错配修复蛋白免疫组织化学检测临床病理专家共识总结2026

错配修复蛋白免疫组织化学检测临床病理专家共识总结2026错配修复是一类高度保守的细胞DNA损伤修复机制，其功能缺陷可致微卫星不稳定（MSI），导致癌基因激活/抑癌基因失活和肿瘤的发生。错配修复蛋白表达检测有助于Lynch综合征筛查、肿瘤分子分型、患者预后评估及免疫治疗决策。免疫组织化学（IHC）检测可快速准确评价错配修复蛋白的表达状态，被国内、外多个指南推荐作为错配修复蛋白表达的常规检测方法。然而，关于错配修复蛋白IHC规范化检测（如标本前处理、检测抗体、检测系统、判读及质控等）目前国内尚无相关的共识和指南。鉴于此，中华医学会病理学分会联合技术学组、国家病理质控中心（PQCC）组织相关专家，基于PQCC近年开展的错配修复蛋白IHC检测质量评估结果，并结合临床实践经验和国内外相关研究进展，形成本共识，旨在规范错配修复蛋白IHC的检测流程与结果判读，提升检测准确性，为临床诊治提供可靠的依据。一、共识的形成方法本共识由中华医学会病理学分会、国家病理质控中心、中华医学会病理学分会技术学组共同发起，并成立共识工作组，涵盖病理医师、病理技师、肿瘤临床医师等多学科专家。本共识参照制订/修订《临床诊疗指南》的基本方法及程序及中国制订/修订临床诊疗指南的指导原则（2022版）的要求，对错配修复蛋白IHC的检测流程、结果判读及质量控制等形成了分级推荐意见，并计划在未来根据循证医学证据的更新进行动态修订。本共识已在国际实践指南注册与透明化平台（http：//）进行了中英文双语注册，注册编号为PREPARE-2025CN1702。工作组所有成员均签署了利益冲突声明，利益冲突委员会对其进行评估，确认所有成员均不存在利益冲突。工作组综合新近循证医学数据、在线调查问卷及专家邮件征询结果，充分讨论后确认了7个方面的问题。经过两轮工作组会议的充分论证，形成11条相应的推荐意见。考虑到本共识的使用者涵盖不同级别医院的病理工作者，为保证内容的通俗性和可操作性，经与指南方法学专家讨论，决定根据专家达成共识的一致性程度来确定推荐级别。工作组采用主题词结合自由词的形式，检索中英文医学文献数据库进行证据检索、筛选与确定。检索截止时间为2025年8月19日。证据质量评价参考GRADE证据分级描述（表1）对纳入文献的方法学质量进行评价。本共识旨在明确错配修复蛋白IHC检测在不同肿瘤类型中的临床意义，规范检测标本前处理、抗体选择与实验流程，统一结果判读及报告标准，建立质量控制与不一致结果处理流程，推动错配修复蛋白IHC检测的标准化与同质化。表1

本共识参考的证据质量和推荐强度分级标准二、错配修复的检测意义错配修复系统的核心功能是识别和纠正DNA复制过程中出现的碱基错配、插入或缺失等错误，维持基因组稳定性。错配修复基因的胚系/体细胞突变或启动子甲基化可以使得相应的错配修复蛋白表达缺失，导致DNA错配修复功能缺陷，进而引起DNA复制错误的累积。肿瘤细胞核错配修复蛋白（通常检测MLH1、PMS2、MSH2、MSH6这4个蛋白）表达完整/正常，称为错配修复功能完整（pMMR）；若其中1个或1个以上蛋白表达缺失/异常，则称为错配修复功能缺陷（dMMR）。pMMR状态下，机体细胞可有效识别并纠正DNA复制过程中产生的错误，保持微卫星稳定（MSS）或仅出现微卫星低度不稳定（MSI-L）；而在dMMR状态下，微卫星序列的复制错误得不到纠正并不断累积，引起微卫星高度不稳定（mcrosatelliteinstability-high，MSI-H）。因而，DNA水平的MSI检测结果与蛋白水平的错配修复检测结果高度一致。一项覆盖32个癌种、纳入201项研究的荟萃分析显示，dMMR/MSI-H在肿瘤中的总体发生率约为2.9%，其中发生率较高的癌种包括子宫内膜癌（26.8%）、小肠癌（21.0%）、结直肠癌（11.7%）、胃癌（8.7%）。IHC检测错配修复蛋白表达，可反映DNA错配修复状态，有助于肿瘤的诊断、预后评估及临床治疗决策。具体应用主要包括：（1）Lynch综合征筛查：Lynch综合征是一种常染色体显性遗传病，主要由错配修复基因或EPCAM基因的胚系致病性变异导致。Lynch综合征患者发生结直肠癌、子宫内膜癌、胃癌等肿瘤的风险显著升高。Lynch综合征相关肿瘤通常表现为dMMR/MSI-H，因此错配修复蛋白表达检测是筛查Lynch综合征的有效途径。（2）子宫内膜癌分子分型：其中的dMMR亚型子宫内膜癌患者预后较好，但对孕激素保守治疗的应答可能性较低，且发生脉管侵犯的概率较高。（3）预后与化疗敏感性评估：Ⅱ～Ⅲ期的dMMR/MSI-H结直肠癌总生存期优于同期别的MSS结直肠癌。此外，Ⅱ期dMMR/MSI-H结直肠癌患者接受5-FU单药化疗不仅未能获益，反而可能导致远期总生存期缩短。因此美国国立综合癌症网络（NCCN）及中国临床肿瘤学会（CSCO）指南均不推荐Ⅱ期dMMR/MSI-H结直肠癌患者接受5-FU单药化疗。（4）免疫检查点抑制剂治疗疗效预测：dMMR/MSI-H导致肿瘤突变负荷（tumormutationburden，TMB）增高并产生大量新抗原，易被免疫系统识别。多项研究证实，免疫检查点抑制剂能显著改善dMMR/MSI-H肿瘤（如结直肠癌、子宫内膜癌、胃癌）患者的预后，延长生存时间。因此，dMMR/MSI-H是免疫检查点抑制剂治疗的疗效预测因子。三、错配修复蛋白/MSI检测技术IHC通过抗原-抗体特异结合检测MLH1、PMS2、MSH2、MSH6蛋白表达情况来判断pMMR或dMMR。而聚合酶链反应（polymerasechainreaction，PCR）技术及下一代测序（nextgenerationsequencing，NGS）技术则通过检测微卫星位点长度变化来判断MSI状态，NGS可同时评估TMB和肿瘤相关基因变异情况。错配修复蛋白/MSI检测技术各有优缺点（表2）。表2

错配修复蛋白/微卫星不稳定（MSI）检测技术的对比错配修复蛋白IHC与DNAMSI检测有较高的一致性，但是错配修复蛋白IHC与MSI-PCR在不同癌种的灵敏度和特异度有所不同。现有错配修复/MSI检测试剂的设计及判读标准主要是基于结直肠癌的数据优化。研究显示，错配修复蛋白IHC与DNAMSI检测在结直肠癌一致率最高，可达98.9%，在其他消化道肿瘤中一致率为92.9%，在上消化道癌中一致率为95%，而其他实体瘤一致率仅为79%。相较于结直肠癌，子宫内膜癌肿瘤细胞占比常偏低，且更容易出现错配修复/MSI异质性与MSI微迁移，所以在子宫内膜癌中错配修复蛋白IHC比MSI-PCR更准确且能直观地反映错配修复/MSI异质性。因此，美国病理家学会、美国临床肿瘤学会（ASCO）、NCCN等指南均推荐对结直肠癌、胃食管癌和小肠癌患者采用错配修复蛋白IHC和/或MSI-PCR作为DNA错配修复缺陷的首选检测方法；在子宫内膜癌中，推荐错配修复蛋白IHC为DNA错配修复缺陷的最佳检测方法。至于3种检测方法在其他癌种中的应用，还需要更多循证医学证据，最佳检测方法尚未明确。错配修复的4个核心蛋白以MLH1-PMS2及MSH2-MSH6异二聚体复合物的形式发挥作用。通常情况下，主导蛋白MLH1或MSH2发生基因突变后，会导致主导蛋白及其下游伙伴蛋白（分别为PMS2和MSH6）同步降解，表现为MLH1-PMS2或MSH2-MSH6协同表达缺失。相反，因MLH1与MSH2还可与其他错配修复蛋白如PMS1、MSH3形成异二聚体，所以PMS2或MSH6的突变通常不会导致其主导蛋白发生降解，MLH1或MSH2仍呈现完整表达。尽管有文献从经济角度推荐只做PMS2和MSH62个指标检测，但这有可能漏掉罕见的仅MLH1或MSH2

表达缺失病例。因此，国内外大部分指南推荐错配修复这4个蛋白同时检测，且强调使用同一肿瘤组织块，以提升检测结果的准确性。推荐意见1：对结直肠癌、胃癌、食管腺癌、小肠癌患者，建议将错配修复蛋白IHC作为DNA错配修复缺陷的常规检测方法之一；对子宫内膜癌患者，建议首选错配修复蛋白IHC检测DNA错配修复缺陷；其他癌种暂不作推荐（证据质量：强；推荐强度：强推荐）。推荐意见2：建议使用同一肿瘤组织块进行错配修复蛋白IHC检测，并同时检测MLH1、MSH2、MSH6和PMS24个核心蛋白（证据质量：强；推荐强度：强推荐）。四、错配修复蛋白IHC检测的基本要求1.标本制备和处理要求：常见的组织标本类型包括活检标本和手术切除标本；对于无法获得组织标本的患者，如有胸腹腔积液等脱落细胞标本，可制成细胞蜡块进行IHC染色。建议标本离体后30min内（最长不超过1h）及时用新鲜配置的3.7%中性甲醛固定液充分固定（手术标本固定前应先按规范切开），避免使用含重金属离子的固定液，固定液的量至少为组织体积的4～10倍。建议根椐标本大小，固定时间宜在6～48h，最长不超过72h，固定温度以室温（18～25

℃）为宜。蜡块保存条件建议在32℃以下。用于IHC检测的切片厚度建议为3～5

μm。完成检测的切片应按常规方法避光干燥、防潮保存。在组织处理过程中，应避免过度脱水和高温烘烤，以免影响错配修复蛋白的抗原性。推荐意见3：建议用于常规错配修复蛋白IHC检测的标本类型包括：（1）肿瘤活检标本和手术切除标本；（2）胸腹腔积液等脱落细胞制成的细胞蜡块标本（证据质量：强；推荐强度：强推荐）。推荐意见4：建议所有标本离体后均应在30min～1h内及时、充分固定，固定时间6～48h为宜，最长不超过72h（证据质量：中等；推荐强度：强推荐）。2.错配修复蛋白IHC检测抗体、检测系统及染色方案推荐：PQCC近3年开展错配修复蛋白IHC室间质评活动，共涉及493家医院及5915张切片，包含结直肠癌1859张、胃癌1183张、子宫内膜癌507张、对照组织扁桃体和阑尾各1183张。根据PQCC及NordiQC（nordicimmunohistochemicalqualitycontrol）室间质评结果，建议使用表3中强推荐的抗体进行染色。依据PQCC数据表明，同一品牌的一抗及与其适配的检测系统配套使用，合格率为95%，与非配套的检测系统配合使用合格率为85%；错配修复蛋白在ASLink48/Omnis平台需配合EnVisionFLEX（+）及TRSHighpH修复液使用，PMS2根据实验室具体情况可选择增加单/双信号放大系统；在BenchMark平台，MLH1和PMS2需配合Amplification扩增显色系统获得良好的实验结果；在Bond平台需配合Polymer

显色系统使用。因MSH2、MSH6在各平台上效果稳定，一般建议采用较为敏感的检测体系即可。另外，使用经行业有公信力机构验证的染色方案，其结果准确性和可靠性均高于实验室自建的染色方案。不同抗体的染色方案推荐见表4,表5,表6,表7。目前，已有错配修复蛋白IHC伴随诊断试剂盒获批上市。表3

错配修复蛋白免疫组织化学（IHC）检测抗体、检测系统及染色方案推荐注：PQCC示国家病理质控中心表4PMS2的IHC检测推荐染色方案a表5MLH1的IHC检测推荐染色方案a表6MSH2的IHC检测推荐染色方案a表7MSH6的IHC检测推荐染色方案a注：a表4～7推荐染色方案引自PQCC2022-2023年公布的染色方案和NordiQC推荐的染色方案推荐意见5：建议使用PQCC推荐的抗体克隆、检测系统及染色方案进行错配修复蛋白IHC检测（证据质量：强；推荐强度：强推荐）。五、错配修复蛋白IHC结果判读推荐关于错配修复蛋白表达完整和表达缺失的定义，国内外尚无统一标准。目前较多中文共识/指南仍将存在任何比例的肿瘤细胞核着色判定为表达完整，将所有肿瘤细胞核不着色判定为表达缺失，但据此判定可能遗漏11%左右的亚克隆缺失病例。欧洲肿瘤年会（ESMO）等指南推荐错配修复蛋白表达完整的定义为所有肿瘤细胞呈清晰的核着色，且核着色强度应超过内对照组织的着色强度，而任何偏离这种情况的表达都归类为表达缺失。基于越来越多文献数据及实践经验，我们建议错配修复蛋白表达完整/正常的判读标准为：内对照阳性，同时肿瘤细胞中出现明确的核染色；错配修复蛋白表达缺失/异常的判读标准为：内对照阳性，肿瘤细胞核染色缺失，或其染色强度相对于紧邻的内对照细胞明显减弱。内对照包括间质细胞、炎性（淋巴）细胞或非肿瘤性上皮细胞（图1）。图1

肿瘤错配修复蛋白免疫组织化学（IHC）染色结果

EnVision法中倍放大；图A示结肠癌MSH2表达完整，肿瘤细胞核强着色，间质细胞核中等-强着色；图B示胃癌MLH1表达缺失，肿瘤细胞核不着色，间质细胞核中等-强着色；图C、D分别示肠癌MLH1、PMS2表达完整，肿瘤细胞核着色强于间质细胞；图E、F分别示同1例肠癌MSH2、MSH6表达缺失，肿瘤细胞核不着色，间质细胞核中等-强着色；图G示子宫内膜癌，左上方腺癌为低分化，右下方为中分化

HE

中倍放大；图H示图G同一区域，右下方腺癌MLH1亚克隆表达缺失，肿瘤细胞核不着色而相邻间质细胞核中等-强着色，左上方腺癌MLH1表达完整，肿瘤细胞核及相邻间质细胞核均中等-强着色图2外对照错配修复蛋白IHC表达模式EnVision法中倍放大；图A

扁桃体淋巴滤泡生发中心细胞核强着色，套区细胞中等强度核着色；图B

阑尾淋巴滤泡生发中心细胞核强阳性，隐窝自下至上1/3着色强度由强渐弱，腔面阴性或弱阳性错配修复蛋白对固定很敏感，判读时应评价固定良好、内对照呈阳性的区域，任何固定不好或坏死、退变的肿瘤组织均不应纳入判读范围。错配修复常见判读陷阱包括：（1）组织固定不充分时IHC染色可表现为斑片状染色缺失，但缺失区域肿瘤细胞及内对照组织细胞均呈阴性染色；（2）在MSH2突变导致的dMMR病例中，MSH6可能表现为肿瘤细胞核微弱或局灶着色，而内对照清晰强着色；（3）在少数病例中，MLH1可出现肿瘤细胞核点状或颗粒状着色，这主要与抗体克隆号M1有关，实为人工假象，应判为dMMR。在错配修复蛋白染色效果欠佳致使结果难以准确判读的情况下，若确认染色流程无问题，建议重复检测或更换蜡块重复检测，如效果仍无改善，可判读为“IHC结果不确定”，并做备注说明，建议进一步行MSI检测。dMMR通常表现为MLH1/PMS2或MSH2/MSH6的成对缺失，其中，MLH1/PMS2缺失是最常见模式；其次为PMS2或MSH6单独缺失。3种或4种蛋白同时表达缺失及其他表达缺失模式较为罕见，判定时须排除判读错误的可能性。少数情况下可见部分肿瘤细胞错配修复蛋白表达缺失即亚克隆缺失的情况。美国病理学家协会将亚克隆缺失定义为：肿瘤组织局部区域1个或多个错配修复蛋白表达缺失，而其他区域4个错配修复蛋白均表达完整，且这两类区域中的内对照细胞均为阳性。错配修复亚克隆缺失在子宫内膜癌中较常见，约占10.5%。目前尚无公认的亚克隆表达缺失百分比阈值，2020年英国妇科肿瘤指南推荐以10%为阈值，从而与组织固定不良所致假象区分。标本固定不充分可能导致肿瘤组织部分染色缺失，表现为肿瘤细胞核及其相邻内对照细胞核均呈阴性染色，而真正的亚克隆缺失表现为肿瘤细胞核表达缺失，但其紧邻的内对照细胞核呈明显的阳性着色，且亚克隆缺失的区域往往与其相邻无缺失区域有截然的界限。关于亚克隆缺失的机制和临床意义研究有限，可能与POLE基因突变、MLH1启动子甲基化、错配修复基因体细胞或胚系突变有关，其与免疫疗效的相关性尚不清楚。有文献报道，少部分具有单个错配修复蛋白的亚克隆缺失且无POLE突变的肿瘤病例，其基因检测表现为高肿瘤突变负荷（TMB-H），提示这些病例可能从免疫治疗中获益。错配修复亚克隆缺失的子宫内膜癌是否应归入dMMR亚型仍有争议。建议在IHC检测报告中明确报告亚克隆缺失状态，为该类患者的免疫治疗获益评估及后续循证研究积累数据。推荐意见6：建议按照以下标准进行错配修复蛋白表达判读。错配修复蛋白表达完整/正常：肿瘤细胞中出现明确的核染色，且较内对照细胞无明显减弱；错配修复蛋白表达缺失/异常：内对照阳性，肿瘤细胞核染色缺失或显著弱于紧邻的内对照细胞；亚克隆表达缺失/异常：部分区域一个或多个错配修复蛋白表达缺失，而其他区域4个错配修复蛋白均表达完整，且这两类区域中的内对照细胞均为阳性。内对照细胞包括间质细胞、炎性（淋巴）细胞或非肿瘤性上皮细胞（证据质量：中等；推荐强度：强推荐）。六、错配修复蛋白IHC检测报告规范错配修复蛋白IHC检测报告应包括错配修复蛋白名称、检测结果以及适当的说明或注释。通常情况下，“+”是指错配修复蛋白表达完整，“-”是指错配修复蛋白表达缺失，考虑到常规工作的实操性及普遍接受的情况，报告中可使用“表达完整”或“+”及“表达缺失”或“-”，不推荐只写“阳性”或“阴性”，并建议补充注释pMMR或dMMR状态。除亚克隆缺失病例可考虑进一步注明缺失区域肿瘤细胞占全部肿瘤细胞的百分比外，报告中不推荐使用++、+++、百分比等定量/半定量描述，以免造成临床对错配修复蛋白检测结果的误判。标本固定不充分等原因常导致染色不均匀，部分区域肿瘤细胞核染色缺失或染色强度减弱，但相应区域内的紧邻内对照细胞核染色同样表现为缺失或减弱，这种情况下的表达缺失或减弱区域通常界限不清、与周围区域存在移行，不应报告为“部分+”“弱+”“+/-”或“80%+”等，以免与真正的亚克隆表达缺失混淆。示例1：MLH1（+），PMS2（+），MSH2（+），MSH6（+），提示pMMR。或MLH1（表达完整），PMS2（表达完整），MSH2（表达完整），MSH6（表达完整），提示pMMR。示例2：MLH1（+），PMS2（+），MSH2（-），MSH6（-），提示dMMR。或MLH1（表达完整），PMS2（表达完整），MSH2（表达缺失），MSH6（表达缺失），提示dMMR。示例3：MLH1（亚克隆-），PMS2（亚克隆-），MSH2（+），MSH6（+），提示亚克隆dMMR。或MLH1（亚克隆表达缺失），PMS2（亚克隆表达缺失），MSH2（表达完整），MSH6（表达完整），提示亚克隆dMMR。后续临床检测建议：MLH1表达缺失时，有条件的医疗机构可进一步行MLH1启动子甲基化检测（在结直肠癌也可选择BRAFV600E突变检测作为替代初筛方案，因为BRAFV600E突变阳性通常提示为散发性肿瘤），以初步区分散发性肿瘤或Lynch综合征。其他错配修复蛋白表达缺失模式时，建议行Lynch综合征相关基因胚系突变检测。当出现亚克隆缺失的情况时，需要进行注释及补充说明。推荐意见7：错配修复蛋白IHC检测报告中，结果表述建议涵盖以下核心要素：（1）检测蛋白名称：明确列出MLH1、PMS2、MSH2及MSH64个蛋白；（2）定性检测结果：建议标明“表达完整”/“+”或“表达缺失”/“-”；（3）检测结果注释：建议补充注释pMMR或dMMR或亚克隆dMMR状态（证据质量：中等；推荐强度：强推荐）。七、错配修复蛋白IHC检测结果不确定的处理原则错配修复蛋白IHC检测易受标本固定、抗体克隆号、抗原修复条件、检测系统灵敏度及新辅助治疗等因素影响，导致结果难以判读的情况。病理医师在判读错配修复蛋白IHC检测结果时应考虑到这些因素，尤其是肿瘤组织样本的固定时间。当错配修复蛋白IHC结果不确定时，建议2名及以上病理医师共同阅片，商议达成共识，必要时可选取不同的肿瘤组织块或治疗前活检组织或换其他克隆号抗体进行重复检测，或补充MSI-PCR方法及经验证的NGS方法的检测。推荐意见8：当错配修复蛋白IHC结果不确定时，建议2名及以上病理医师共同阅片，商议达成共识，必要时可选取不同的肿瘤组织块或治疗前活检组织或更换抗体克隆号重复IHC检测，或补充MSI-PCR方法及经验证的MSI-NGS方法的检测（证据质量：中等；推荐强度：强推荐）。错配修复蛋白IHC与MSI-PCR、NGS结果不一致的处理原则错配修复蛋白IHC与MSI-PCR/NGS的检测结果并不是完全一致。文献报道错配修复蛋白IHC和MSI-PCR的不一致率为10%～20%。关于错配修复蛋白IHC和MSI-PCR不一致原因，排除实验操作、样本前处理、判读的误差外，总结如下。（一）dMMR/MSS1.肿瘤细胞含量不足：在IHC确定dMMR而PCR显示MSS的情况下，应首先核实检测样本中的肿瘤细胞占比，若PCR样本中肿瘤细胞比例较低，可能导致分子检测出现假阴性结果。2.检测试剂的局限性：部分以双核苷酸和多核苷酸重复序列为主的MSI病例可能会被仅专注于单核苷酸重复序列的检测试剂盒遗漏；反之亦然。3.功能冗余：MLH1、MSH2还可与其他错配修复蛋白（如PMS1、MSH3）形成异二聚体。所以当PMS2或MSH6突变导致蛋白缺失时，其功能可被PMS1或MSH3代偿，从而表现为MSS。4.新辅助放化疗：接受新辅助放化疗后的直肠癌样本，可能表现为MSH6染色几乎完全缺失或仅呈核仁着色，同时约30%的病例可出现PMS2染色减弱。这可能导致错配修复蛋白IHC蛋白检测结果被判读为dMMR，而MSI检测为MSS。因此，建议优先选取新辅助治疗前样本进行错配修复蛋白检测。（二）pMMR/MSI-H1.错义突变：某些错配修复基因（如MLH1）的错义突变或非编码区的插入、缺失突变虽可致使蛋白功能失活，但仍保留了抗原性。这种情况下，IHC仍能检测到蛋白表达，但MSI检测结果为MSI-H。2.其他基因突变：错配修复蛋白IHC仅针对4种核心蛋白进行检测，但其他错配修复基因（如MLH3、MSH3和PMS1）的突变也可导致MSI-H，从而会出现pMMR/MSI-H的情况；POLE/POLD1基因核酸外切酶结构域热点突变可导致DNA复制过程中的校对功能丧失，进而引发超突变表型，也可解释<1%的pMMR/MSI-H现象。3.肿瘤异质性：在转移或复发过程中，具有特定分子特征的肿瘤细胞可能被选择性地扩增，导致转移或复发部位的错配修复蛋白表达状态与原发肿瘤不同。4.MLH1点状染色：少数情况MLH1免疫组织化学可表现为核点状染色，易被误判为pMMR。研究证实这种情况主要与抗体克隆号M1相关，实为人工假象，应