主要成分是蛋白质。蛋白质是两性电解质，但其等电点通常在pH4.7-5.0之间。在常规染色（pH约6-7）环境中，细胞质蛋白带正电荷。伊红是一种酸性染料（带负电荷），因此伊红与细胞质结合，使其被染成红色。综上所述，酸性物质（核）结合碱性染料，碱性物质（质）结合酸性染料。72.简述免疫组化染色中产生假阳性结果的常见原因及预防措施。【答案】常见原因：（1）内源性酶或生物素干扰：如组织中过氧化物酶或生物素导致显色。（2）非特异性吸附：抗体与组织中Fc受体或电荷结合。（3）抗体交叉反应：一抗特异性差，与非目标抗原结合。（4）显色剂污染或显色时间过长。（5）切片干燥。预防措施：（1）进行抗原修复前阻断内源性酶（如封闭）和生物素（使用生物素阻断试剂盒）。（2）使用正常血清（与二抗来源相同）封闭非特异性位点。（3）选用特异性高、效价好的单克隆抗体。（4）严格设立阴性对照（PBS代替一抗）。（5）控制显色时间，镜下观察及时终止反应。（6）染色过程中保持切片湿润。73.简述冰冻切片与石蜡切片相比的优缺点。【答案】冰冻切片的优点：（1）速度快：无需经过脱水、透明、浸蜡等长时间过程，通常在15-30分钟内完成制片，适用于术中快速病理诊断。（2）保存脂质和酶：不需有机溶剂处理，能良好保存细胞内的脂肪、酶及某些抗原活性，适用于脂肪染色和酶组织化学。冰冻切片的缺点：（1）细胞形态结构不如石蜡切片清晰：冷冻过程中易形成冰晶，破坏细胞结构，切片厚度通常较厚（5-10μm）。（2）染色质量相对较差：核质对比度不如石蜡切片鲜明。（3）切片较难：组织块易碎，对技术员操作要求高。（4）不能长期保存：切片易褪色。石蜡切片则相反，虽然耗时（通常需24小时以上），但结构精细、染色清晰、易于长期保存，是常规病理诊断的首选。74.简述病理组织处理中“透明”的目的及常用试剂。【答案】目的：（1）置换：由于石蜡不溶于水但溶于二甲苯，透明剂（如二甲苯）既溶于酒精又溶于石蜡，因此透明剂作为中间媒介，将组织中的酒精置换出来，并为石蜡的渗入打开通道。（2）透明：透明剂折光率（1.52）与组织蛋白折光率（1.53-1.54）相近，浸入后组织变得透明，便于取材观察。常用试剂：最常用的是二甲苯。其他还包括苯（有毒，已少用）、香柏油、氯仿、甲苯等。其中二甲苯透明力强，但易导致组织收缩变脆，时间不宜过长。75.简述PAS染色（过碘酸-雪夫反应）的原理及其在病理诊断中的应用。【答案】原理：（1）氧化：过碘酸（HI）是一种强氧化剂，能将组织中含有乙二醇基（−（2）呈色：新释放的醛基与无色的雪夫液（Schiffreagent，碱性品红亚硫酸溶液）反应，使无色的品红重新恢复为紫红色复合物，沉积在含糖物质上。应用：（1）显示糖原：诊断糖原沉积症。（2）显示基底膜：观察肾小球基底膜、血管基底膜完整性，辅助诊断肾病或肿瘤浸润。（3）显示真菌和寄生虫：某些真菌和寄生虫壁含多糖物质，PAS染色可将其染成红色，用于感染性疾病的诊断。（4）显示粘液：鉴别粘液腺癌。六、综合分析题76.某病理科在制作一批胃镜活检标本时，发现HE染色切片中出现以下问题：细胞核染色淡，细胞质与背景分界不清，且切片上有大量细小的黑色颗粒状物质沉积。（1）请分析可能的原因是什么？（2）针对这些问题，应采取哪些补救或预防措施？【答案】（1）原因分析：①细胞核染色淡，分界不清：可能原因包括苏木精染液陈旧失效、氧化不足；分化时间过长（过度分化）；返蓝不足；或切片在进入染液前脱水脱蜡不彻底（有水分残留）。②大量细小黑色颗粒沉积：这是典型的“苏木精沉淀”或“金属盐沉淀”。原因可能是苏木精染液使用时间过长，产生了氧化膜沉淀；染液未过滤；或者切片上带有未冲洗干净的金属盐（如明矾）结晶。（2）补救与预防措施：①针对核淡：检查并更换新鲜的苏木精染液；缩短分化时间或省略分化（视情况）；确保返蓝液足够且时间充足；检查脱水透明流程，确保切片彻底干燥和水化。②针对沉淀：每天使用前过滤苏木精染液；定期配制新染液；在染色过程中，若发现染液表面有氧化膜，应及时过滤或去除；确保水洗充分，防止试剂结晶残留。③若切片已制成且无法补救，应考虑重新取材或从蜡块重新切片，并严格优化上述染色步骤。77.在进行乳腺癌HER2免疫组化检测时，技术员发现阳性对照（已知HER2阳性的乳腺癌切片）未着色，而患者切片也呈阴性。（1）根据质控原则，这份报告能否发出？为什么？（2）请详细分析导致阳性对照失败的潜在技术环节。【答案】（1）报告不能发出。原因：免疫组化染色必须设立严格的阳性对照。如果阳性对照（已知表达该抗原的组织）未出现预期的阳性染色，说明整个染色系统存在故障（如抗体失效、修复失败、显色系统失灵等）。此时患者切片的阴性结果可能是假阴性（即实际上表达但未染出来），报告阴性会导致严重的医疗差错。必须查明原因并重做。（2）.潜在技术环节分析：①抗体问题：一抗（HER2抗体）过期、稀释错误、未加一抗或漏加；二抗/HRP聚合物失效。②抗原修复问题：未进行热修复；修复液（如柠檬酸盐或EDTA）pH错误；修复时间不足或温度未达标，导致抗原决定簇未暴露。③显色系统问题：DAB底物配制错误（如未加或失效）；DAB变质。④固定问题：阳性对照组织固定时间过长或固定不当（如未固定），导致抗原丢失。⑤操作失误：孵育时间过短；缓冲液（PBS）污染或pH异常；切片在染色过程中干燥。78.某患者送检淋巴结标本，需进行淋巴瘤相关诊断。病理医师要求进行网状纤维染色辅助判断结构破坏情况。请回答：（1）网状纤维染色在淋巴瘤诊断中的主要观察指标是什么？（2）若网状纤维染色结果显示：淋巴结正常结构被破坏，瘤细胞呈巢状或弥漫分布，网状纤维围绕在单个瘤细胞周围或呈不规则穿插，这提示哪种类型的淋巴瘤可能性大？（3）简述网状纤维染色的基本步骤（以Gomori银染为例）。【答案】（1）主要观察指标：观察淋巴结内网状纤维支架的完整性、排列方式以及瘤细胞与网状纤维的关系。正常淋巴结有完整的网状支架包裹淋巴滤泡和窦。（2）提示类型：这提示霍奇金淋巴瘤（HodgkinLymphoma,HL）或某些类型的T细胞淋巴瘤/间变性大细胞淋巴瘤。特别是